| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-35页 |
| ·孢子体型自交不亲和性研究进展 | 第17-22页 |
| ·SSI自交不亲和性的信号传导 | 第17-18页 |
| ·自交不亲和信号传导的编码元件 | 第18-21页 |
| ·自交不亲和的信号传导模型 | 第21-22页 |
| ·SI决定因子的鉴定及结构与功能的研究进展 | 第22-28页 |
| ·SI雌性决定因子—SRK | 第23-25页 |
| ·SI雄性决定因子—SCR | 第25-27页 |
| ·SRK与SCR的相互作用研究 | 第27-28页 |
| ·RACE技术在植物新基因克隆上的应用 | 第28-32页 |
| ·RACE原理 | 第28-29页 |
| ·RACE技术的优势与局限 | 第29-30页 |
| ·RACE技术的改良 | 第30-31页 |
| ·新型的RACE技术 | 第31-32页 |
| ·RACE技术的应用现状及发展前景 | 第32页 |
| ·Novagen pET表达系统的简介 | 第32-35页 |
| ·pET载体的类型 | 第33页 |
| ·载体的选择和融合标签的介绍 | 第33-34页 |
| ·制备不带融合标签的天然蛋白 | 第34页 |
| ·用于表达的菌株 | 第34-35页 |
| 引言 | 第35-37页 |
| 第二章 甘蓝SCR/SP11的克隆及其体外表达 | 第37-59页 |
| ·材料 | 第37-39页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·质粒与菌株 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·工具酶和主要分子生物学试剂盒 | 第37页 |
| ·培养基和其他试剂 | 第37-39页 |
| ·方法 | 第39-48页 |
| ·总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第40页 |
| ·引物设计 | 第40-41页 |
| ·SCR基因cDNA PCR扩增 | 第41页 |
| ·目的片段克隆 | 第41-44页 |
| ·测序与序列分析 | 第44页 |
| ·SCR_(ZQ)在大肠杆菌BL21中表达 | 第44-48页 |
| ·表达产物纯化 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-58页 |
| ·甘蓝花药总RNA的提取 | 第48-49页 |
| ·SCR基因克隆与序列分析 | 第49-54页 |
| ·SCR_(ZQ)表达质粒构建与鉴定 | 第54-56页 |
| ·SCR_(ZQ)在大肠杆菌BL21中诱导表达 | 第56-58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 第三章 甘蓝SRK胞外域编码区的克隆及表达 | 第59-81页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·植物材料 | 第59页 |
| ·质粒与菌株 | 第59页 |
| ·工具酶及主要的分子生物学试剂盒 | 第59页 |
| ·培养基及其他试剂 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-64页 |
| ·引物设计 | 第59-60页 |
| ·mSRK基因cDNA-PCR扩增 | 第60-61页 |
| ·目的片段克隆 | 第61-62页 |
| ·测序与序列分析 | 第62页 |
| ·mSRK在大肠杆菌BL21中表达 | 第62-64页 |
| ·Nus·A-mSRK表达产物的纯化 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-79页 |
| ·甘蓝ZQ柱头总RNA的提取 | 第64-65页 |
| ·mSRK1基因克隆与序列分析 | 第65-73页 |
| ·mSRK2序列的克隆 | 第73-74页 |
| ·mSRK表达质粒的构建与建立 | 第74-76页 |
| ·mSRK在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第76-79页 |
| ·Nus·A-mSRK融合蛋白的纯化 | 第79页 |
| ·小结 | 第79-81页 |
| 第四章 甘蓝SI决定因子相互作用的体外检测 | 第81-86页 |
| ·材料 | 第81-82页 |
| ·方法 | 第82-83页 |
| ·诱饵蛋白SCR_(ZQ)制备 | 第82页 |
| ·靶蛋白SRK溶液制备 | 第82页 |
| ·SCR_(ZQ)与SRK相互作用检测 | 第82-83页 |
| ·结果与分析 | 第83-85页 |
| ·SCR_(ZQ)和Nus·A-mSRK相互作用的体外检测 | 第83-84页 |
| ·SCR_(ZQ)和mSRK相互作用的体外检测 | 第84-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 第五章 授粉引发的甘蓝SI相关基因的探讨 | 第86-104页 |
| ·材料 | 第87页 |
| ·植物材料 | 第87页 |
| ·质粒与菌株 | 第87页 |
| ·工具酶及主要的分子生物学试剂盒 | 第87页 |
| ·培养基及其他试剂 | 第87页 |
| ·方法 | 第87-91页 |
| ·引物设计 | 第87-88页 |
| ·基因克隆 | 第88-89页 |
| ·目的片段的回收转化 | 第89页 |
| ·测序与序列分析 | 第89页 |
| ·NG在甘蓝不同组织的RT-PCR表达分析 | 第89-90页 |
| ·NG在大肠杆菌BL21中表达 | 第90-91页 |
| ·结果与分析 | 第91-102页 |
| ·兼并引物的3'-race扩增 | 第91-93页 |
| ·扩增产物序列分析与筛选 | 第93-99页 |
| ·NG在甘蓝不同组织的RT-PCR表达分析 | 第99-100页 |
| ·NG在大肠杆菌BL21中体外表达分析 | 第100-102页 |
| ·本章小结 | 第102-104页 |
| 第六章 讨论 | 第104-109页 |
| ·SCR_(ZQ)与mSRK序列与结构分析 | 第104-105页 |
| ·Nus·A融合蛋白表达系统 | 第105页 |
| ·mSRK两种pET表达载体的构建 | 第105-106页 |
| ·SCR_(ZQ)与mSRK相互作用分析及构建平台运用 | 第106页 |
| ·授粉引发SI相关基因的探讨 | 第106-107页 |
| ·新序列NG的初步研究 | 第107-109页 |
| 第七章 结论与创新点 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-120页 |
| 缩略词表 | 第120-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 在学期间发表文章情况 | 第123页 |