| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-34页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·头孢菌素概述 | 第12-16页 |
| ·头孢菌素分类 | 第12-13页 |
| ·头孢菌素结构及作用机制 | 第13-15页 |
| ·国内外头孢菌素的产销状况 | 第15-16页 |
| ·7-氨基头孢烷酸概述 | 第16-23页 |
| ·7-ACA 简介 | 第16-17页 |
| ·7-ACA 的生产方法 | 第17-21页 |
| ·化学裂解法 | 第17-20页 |
| ·酶法裂解 | 第20-21页 |
| ·以7-ACA 为原料的产品 | 第21页 |
| ·生产7-ACA 的反应器 | 第21-22页 |
| ·7-ACA 的生产状况 | 第22-23页 |
| ·我国目前7-ACA 生产存在的问题 | 第23页 |
| ·头孢菌素酰化酶概述 | 第23-30页 |
| ·头孢菌素酰化酶的分类和来源 | 第23-25页 |
| ·头孢菌素酰化酶的生理功能及酶学特性 | 第25-27页 |
| ·结构和生理功能 | 第25-26页 |
| ·头孢菌素酰化酶的酶学特性 | 第26-27页 |
| ·头孢菌素酰化酶基因的克隆与表达 | 第27-29页 |
| ·头孢菌素酰化酶的纯化和固定化 | 第29页 |
| ·头孢菌素酰化酶的应用前景 | 第29-30页 |
| ·细胞破碎方法概述 | 第30-32页 |
| ·细胞破碎技术的分类 | 第30页 |
| ·常用细胞破碎技术的简介 | 第30-32页 |
| ·机械法与非机械法的比较 | 第32页 |
| ·本课题的选题目的、意义和主要研究内容 | 第32-34页 |
| ·选题目的、意义 | 第32-33页 |
| ·研究内容 | 第33-34页 |
| 第二章 试验材料与分析方法的建立 | 第34-44页 |
| ·试验材料 | 第34-37页 |
| ·菌种 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-36页 |
| ·试验仪器 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·缓冲液的配置 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-38页 |
| ·重组大肠杆菌培养 | 第37页 |
| ·培养基灭菌条件 | 第37页 |
| ·斜面培养 | 第37页 |
| ·种子培养 | 第37-38页 |
| ·分析方法 | 第38-44页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第38-39页 |
| ·考马斯亮蓝法测定总蛋白的量 | 第39-40页 |
| ·原理 | 第39页 |
| ·试剂的配制 | 第39页 |
| ·标准曲线制作 | 第39-40页 |
| ·粗酶液中总蛋白质浓度的测定 | 第40-42页 |
| ·对二甲氨基苯甲醛（PDAB）比色法测定头孢菌素C 酰化酶活力 | 第40-41页 |
| ·HPLC 验证 CPC acylase 催化 CPC 生成 7-ACA | 第41-42页 |
| ·葡萄糖及反应过程中乙酸浓度的测定 | 第42-44页 |
| 第三章 产头孢菌素酰化酶重组大肠杆菌破碎条件和纯化的研究 | 第44-51页 |
| ·引言 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·不同破碎细胞壁方法 | 第44-45页 |
| ·超声破碎方法 | 第45页 |
| ·硫酸铵盐析沉淀法 | 第45页 |
| ·等电点沉淀法 | 第45-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-50页 |
| ·不同破碎细胞壁方法对酶活性的影响 | 第46-47页 |
| ·超声功率和次数对重组大肠杆菌酶活的影响 | 第47-48页 |
| ·超声占空比对重组大肠杆菌酶活的影响 | 第48-49页 |
| ·硫酸铵盐析沉淀法对酶活的影响 | 第49页 |
| ·等电点沉淀法对酶活的影响 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 产CPC 酰化酶重组大肠杆菌发酵的培养基优化 | 第51-59页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·不同培养基的配置方法 | 第51页 |
| ·不同种类碳源的选取 | 第51页 |
| ·不同葡萄糖浓度的选取 | 第51-52页 |
| ·不同氮源的选取 | 第52页 |
| ·金属离子的选取 | 第52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-58页 |
| ·不同培养基对酶活的影响 | 第52-53页 |
| ·不同碳源对酶活的影响 | 第53页 |
| ·不同葡萄糖浓度对酶活的影响 | 第53-55页 |
| ·不同氮源对酶活的影响 | 第55-57页 |
| ·不同金属离子对酶活的影响 | 第57-58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 第五章 产头CPC 酰化酶重组大肠杆菌摇瓶分批发酵条件优化 | 第59-69页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·试验方法 | 第59-60页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第59页 |
| ·酶活曲线的绘制 | 第59页 |
| ·发酵温度的选取 | 第59页 |
| ·接种量的选取 | 第59-60页 |
| ·接种菌龄的选取 | 第60页 |
| ·PH 的选取 | 第60页 |
| ·正交试验设计优化发酵条件 | 第60页 |
| ·结果和讨论 | 第60-68页 |
| ·重组大肠杆菌种子培养的细胞生长曲线 | 第60-61页 |
| ·摇瓶分批发酵工艺条件的优化 | 第61-66页 |
| ·酶活曲线 | 第61页 |
| ·温度对发酵过程及酶活的影响 | 第61-63页 |
| ·接种量对发酵过程及酶活的影响 | 第63-64页 |
| ·接种菌龄对发酵过程及酶活的影响 | 第64-65页 |
| ·PH 对发酵过程及酶活的影响 | 第65-66页 |
| ·正交试验设计优化发酵条件 | 第66-68页 |
| ·本章小结 | 第68-69页 |
| 第六章 CPC 酰化酶催化CPC 生成7-ACA 反应条件研究 | 第69-74页 |
| ·引言 | 第69页 |
| ·试验方法 | 第69页 |
| ·CPC 酰化酶酶促反应速率测定方法 | 第69页 |
| ·CPC 酰化酶在不同浓度底物下的催化反应 | 第69页 |
| ·CPC 酰化酶在不同PH 底物下的催化反应 | 第69页 |
| ·CPC 酰化酶在不同反应温度下的催化反应 | 第69页 |
| ·CPC 酰化酶在最佳温度下的稳定性 | 第69页 |
| ·实验结果与讨论 | 第69-73页 |
| ·CPC 酰化酶酶促反应速率 | 第69-70页 |
| ·底物浓度对酶活的影响 | 第70-71页 |
| ·底物PH 对酶活的影响 | 第71页 |
| ·反应温度对酶活的影响 | 第71-72页 |
| ·最佳温度下酶活的稳定性 | 第72-73页 |
| ·本章小结 | 第73-74页 |
| 第七章 结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第83页 |
