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PRRSV Henan-1株的分离鉴定及其全基因组序列分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 猪繁殖与呼吸综合征及其病原的研究进展第11-31页
   ·病原学第11-13页
     ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的起源和分类第11-12页
     ·PRRSV 的一般特性第12-13页
   ·病毒的基因组结构与特点第13-17页
     ·病毒基因组编码的蛋白的结构、功能第14-17页
   ·病毒的复制特点第17-18页
   ·PRRSV 的分子遗传变异第18-21页
     ·5'端非编码区和3'端非编码区的遗传变异第18-19页
     ·ORF1 的遗传变异第19页
     ·结构蛋白编码区的遗传变异第19-21页
   ·PRRSV 的流行病学研究第21-23页
   ·致病机理第23-24页
   ·临床症状第24-25页
   ·病理变化第25-26页
     ·临床病理变化第25页
     ·组织病理学变化第25-26页
   ·免疫学特点第26-27页
     ·体液免疫第26页
     ·细胞免疫第26-27页
   ·诊断与防治第27-31页
     ·诊断第27-29页
     ·防制第29-31页
第二章 PRRSV HENAN-1 株的分离与初步鉴定第31-37页
   ·材料与方法第31-34页
     ·材料第31-32页
     ·方法第32-34页
   ·结果与分析第34-36页
     ·病毒分离第34-35页
     ·病毒的RT-PCR 初步鉴定第35-36页
     ·分离毒株TCID50 的测定第36页
   ·讨论第36页
   ·小结第36-37页
第三章 PRRSV HENAN-1 株全基因组的序列测定及其分析第37-54页
   ·材料第37-39页
     ·毒株第37页
     ·菌株、质粒第37页
     ·主要试剂及培养基的配制第37-38页
     ·PRRSV 分离株核苷酸序列第38-39页
     ·分子生物学分析软件第39页
     ·主要仪器第39页
   ·方法第39-44页
     ·PRRSV 病毒的增殖第39-40页
     ·引物设计第40页
     ·PRRSV 感染的Marc-145 细胞中病毒总RNA 的提取第40-41页
     ·RT-PCR第41页
     ·RT-PCR 产物的鉴定第41页
     ·PCR 产物的纯化回收cDNA 片段第41-42页
     ·纯化产物与pMD18-T Vector 连接第42页
     ·感受态细胞的制备(CaCl_2 法)第42页
     ·连接产物的转化第42-43页
     ·重组质粒的提取第43页
     ·重组质粒的PCR 鉴定第43-44页
     ·重组质粒的酶切鉴定第44页
     ·重组质粒的测序分析第44页
     ·分离毒株Henan-1 的全基因组拼接第44页
     ·基因组结构分析第44页
     ·序列比对第44页
     ·系统进化分析第44页
   ·结果与分析第44-51页
     ·PRRSV 各个基因片段的RT-PCR 扩增结果第44-45页
     ·重组质粒的PCR 鉴定结果第45-46页
     ·重组质粒的酶切鉴定结果第46页
     ·各个基因片段的测序与序列拼接第46页
     ·PRRSV Henan-1 株的基因组组成和结构分析第46-47页
     ·各分离毒株的序列同源性分析第47页
     ·Nsp2 的氨基酸序列分析第47-50页
     ·各结构蛋白核苷酸序列及其推导氨基酸序列同源性比较第50-51页
     ·系统进化分析第51页
   ·讨论第51-53页
     ·5′端及3′端非编码区的变异第52页
     ·非结构蛋白编码区的变异第52页
     ·结构蛋白编码区的变异第52-53页
     ·PRRSV 的系统进化分析第53页
   ·小结第53-54页
结论第54-55页
参考文献第55-64页
附录第64-76页
英文缩略词及中英文对照第76-77页
致谢第77-78页
作者简介第78页

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