拟南芥抗寒基因CBF1的克隆、表达载体的构建及鸡冠花离体再生体系的建立
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-24页 |
| 1 CBF的发现 | 第11-12页 |
| 2 CBF家族及其结构 | 第12-15页 |
| ·CBF家族 | 第12-13页 |
| ·CBF基因及其编码蛋白质的结构特点 | 第13-15页 |
| 3 CBF的功能 | 第15-17页 |
| 4 CBF通路及其调控因子 | 第17-21页 |
| 5 与CBF相关的其它低温调节途径 | 第21-22页 |
| 6 CBF基因工程的研究进展 | 第22-23页 |
| 7 研究意义与目的 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-33页 |
| 1 材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料、载体和菌株 | 第24页 |
| ·培养条件 | 第24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要试剂的配制方法 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-33页 |
| ·CBF基因的克隆 | 第25-27页 |
| ·CBF克隆载体的构建 | 第27-29页 |
| ·CBF表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·鸡冠花再生体系的建立 | 第31-33页 |
| 第三章 实验结果 | 第33-40页 |
| 1 拟南芥CBF1基因的克隆 | 第33页 |
| ·CTAB法提取拟南芥总DNA | 第33页 |
| ·CBF1的克隆 | 第33页 |
| 2 CBF1克隆载体的构建 | 第33-36页 |
| ·pMD18-CBF1的构建 | 第33-35页 |
| ·CBF1的序列鉴定 | 第35-36页 |
| 3 CBF1表达载体的构建 | 第36-38页 |
| ·表达载体pCAMBIA1300的特征 | 第36页 |
| ·pCAMBIA1300-CBF1的构建 | 第36-38页 |
| 4 鸡冠花再生体系的建立 | 第38-40页 |
| ·愈伤组织的诱导与芽的分化 | 第38页 |
| ·根的诱导与小植株的移栽 | 第38-40页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第40-47页 |
| 1 CBF1的克隆及其影响因素 | 第41-42页 |
| 2 CBF1的载体构建及其影响因素 | 第42-45页 |
| ·大肠杆菌DH5α的转化 | 第42-44页 |
| ·质粒提取方法的优化 | 第44页 |
| ·CBF1载体的构建及优化 | 第44-45页 |
| 3 鸡冠花离体再生体系的建立 | 第45-46页 |
| 4 结论与展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 读研期间发表论文的情况 | 第56页 |