中文摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
缩写词表 | 第15-16页 |
第一章 前言 | 第16-26页 |
1. 持久性有机污染物的危害 | 第16-17页 |
2. 审议把硫丹列入《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》的提案 | 第17页 |
3. 硫丹研究概括 | 第17-20页 |
·硫丹结构和理化性质 | 第17页 |
·硫丹使用和残留限量 | 第17-18页 |
·硫丹在环境介质中迁移转化 | 第18页 |
·硫丹毒理效应研究 | 第18-20页 |
4. 常用的生态毒理学研究方法 | 第20-25页 |
·蚕豆微核实验 | 第20-21页 |
·单细胞凝胶电泳实验 | 第21-22页 |
·变性梯度凝胶电泳实验 | 第22-23页 |
·温度梯度凝胶电泳技术 | 第23-24页 |
·单链构象多态性分析技术 | 第24页 |
·实时荧光定量PCR 技术 | 第24-25页 |
5. 本研究的目的意义 | 第25-26页 |
第二章 硫丹对蚕豆根尖细胞致畸效应的研究 | 第26-33页 |
1. 材料与方法 | 第26-28页 |
·供试植物 | 第26页 |
·供试试剂和主要仪器 | 第26页 |
·试剂配制 | 第26-27页 |
·试验方法 | 第27-28页 |
·蚕豆浸种催芽 | 第27页 |
·药剂处理根尖 | 第27页 |
·根尖细胞修复培养 | 第27页 |
·固定根尖细胞 | 第27页 |
·孚尔根染色 | 第27-28页 |
·制片 | 第28页 |
·镜检 | 第28页 |
·结果计算 | 第28页 |
2. 结果与分析 | 第28-30页 |
·硫丹对蚕豆根尖细胞有丝分裂的影响 | 第28-29页 |
·硫丹对蚕豆根尖细胞染色体畸变的影响 | 第29-30页 |
·硫丹对蚕豆根尖细胞微核率的影响 | 第30页 |
3. 讨论 | 第30-33页 |
第三章 硫丹对蚯蚓和白三叶草的基因毒性 | 第33-45页 |
第一节 硫丹对蚯蚓的基因毒性实验 | 第34-39页 |
1. 材料与方法 | 第34-36页 |
·药品试剂 | 第34页 |
·供试动物 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-36页 |
·供试土壤 | 第34-35页 |
·染毒方法 | 第35页 |
·蚯蚓体腔细胞提取 | 第35页 |
·电泳胶板的制作 | 第35-36页 |
·细胞裂解 | 第36页 |
·DNA 解旋 | 第36页 |
·电泳 | 第36页 |
·中和、染色 | 第36页 |
·观察和分析 | 第36页 |
2. 结果与分析 | 第36-39页 |
·硫丹对蚯蚓体腔细胞 DNA 损伤程度(尾长)的影响 | 第36-37页 |
·硫丹对蚯蚓体腔细胞 DNA 损伤程度(Olive 尾距)的影响 | 第37-39页 |
第二节 硫丹对白三叶草的基因毒性实验 | 第39-45页 |
1. 材料与方法 | 第39-41页 |
·药品试剂 | 第39页 |
·供试植物 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-41页 |
·植物种子催芽和育苗 | 第40页 |
·染毒方法 | 第40页 |
·白三叶草叶片的处理和细胞核分离 | 第40页 |
·电泳胶板的制作 | 第40页 |
·DNA 解旋 | 第40页 |
·电泳 | 第40页 |
·中和、染色 | 第40-41页 |
·观察和分析 | 第41页 |
2. 结果与分析 | 第41-43页 |
·硫丹对白三叶草叶片细胞 DNA 损伤程度(尾长)的影响 | 第41-42页 |
·硫丹对白三叶草叶片细胞 DNA 损伤程度(Olive 尾矩)的影响 | 第42-43页 |
3. 讨论 | 第43-45页 |
第四章 硫丹对土壤微生物群落多样性的DGGE 分子指纹分析 | 第45-81页 |
第一节 土壤微生物基因组提取方法的确立 | 第45-55页 |
1. 材料与方法 | 第45-52页 |
·供试材料 | 第45-52页 |
·供试土壤 | 第45-46页 |
·供试试剂 | 第46页 |
·分子生物学材料 | 第46-47页 |
·供试仪器 | 第47页 |
·土壤总DNA 的提取 | 第47-49页 |
·不同方法所得粗提DNA 质量测定 | 第49页 |
·粗提DNA 的纯化 | 第49-50页 |
·不同提取方法对后期实验适用性分析 | 第50-52页 |
2. 结果与分析 | 第52-54页 |
·三种方法获得基因组DNA 的电泳检测 | 第52-53页 |
·纯化后DNA 的电泳检测 | 第53页 |
·不同方法提取的DNA 扩增效果检测 | 第53-54页 |
3. 讨论 | 第54-55页 |
第二节 常规PCR 扩增方法的优化 | 第55-63页 |
1. 材料与方法 | 第55-60页 |
·药品试剂 | 第55-56页 |
·主要仪器 | 第56页 |
·试剂配制 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-60页 |
·常规PCR 扩增方法的优化 | 第57-59页 |
·DGGE 凝胶电泳检测 | 第59页 |
·电泳 | 第59-60页 |
·DGGE 电泳条件 | 第60页 |
·染色 | 第60页 |
·观察分析 | 第60页 |
2. 结果与分析 | 第60-62页 |
·常规PCR 的扩增结果 | 第60-61页 |
·DGGE 凝胶电泳结果 | 第61-62页 |
3. 讨论 | 第62-63页 |
第三节 Nest-PCR扩增方法 | 第63-69页 |
1. 材料与方法 | 第63-66页 |
·药品试剂 | 第63页 |
·主要仪器 | 第63-64页 |
·DGGE 凝胶试剂配制 | 第64页 |
·Nest-PCR 实验方法 | 第64-66页 |
·DGGE 凝胶电泳检测 | 第66页 |
2. 结果与分析 | 第66-68页 |
·Nest-PCR 扩增结果 | 第66-68页 |
·DGGE 凝胶电泳结果 | 第68页 |
3. 讨论 | 第68-69页 |
第四节 硫丹对土壤微生物群落多样性的DGGE 电泳分析 | 第69-81页 |
1. 材料与方法 | 第69-70页 |
·实验材料 | 第69页 |
·实验方法 | 第69-70页 |
·土壤样品的处理及采样时间 | 第69页 |
·土壤总DNA 的提取 | 第69页 |
·粗提DNA 的纯化 | 第69-70页 |
·PCR 扩增 | 第70页 |
·DGGE 电泳 | 第70页 |
2. 结果与分析 | 第70-79页 |
·不同时期PCR 产物的琼脂糖电泳检测 | 第70页 |
·硫丹处理7d 土壤细菌群落多样性的DGGE 分析 | 第70-73页 |
·硫丹处理14d 土壤细菌群落多样性的DGGE 分析 | 第73-75页 |
·硫丹处理21d 土壤细菌群落多样性的DGGE 分析 | 第75-77页 |
·硫丹处理28d 土壤细菌群落多样性的DGGE 分析 | 第77-79页 |
3. 讨论 | 第79-81页 |
第五章 全文结论 | 第81-83页 |
第六章 附录 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
攻读博士期间发表论文情况 | 第96页 |