| 缩略词表(Abbreviations) | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| ·植物病毒的危害 | 第12-13页 |
| ·马铃薯Y病毒(PVY) | 第12-13页 |
| ·马铃薯S病毒(PVS) | 第13页 |
| ·传统的植物脱毒方法及其优缺点 | 第13-14页 |
| ·热处理脱毒法 | 第13-14页 |
| ·茎尖培养脱毒法 | 第14页 |
| ·化学疗法和基因工程技术脱毒法 | 第14页 |
| ·低温疗法(Cryotherapy)的原理、优点及面临的问题 | 第14-16页 |
| ·低温疗法的原理 | 第14-15页 |
| ·低温疗法的优点 | 第15页 |
| ·低温疗法脱除植物病毒需要解决的问题 | 第15-16页 |
| ·超低温保存方法 | 第16-18页 |
| ·植物超低温保存的遗传变异研究 | 第18-20页 |
| ·基于PCR技术的分子标记检测 | 第18-20页 |
| ·RAPD即随机扩增多态性DNA | 第19页 |
| ·AFLP即扩增片段长度多态性 | 第19页 |
| ·MSAP即甲基敏感扩增多态性 | 第19-20页 |
| ·单核苷酸多态性分子标记 | 第20页 |
| ·DNA甲基化检测的意义 | 第20页 |
| ·马铃薯病毒鉴定与检测方法 | 第20-24页 |
| ·以抗体为基础的免疫学检测方法 | 第21-22页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第21页 |
| ·病毒抗血清的制备 | 第21-22页 |
| ·核酸杂交检测技术 | 第22-23页 |
| ·核酸斑点杂交技术 | 第22-23页 |
| ·PCR微量板杂交检测技术 | 第23页 |
| ·RT-PCR检测技术 | 第23-24页 |
| ·常规RT-PCR检测技术 | 第23-24页 |
| ·血清学与分子生物学技术的比较 | 第24页 |
| ·对标本的要求及其敏感性和特异性 | 第24页 |
| ·操作的复杂性和检测费用 | 第24页 |
| ·马铃薯病毒检测技术讨论与展望 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第25-26页 |
| 2 材料和方法 | 第26-32页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·供试材料 | 第26页 |
| ·仪器设备 | 第26页 |
| ·生化试剂 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-32页 |
| ·马铃薯茎尖超低温保存程序的优化结果 | 第26-27页 |
| ·预培养和预处理 | 第26页 |
| ·玻璃化处理 | 第26-27页 |
| ·化冻与恢复培养 | 第27页 |
| ·DNA提取 | 第27-28页 |
| ·DNA质量检测 | 第28页 |
| ·AFLP分析 | 第28-30页 |
| ·MSAP分析 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR对病毒的检测 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-44页 |
| ·超低温保存过程中各种处理对于保存材料再生率的影响 | 第32-36页 |
| ·预培养时间对超低温保存后茎尖再生率的影响 | 第32页 |
| ·60%PVS_2预处理对再生率的影响 | 第32-33页 |
| ·PVS_2处理时间对再生率的影响 | 第33-34页 |
| ·暗培养时间对再生率的影响 | 第34页 |
| ·液氮处理对材料再生率的影响 | 第34-35页 |
| ·解冻方式对冻后材料再生率的影响 | 第35页 |
| ·洗涤时间对冻后材料再生率的影响 | 第35-36页 |
| ·AFLP技术分析不同处理前后材料的变异情况 | 第36-37页 |
| ·基因组甲基化水平MSAP分析 | 第37-39页 |
| ·RT-PCR病毒检测 | 第39-43页 |
| ·RNA的提取及完整性检测 | 第39-40页 |
| ·cDNA的合成步骤如下 | 第40页 |
| ·β-Actin作内参检测cDNA合成 | 第40-41页 |
| ·PVY病毒的检测结果 | 第41-42页 |
| ·PVS病毒的检测结果 | 第42-43页 |
| ·利用脱毒苗进行生根移栽和脱毒苗生产试管薯研究 | 第43-44页 |
| 4 结论 | 第44-45页 |
| 5 讨论 | 第45-47页 |
| ·马铃薯茎尖的超低温保存问题 | 第45页 |
| ·遗传变异与甲基化变化研究 | 第45-46页 |
| ·超低温保存脱除马铃薯病毒的情况 | 第46-47页 |
| 6 展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 图版与图版说明 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58页 |