缩略语表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第11-13页 |
文献回顾 | 第13-23页 |
成骨细胞特异性TGFBR2 基因敲除小鼠发生骨质疏松 | 第23-50页 |
1 材料 | 第23-24页 |
·主要试剂及设备 | 第23页 |
·实验动物 | 第23-24页 |
2 方法 | 第24-34页 |
·小鼠基因组DNA的制备 | 第24页 |
·小鼠基因型鉴定 | 第24-25页 |
·石蜡包埋、切片及HE染色 | 第25-26页 |
·LacZ染色检测Cre重组酶的功能 | 第26-27页 |
·抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色 | 第27页 |
·骨骼X线分析 | 第27-28页 |
·micro-CT扫描及三维重建 | 第28页 |
·塑料切片的制备 | 第28页 |
·甲苯胺蓝染色及骨组织形态计量 | 第28-29页 |
·原代成骨细胞的分离培养 | 第29-30页 |
·原代成骨细胞RNA的提取及Real-time PCR | 第30-31页 |
·原代成骨细胞蛋白质的提取及蛋白浓度测定 | 第31页 |
·Western blotting | 第31-32页 |
·BrdU掺入法测定成骨细胞的增殖能力 | 第32-33页 |
·碱性磷酸酶(ALP)染色 | 第33-34页 |
·TUNEL法检测成骨细胞的凋亡 | 第34页 |
·数据分析 | 第34页 |
3 结果 | 第34-47页 |
·OC-Cre;ROSA26 双转基因小鼠的获得 | 第34-35页 |
·OC-Cre;TGFBR2~(flox/flox)基因敲除小鼠的获得 | 第35-36页 |
·OC-Cre;ROSA26 小鼠LacZ染色结果及OC-Cre;TGFBR2~(flox/flox)基因敲除小鼠重组带的鉴定 | 第36-37页 |
·OC-Cre;TGFBR2~(flox/flox)基因敲除小鼠生长延迟及骨密度下降 | 第37-39页 |
·OC-Cre;TGFBR2~(flox/flox)基因敲除小鼠骨体积明显下降 | 第39-41页 |
·OC-Cre;TGFBR2~(flox/flox)基因敲除小鼠成骨能力明显下降 | 第41-43页 |
·OC-Cre;TGFBR2~(flox/flox)基因敲除小鼠骨吸收能力明显下降 | 第43-44页 |
·TGFBR2 基因敲除导致成骨细胞分化加快,凋亡增加 | 第44-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
小结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-63页 |
附录 | 第63-64页 |
个人简历和研究成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-67页 |