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硫丹对生物DNA损伤和土壤微生物群落多样性的影响

中文摘要第1-12页
Abstract第12-15页
缩写词表第15-16页
第一章 前言第16-26页
 1. 持久性有机污染物的危害第16-17页
 2. 审议把硫丹列入《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》的提案第17页
 3. 硫丹研究概括第17-20页
   ·硫丹结构和理化性质第17页
   ·硫丹使用和残留限量第17-18页
   ·硫丹在环境介质中迁移转化第18页
   ·硫丹毒理效应研究第18-20页
 4. 常用的生态毒理学研究方法第20-25页
   ·蚕豆微核实验第20-21页
   ·单细胞凝胶电泳实验第21-22页
   ·变性梯度凝胶电泳实验第22-23页
   ·温度梯度凝胶电泳技术第23-24页
   ·单链构象多态性分析技术第24页
   ·实时荧光定量PCR 技术第24-25页
 5. 本研究的目的意义第25-26页
第二章 硫丹对蚕豆根尖细胞致畸效应的研究第26-33页
 1. 材料与方法第26-28页
   ·供试植物第26页
   ·供试试剂和主要仪器第26页
   ·试剂配制第26-27页
   ·试验方法第27-28页
     ·蚕豆浸种催芽第27页
     ·药剂处理根尖第27页
     ·根尖细胞修复培养第27页
     ·固定根尖细胞第27页
     ·孚尔根染色第27-28页
     ·制片第28页
     ·镜检第28页
     ·结果计算第28页
 2. 结果与分析第28-30页
   ·硫丹对蚕豆根尖细胞有丝分裂的影响第28-29页
   ·硫丹对蚕豆根尖细胞染色体畸变的影响第29-30页
   ·硫丹对蚕豆根尖细胞微核率的影响第30页
 3. 讨论第30-33页
第三章 硫丹对蚯蚓和白三叶草的基因毒性第33-45页
 第一节 硫丹对蚯蚓的基因毒性实验第34-39页
  1. 材料与方法第34-36页
   ·药品试剂第34页
   ·供试动物第34页
   ·实验方法第34-36页
     ·供试土壤第34-35页
     ·染毒方法第35页
     ·蚯蚓体腔细胞提取第35页
     ·电泳胶板的制作第35-36页
     ·细胞裂解第36页
     ·DNA 解旋第36页
     ·电泳第36页
     ·中和、染色第36页
     ·观察和分析第36页
  2. 结果与分析第36-39页
   ·硫丹对蚯蚓体腔细胞 DNA 损伤程度(尾长)的影响第36-37页
   ·硫丹对蚯蚓体腔细胞 DNA 损伤程度(Olive 尾距)的影响第37-39页
 第二节 硫丹对白三叶草的基因毒性实验第39-45页
  1. 材料与方法第39-41页
   ·药品试剂第39页
   ·供试植物第39页
   ·实验方法第39-41页
     ·植物种子催芽和育苗第40页
     ·染毒方法第40页
     ·白三叶草叶片的处理和细胞核分离第40页
     ·电泳胶板的制作第40页
     ·DNA 解旋第40页
     ·电泳第40页
     ·中和、染色第40-41页
     ·观察和分析第41页
  2. 结果与分析第41-43页
   ·硫丹对白三叶草叶片细胞 DNA 损伤程度(尾长)的影响第41-42页
   ·硫丹对白三叶草叶片细胞 DNA 损伤程度(Olive 尾矩)的影响第42-43页
  3. 讨论第43-45页
第四章 硫丹对土壤微生物群落多样性的DGGE 分子指纹分析第45-81页
 第一节 土壤微生物基因组提取方法的确立第45-55页
  1. 材料与方法第45-52页
   ·供试材料第45-52页
     ·供试土壤第45-46页
     ·供试试剂第46页
     ·分子生物学材料第46-47页
     ·供试仪器第47页
     ·土壤总DNA 的提取第47-49页
     ·不同方法所得粗提DNA 质量测定第49页
     ·粗提DNA 的纯化第49-50页
     ·不同提取方法对后期实验适用性分析第50-52页
  2. 结果与分析第52-54页
   ·三种方法获得基因组DNA 的电泳检测第52-53页
   ·纯化后DNA 的电泳检测第53页
   ·不同方法提取的DNA 扩增效果检测第53-54页
  3. 讨论第54-55页
 第二节 常规PCR 扩增方法的优化第55-63页
  1. 材料与方法第55-60页
   ·药品试剂第55-56页
   ·主要仪器第56页
   ·试剂配制第56-57页
   ·实验方法第57-60页
     ·常规PCR 扩增方法的优化第57-59页
     ·DGGE 凝胶电泳检测第59页
     ·电泳第59-60页
     ·DGGE 电泳条件第60页
     ·染色第60页
     ·观察分析第60页
  2. 结果与分析第60-62页
   ·常规PCR 的扩增结果第60-61页
   ·DGGE 凝胶电泳结果第61-62页
  3. 讨论第62-63页
 第三节 Nest-PCR扩增方法第63-69页
  1. 材料与方法第63-66页
   ·药品试剂第63页
   ·主要仪器第63-64页
   ·DGGE 凝胶试剂配制第64页
   ·Nest-PCR 实验方法第64-66页
   ·DGGE 凝胶电泳检测第66页
  2. 结果与分析第66-68页
   ·Nest-PCR 扩增结果第66-68页
   ·DGGE 凝胶电泳结果第68页
  3. 讨论第68-69页
 第四节 硫丹对土壤微生物群落多样性的DGGE 电泳分析第69-81页
  1. 材料与方法第69-70页
   ·实验材料第69页
   ·实验方法第69-70页
     ·土壤样品的处理及采样时间第69页
     ·土壤总DNA 的提取第69页
     ·粗提DNA 的纯化第69-70页
     ·PCR 扩增第70页
     ·DGGE 电泳第70页
  2. 结果与分析第70-79页
   ·不同时期PCR 产物的琼脂糖电泳检测第70页
   ·硫丹处理7d 土壤细菌群落多样性的DGGE 分析第70-73页
   ·硫丹处理14d 土壤细菌群落多样性的DGGE 分析第73-75页
   ·硫丹处理21d 土壤细菌群落多样性的DGGE 分析第75-77页
   ·硫丹处理28d 土壤细菌群落多样性的DGGE 分析第77-79页
  3. 讨论第79-81页
第五章 全文结论第81-83页
第六章 附录第83-84页
参考文献第84-95页
致谢第95-96页
攻读博士期间发表论文情况第96页

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