产甲壳素酶菌株的筛选、发酵条件优化和酶学性质研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 0 前言 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-26页 |
| ·甲壳素和壳聚糖 | 第12页 |
| ·甲壳寡糖和壳寡糖 | 第12-14页 |
| ·甲壳寡糖和壳寡糖的性质 | 第13-14页 |
| ·甲壳寡糖和壳寡糖的应用 | 第14页 |
| ·甲壳寡糖和壳寡糖的制备工艺 | 第14-16页 |
| ·化学法 | 第14-15页 |
| ·糖转移法 | 第15-16页 |
| ·酶降解法 | 第16页 |
| ·甲壳素酶(chitinase) | 第16-22页 |
| ·概述 | 第16-17页 |
| ·甲壳素酶的分类 | 第17-19页 |
| ·甲壳素的酶水解机理及动力学研究进展 | 第19-20页 |
| ·甲壳素酶的应用 | 第20-22页 |
| ·发酵技术 | 第22-23页 |
| ·国内外研究现状 | 第23-26页 |
| 2 产甲壳素酶菌株的筛选 | 第26-32页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·主要实验原料及试剂 | 第26页 |
| ·主要设备 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·产甲壳素酶菌株筛选 | 第27页 |
| ·甲壳素酶活力的测定 | 第27-28页 |
| ·筛得菌株的菌种鉴定 | 第28-29页 |
| ·PCR 法扩增细菌的 16S rDNA 基因 | 第28-29页 |
| ·实验结果 | 第29-30页 |
| ·产甲壳素酶菌株筛选结果 | 第29-30页 |
| ·菌种鉴定 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 3 产甲壳素酶菌株的发酵条件优化 | 第32-42页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·菌种 | 第32页 |
| ·仪器与试剂 | 第32-33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·测定甲壳素酶活力 | 第33页 |
| ·菌种保藏 | 第33页 |
| ·产酶条件研究 | 第33-34页 |
| ·发酵罐培养 | 第34-35页 |
| ·发酵条件优化 | 第35-39页 |
| ·混合发酵对产酶的影响 | 第35-36页 |
| ·不同氮源对产酶的影响 | 第36-37页 |
| ·不同碳源对产酶的影响 | 第37页 |
| ·培养基起始 pH 对产酶的影响 | 第37-38页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第38页 |
| ·装瓶量对产酶的影响 | 第38-39页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第39页 |
| ·产甲壳素酶菌株的上罐发酵 | 第39-40页 |
| ·发酵条件优化的讨论 | 第40-42页 |
| ·单次单因子发酵条件的优化 | 第40页 |
| ·混合发酵 | 第40页 |
| ·优化效果 | 第40-42页 |
| 4 甲壳素酶的分离纯化 | 第42-52页 |
| ·菌种来源 | 第42页 |
| ·仪器与试剂 | 第42-43页 |
| ·测定方法 | 第43-45页 |
| ·酶的分离纯化 | 第45-47页 |
| ·甲壳素粗酶的制备 | 第45页 |
| ·粗酶的进一步分离纯化 | 第45-47页 |
| ·实验结果 | 第47-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 5. 甲壳素酶酶学性质的初步研究 | 第52-62页 |
| ·各种因素对甲壳素酶活性的影响 | 第52-54页 |
| ·酶反应的最适温度 | 第52-53页 |
| ·酶反应的最适 pH | 第53页 |
| ·不同底物对酶反应活性的影响 | 第53页 |
| ·不同处理方式的甲壳素作为底物对酶反应活性的影响 | 第53页 |
| ·不同底物量对酶反应活性的影响 | 第53页 |
| ·金属离子对酶反应活性的影响 | 第53-54页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第54页 |
| ·pH 对酶稳定性的影响 | 第54页 |
| ·甲壳素酶的酶解产物的初步研究 | 第54-55页 |
| ·酶解寡糖的制备 | 第54页 |
| ·硅胶板薄层层析 | 第54-55页 |
| ·实验结果 | 第55-61页 |
| ·酶学性质的讨论 | 第61-62页 |
| 6 本文小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
