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纳米颗粒对血管内皮细胞的毒性作用研究

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
第一章 前言第13-34页
   ·纳米材料的定义第13页
   ·纳米材料在医药技术领域的应用第13-20页
     ·影像诊断第13-14页
     ·人造骨骼第14-15页
     ·消毒杀菌第15页
     ·纳米药物载体第15-16页
     ·纳米基因载体第16-20页
   ·纳米材料的安全性问题第20-21页
   ·不同纳米材料的毒理学研究第21-28页
     ·碳纳米管的毒理学研究第21-23页
     ·富勒烯(C_(60),fullerene)的毒理学研究第23页
     ·二氧化钛的毒理学研究第23-24页
     ·量子点的毒理学研究第24页
     ·阿霉素(外包覆聚氰基丙烯酸酯纳米微粒)的毒理学研究第24-25页
     ·壳聚糖纳米粒子的毒理学研究第25页
     ·PAMAM纳米粒子的毒理学研究第25-26页
     ·聚乙烯亚胺纳米粒子的毒理学研究第26-28页
   ·纳米材料在生物体中的毒性作用机理第28页
   ·进一步研究开展方向第28-30页
     ·纳米颗粒的整体生物效应第29页
     ·纳米颗粒在体内的吸收、分布、代谢和清除第29页
     ·纳米颗粒与细胞的相互作用第29页
     ·纳米颗粒与生物大分子的相互作用研究第29-30页
     ·大气中纳米颗粒的生物效应第30页
   ·研究面临的挑战第30-33页
   ·课题提出第33-34页
第二章 脐静脉内皮细胞的培养和鉴定第34-45页
   ·引言第34-35页
   ·实验材料和方法第35-39页
     ·实验材料第35-36页
     ·实验设备第36页
     ·实验试剂配置第36-37页
     ·原代脐静脉内皮细胞的分离第37-38页
     ·人脐静脉内皮细胞的原代培养第38页
     ·原代脐静脉内皮细胞的鉴定第38-39页
   ·结果第39-42页
     ·原代及传代培养的人脐静脉内皮细胞体外生长情况及形态第39-40页
     ·vWF相关抗原免疫组化检测第40-41页
     ·人脐静脉内皮细胞的超微结构观察第41-42页
   ·讨论第42-43页
   ·小结第43-45页
第三章 功能化多壁碳纳米管对血管内皮细胞毒性的研究第45-61页
   ·引言第45-46页
   ·实验材料和方法第46-51页
     ·实验材料第46页
     ·实验设备第46-47页
     ·实验试剂配置第47-48页
     ·原代脐静脉内皮细胞的分离第48-49页
     ·人脐静脉内皮细胞的原代培养第49页
     ·人脐静脉内皮细胞的传代培养第49页
     ·碳纳米管悬液的制备第49页
     ·条件培养液的制备第49-50页
     ·碳纳米管或条件培养液与细胞共育第50页
     ·细胞活力检测第50页
     ·细胞超微结构检测第50页
     ·统计学分析第50-51页
   ·结果第51-55页
     ·多壁碳纳米管对细胞活力的影响第51-52页
     ·细胞超微结构改变第52-55页
   ·讨论第55-59页
   ·小结第59-61页
第四章 多壁碳纳米管的长度对其造成血管内皮细胞毒性的影响第61-83页
   ·前言第61-62页
   ·实验材料和方法第62-68页
     ·实验材料第62页
     ·实验设备第62-63页
     ·实验试剂配置第63-64页
     ·原代脐静脉内皮细胞的分离第64-65页
     ·人脐静脉内皮细胞的原代培养第65页
     ·人脐静脉内皮细胞的传代培养第65页
     ·多壁碳纳米管的X射线光电子能谱分析第65页
     ·多壁碳纳米管的扫描电镜观察和透射电镜观察第65-66页
     ·多壁碳纳米管的粒径测试第66页
     ·碳纳米管悬液的制备第66页
     ·条件培养液的制备第66页
     ·碳纳米管或条件培养液与细胞共育第66页
     ·细胞活力检测第66-67页
     ·细胞凋亡检测第67页
     ·培养基上清液死亡细胞计数第67页
     ·细胞超微结构检测第67页
     ·统计学分析第67-68页
   ·结果第68-79页
     ·多壁碳纳米管的表征第68-73页
     ·多壁碳纳米管悬液制备第73-74页
     ·多壁碳纳米管对细胞活力的影响第74-75页
     ·细胞凋亡检测第75-77页
     ·脐静脉内皮细胞超微结构第77-79页
     ·纳米管渗出液对细胞活力的影响第79页
   ·讨论第79-82页
   ·小结第82-83页
第五章 精氨酸修饰壳聚糖/pIRES-TFPI DNA复合物对脐静脉内皮细胞的毒性作用研究第83-99页
   ·引言第83页
   ·实验材料和方法第83-92页
     ·实验材料第83-85页
     ·实验设备第85-86页
     ·脐静脉内皮细胞的分离培养第86页
     ·质粒pIRES-TFPI及pIRES-neo扩增与提取第86-88页
     ·壳聚糖及其修饰物与pIRES-TFPI及pIRES-neo的DNA形成的纳米粒子的制备第88页
     ·携带TFPI基因的壳聚糖及其修饰物纳米粒子转染第88-89页
     ·RT-PCR检测TFPI mRNA表达第89-91页
     ·细胞活力检测第91-92页
     ·统计学分析第92页
   ·实验结果第92-97页
     ·测得所得DNA溶液的浓度第92页
     ·壳聚糖及其精氨酸修饰物纳米粒子的制备和表征第92-93页
     ·TFPI基因转染对血管内皮细胞对细胞活力的影响第93-95页
     ·RT-PCR检测TFPI基因在细胞内的表达第95-97页
   ·讨论第97-98页
   ·本章小结第98-99页
第六章 全文总结第99-101页
参考文献第101-113页
致谢第113页

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