| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-22页 |
| 1 Ras/MAPK通路过度激活与癌症 | 第14-16页 |
| 1.1 Ras/MAPK信号通路及其致癌机制 | 第14-15页 |
| 1.2 针对Ras/MAPK通路的药物研究进展 | 第15页 |
| 1.3 抑制ras及其通路过度激活药物的开发 | 第15-16页 |
| 2 ras过度激活与活性氧 | 第16-17页 |
| 2.1 自由基学说 | 第16页 |
| 2.2 自由基悖论 | 第16-17页 |
| 2.3 抗氧化剂或促氧化剂对抑制ras过度激活的意义 | 第17页 |
| 3 生脉散的研究进展 | 第17-18页 |
| 3.1 生脉散复方 | 第17页 |
| 3.2 生脉散的药理活性研究进展 | 第17页 |
| 3.3 生脉散的成分解析研究进展 | 第17-18页 |
| 4 以秀丽隐杆线虫作为肿瘤模型筛选下调 Ras/MAPK 信号通路药物的研究进展 | 第18-20页 |
| 4.1 秀丽隐杆线虫作为药物筛选模型的优势 | 第18-19页 |
| 4.2 秀丽隐杆线虫药物筛选模型研究进展 | 第19页 |
| 4.3 利用秀丽隐杆线虫筛选下调 Ras/MAPK 信号通路药物的研究进展 | 第19-20页 |
| 5 立题依据 | 第20-22页 |
| 第二章 SM-WD对Ras/MAPK过度激活的调控 | 第22-38页 |
| 1 前言 | 第22页 |
| 2 材料方法 | 第22-30页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 秀丽隐杆线虫株系与实验菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 主要药品与试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要溶液与培养基配制 | 第22-24页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 秀丽隐杆线虫标准食物E. coli OP50的培养 | 第24-25页 |
| 2.2.2 秀丽隐杆线虫的一般培养 | 第25-26页 |
| 2.2.3 秀丽隐杆线虫同步化 | 第26页 |
| 2.2.4 秀丽隐杆线虫的冻存与复苏 | 第26-27页 |
| 2.2.5 药物处理 | 第27页 |
| 2.2.6 秀丽隐杆线虫多阴门表型计数 | 第27页 |
| 2.2.7 SM-WD的制备 | 第27页 |
| 2.2.8 SM-WD拆方实验 | 第27-29页 |
| 2.3 数据处理 | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-36页 |
| 3.1 SM-WD显著抑制Ras/MAPK通路过度激活 | 第30页 |
| 3.2 SM-WD拆方对其抑制Ras过度激活及体外抗氧化活性的影响 | 第30-36页 |
| 3.2.1 SM-WD拆方对其抑制Ras过度激活能力的影响 | 第31-32页 |
| 3.2.2 SM-WD具有强的体外总抗氧化活性 | 第32-33页 |
| 3.2.3 SM-WD拆方对其体外抗氧化活性的影响 | 第33-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 5 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 SM-WD对秀丽隐杆线虫体内活性氧的影响 | 第38-56页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 材料方法 | 第39-44页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第39-41页 |
| 2.1.1 秀丽隐杆线虫株系与实验菌株 | 第39-40页 |
| 2.1.2 主要药品与试剂 | 第40页 |
| 2.1.3 主要溶液与培养基配制 | 第40-41页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第41页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第41-44页 |
| 2.2.1 秀丽隐杆线虫的一般培养 | 第41页 |
| 2.2.2 药物处理 | 第41页 |
| 2.2.3 秀丽隐杆线虫多阴门表型计数 | 第41页 |
| 2.2.4 H2DCF-DA法测定秀丽隐杆线虫体内ROS水平 | 第41-42页 |
| 2.2.5 NAC及PQ对SM-WD处理秀丽隐杆线虫的表型影响 | 第42页 |
| 2.2.6 DAF-16 核转位检测 | 第42页 |
| 2.2.7 脂褐素荧光检测 | 第42页 |
| 2.2.8 转基因秀丽隐杆线虫荧光检测 | 第42-43页 |
| 2.2.9 秀丽隐杆线虫体内SOD酶活力的测定 | 第43-44页 |
| 2.2.10 MitoSOX? Red荧光检测 | 第44页 |
| 2.3 数据处理 | 第44页 |
| 3 实验结果 | 第44-53页 |
| 3.1 SM-WD显著升高秀丽隐杆线虫体内ROS的水平 | 第44-45页 |
| 3.2 NAC和PQ合并SM-WD对Ras/MAPK通路过度激活的影响 | 第45-46页 |
| 3.3 SM-WD对let-60(gf)/ras突变体线粒体内O2·－水平的影响 | 第46-47页 |
| 3.4 SM-WD对let-60(gf)/ras突变体脂褐素水平的影响 | 第47-48页 |
| 3.5 SM-WD对DAF-16 核转位的影响 | 第48页 |
| 3.6 SM-WD对GST-4::GFP表达的影响 | 第48-49页 |
| 3.7 SM-WD对SOD-1::YFP和SOD-3::GFP表达的影响 | 第49页 |
| 3.8 外源添加SOD对SM-WD抑制Ras过度激活作用的影响 | 第49-50页 |
| 3.9 SM-WD对let-60(gf)/ras突变体体内SOD酶活力的影响 | 第50页 |
| 3.10 SM-WD对HSP-16.2 :: GFP表达的影响 | 第50-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 5 小结 | 第54-56页 |
| 第四章 SM-WD对秀丽隐杆线虫线粒体功能的影响 | 第56-70页 |
| 1 前言 | 第56-57页 |
| 2 材料方法 | 第57-63页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第57-58页 |
| 2.1.1 秀丽隐杆线虫株系与实验菌株 | 第57页 |
| 2.1.2 主要药品与试剂 | 第57页 |
| 2.1.3 主要溶液与培养基配制 | 第57-58页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第58页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第58-63页 |
| 2.2.1 秀丽隐杆线虫的一般培养 | 第58页 |
| 2.2.2 药物处理 | 第58-59页 |
| 2.2.3 秀丽隐杆线虫多阴门表型计数 | 第59页 |
| 2.2.4 耗氧量测定 | 第59页 |
| 2.2.5 钙离子水平测定 | 第59页 |
| 2.2.6 ATP水平测定 | 第59-61页 |
| 2.2.7 MitoTrackerTM Red测定线粒体丰度 | 第61页 |
| 2.2.8 JC-1 测定线粒体膜电位 | 第61-62页 |
| 2.2.9 RNA干扰 | 第62-63页 |
| 2.3 数据处理 | 第63页 |
| 3 实验结果 | 第63-68页 |
| 3.1 SM-WD对MT2124 [let-60(gf)/ras] 突变体耗氧量的影响 | 第63页 |
| 3.2 SM-WD对MT2124 [let-60(gf)/ras] 突变体ATP含量的影响 | 第63-64页 |
| 3.3 SM-WD对MT2124 [let-60(gf)/ras] 突变体线粒体丰度的影响 | 第64页 |
| 3.4 SM-WD对MT2124 [let-60(gf)/ras] 突变体线粒体膜电位的影响 | 第64-67页 |
| 3.5 SM-WD对MT2124 [let-60(gf)/ras] 突变体游离钙离子水平的影响 | 第67页 |
| 3.6 干扰cyc-1 对SM-WD抑制ras过度激活作用的影响 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-69页 |
| 5 小结 | 第69-70页 |
| 第五章 SM-WD下调ras过度激活的机制研究 | 第70-81页 |
| 1 前言 | 第70-71页 |
| 2 材料方法 | 第71-73页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第71页 |
| 2.1.1 线虫株系与实验菌株 | 第71页 |
| 2.1.2 主要药品与试剂 | 第71页 |
| 2.1.3 主要溶液与培养基配制 | 第71页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第71页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第71-73页 |
| 2.2.1 秀丽隐杆线虫的一般培养 | 第71-72页 |
| 2.2.2 药物处理 | 第72页 |
| 2.2.3 秀丽隐杆线虫多阴门表型计数 | 第72页 |
| 2.2.4 H2DCF-DA法测定线虫体内ROS水平 | 第72页 |
| 2.2.5 MitoSOXTM测定线粒体O2·－ | 第72页 |
| 2.2.6 JC-1 测定线粒体膜电位 | 第72页 |
| 2.2.7 SYTO 12 检测性腺细胞凋亡 | 第72页 |
| 2.2.8 OA合并Hoechst33342检测性腺细胞凋亡 | 第72-73页 |
| 2.2.9 Rho123检测SM-WD拆方对PTP开放的影响 | 第73页 |
| 2.3 数据处理 | 第73页 |
| 3 实验结果 | 第73-79页 |
| 3.1 PTP开放与ROS水平升高的因果关系分析 | 第73-75页 |
| 3.2 PTP抑制剂对SM-WD抑制Ras过度激活作用的影响 | 第75页 |
| 3.3 SM-WD对let-60(gf)/ras突变体性腺细胞凋亡的影响 | 第75-77页 |
| 3.4 SM-WD拆方对let-60(gf)/ras突变体PTP开放的影响 | 第77-79页 |
| 4 讨论 | 第79-80页 |
| 5 小结 | 第80-81页 |
| 第六章 JNK, p38/MAPK及P53参与ras过度激活的调控机理 | 第81-96页 |
| 1 前言 | 第81页 |
| 2 材料方法 | 第81-87页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第81-83页 |
| 2.1.1 秀丽隐杆线虫株系与实验菌株 | 第81-82页 |
| 2.1.2 主要药品与试剂 | 第82页 |
| 2.1.3 主要溶液与培养基配制 | 第82-83页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第83页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第83-87页 |
| 2.2.1 秀丽隐杆线虫的一般培养 | 第83页 |
| 2.2.2 药物处理 | 第83-84页 |
| 2.2.3 秀丽隐杆线虫多阴门表型计数 | 第84页 |
| 2.2.4 RNAi | 第84页 |
| 2.2.5 Western Blot | 第84-87页 |
| 2.3 数据处理 | 第87页 |
| 3 实验结果 | 第87-93页 |
| 3.1 下调cep-1 等基因对SM-WD抑制Ras过度激活作用的影响 | 第87页 |
| 3.2 SM-WD处理对p53，JNK/MAPK和p38通路的影响 | 第87-93页 |
| 3.2.1 SM-WD处理对ERK-1/2 和p- ERK-1/2 的表达水平的影响 | 第87-89页 |
| 3.2.2 SM-WD处理对CEP-1 的表达水平的影响 | 第89-90页 |
| 3.2.3 SM-WD处理对JNK-1/2 和p- JNK-1/2 的表达水平的影响 | 第90页 |
| 3.2.4 SM-WD处理对PMK和p-PMK的表达水平的影响 | 第90-93页 |
| 4 讨论 | 第93-94页 |
| 5 小结 | 第94-96页 |
| 第七章 结论与展望 | 第96-99页 |
| 1 结论 | 第96-97页 |
| 2 展望 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-107页 |
| 在学期间的研究成果 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
