| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1、引言 | 第10-18页 |
| ·靶向血管内皮生长因子的肿瘤抗血管生成的基因治疗 | 第10-14页 |
| ·血管生成在肿瘤生成中的作用及肿瘤血管生成的调节因子 | 第10-11页 |
| ·VEGF家族及其受体 | 第11-12页 |
| ·VEGF生物学功能 | 第12-13页 |
| ·以VEGF及VEGFR为靶点的肿瘤治疗 | 第13-14页 |
| ·RNAi及其在肿瘤基因治疗中的应用 | 第14-16页 |
| ·RNAi的发现 | 第14页 |
| ·RNAI机制的研究 | 第14-15页 |
| ·RNAI技术的优势 | 第15页 |
| ·RNAI在肿瘤治疗中的作用 | 第15-16页 |
| ·RNAI抑制肿瘤细胞中VEGF基因的表达 | 第16页 |
| ·课题的研究背景及研究意义 | 第16-18页 |
| ·研究背景 | 第17页 |
| ·研究意义 | 第17-18页 |
| 2、最佳转染条件的筛选 | 第18-25页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·GFP标记的VEGF高表达质粒转染MCF-7细胞株 | 第18页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-21页 |
| ·细胞培养 | 第19-21页 |
| ·细胞转染条件的筛选 | 第21页 |
| ·实验结果与讨论 | 第21-25页 |
| ·实验结果 | 第22-23页 |
| ·讨论 | 第23-25页 |
| 3、靶向VEGF质粒抑制MCF-7细胞增殖 | 第25-32页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·靶向VEGF质粒DNA及MCF-7细胞株 | 第25-26页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·细胞培养 | 第27页 |
| ·荧光显微镜观察质粒抑制VEGF基因表达 | 第27页 |
| ·MTT法检测共转染质粒DNA抑制MCF-7细胞增殖 | 第27-28页 |
| ·实验结果与讨论 | 第28-32页 |
| ·实验结果 | 第28-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 4、化学合成四种靶向VEGF基因的siRNA抑制MCF-7细胞增殖及VEGF基因表达 | 第32-46页 |
| ·实验材料 | 第32-35页 |
| ·化学合成的靶向VEGF基因的siRNA及MCF-7细胞株 | 第32页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第32-35页 |
| ·实验方法 | 第35-41页 |
| ·细胞培养 | 第35页 |
| ·MTT检测siRNA抑制MCF-7细胞增殖 | 第35-36页 |
| ·ELISA检测siRNA抑制MCF-7细胞上清及细胞内VEGF蛋白表达 | 第36-38页 |
| ·RT-PCR检测siRNA抑制MCF-7细胞VEGF mRNA合成 | 第38-41页 |
| ·实验结果与讨论 | 第41-46页 |
| ·实验结果 | 第41-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 5、asiRNA21/23诱导MCF-7细胞凋亡 | 第46-54页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·化学合成的asiRNA21/23及MCF-7细胞株 | 第46页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-48页 |
| ·细胞培养 | 第46页 |
| ·活体细胞培养系统监测asiRNA21/23抑制MCF-7细胞的增殖 | 第46-47页 |
| ·ANNEXIN V-FITC/PI双染色检测asiRNA21/23诱导MCF-7细胞凋亡 | 第47-48页 |
| ·流式细胞术检测asiRNA21/23诱导MCF-7凋亡 | 第48页 |
| ·实验结果与讨论 | 第48-54页 |
| ·实验结果 | 第48-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 6、小结与展望 | 第54-56页 |
| ·课题小结 | 第54页 |
| ·课题创新性 | 第54页 |
| ·课题展望 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
