| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-16页 |
| 材料与仪器 | 第16-18页 |
| 实验方法 | 第18-34页 |
| 一、人动脉壁内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型的建立 | 第18-21页 |
| ·人脐动脉内皮细胞的分离与培养 | 第18-19页 |
| ·用一型鼠尾胶原蛋白或多聚左旋赖氨酸包被细胞培养板 | 第18页 |
| ·人脐动脉内皮细胞原代分离方法 | 第18-19页 |
| ·内皮细胞培养液 | 第19页 |
| ·内皮细胞传代培养 | 第19页 |
| ·人脐动脉平滑肌细胞的分离与培养 | 第19-20页 |
| ·组织块植块法原代培养平滑肌细胞 | 第19-20页 |
| ·平滑肌细胞传代培养 | 第20页 |
| ·人动脉壁内皮细胞-平滑基细胞共培养模型的建立 | 第20-21页 |
| 二、人动脉壁内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型的鉴定 | 第21-24页 |
| ·形态学鉴定——免疫荧光染色 | 第21-23页 |
| ·功能学定性鉴定——Dil-Ac-LDL吞噬实验 | 第23页 |
| ·功能学定量鉴定 | 第23-24页 |
| 三、ApoA-I的分离纯化及鉴定 | 第24-28页 |
| ·冷乙醇沉淀法分离ApoA-I | 第24-25页 |
| ·制备ApoA-I的SDS-PAGE鉴定 | 第25页 |
| ·制备ApoA-I的western blot鉴定 | 第25-26页 |
| ·制备ApoA-I生物活性鉴定 | 第26-28页 |
| ·小鼠腹腔巨噬细胞的分离纯化 | 第27页 |
| ·L-929细胞的培养、传代及冻存 | 第27-28页 |
| ·制备ApoA-I与天然ApoA-I对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒性抑制作用比较(MTT法) | 第28页 |
| 四、Ox-LDL的制备及鉴定 | 第28-30页 |
| ·超速离心法分离LDL | 第28-29页 |
| ·Ox-LDL的制备 | 第29页 |
| ·硫代巴比妥酸法鉴定制备Ox-LDL的氧化比值 | 第29页 |
| ·制备Ox-LDL的电泳鉴定 | 第29-30页 |
| 五、ApoA-I对Ox-LDL诱导的人脐动脉内皮细胞MCP-1表达的抑制作用 | 第30-32页 |
| ·人单核细胞株THP-1细胞的培养、传代及冻存 | 第30-31页 |
| ·MCP-1条件培养基的制备 | 第31页 |
| ·趋化实验 | 第31-32页 |
| 六、预实验:ApoA-I对Ox-LDL诱导的人动脉壁MCP-1表达的抑制作用 | 第32页 |
| ·人单核细胞株THP-1细胞的培养、传代及冻存 | 第32页 |
| ·MCP-1条件培养基的制备 | 第32页 |
| ·趋化实验 | 第32页 |
| 七、统计学方法 | 第32-34页 |
| 实验结果 | 第34-48页 |
| 一、人动脉壁内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型的建立 | 第34-39页 |
| ·人脐动脉内皮细胞的分离与培养 | 第34页 |
| ·平滑肌细胞的分离与培养 | 第34-36页 |
| ·共培养模型的建立 | 第36-39页 |
| 二、共培养模型的鉴定 | 第39-42页 |
| ·形态学鉴定——免疫荧光染色 | 第39-40页 |
| ·功能学定性鉴定——Dil-Ac-LDL吞噬实验 | 第40-41页 |
| ·功能学定量鉴定 | 第41-42页 |
| 三、ApoA-I分离纯化的鉴定 | 第42-43页 |
| ·制备ApoA-I的SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定 | 第42页 |
| ·制备ApoA-I生物活性鉴定 | 第42-43页 |
| 四、Ox-LDL制备的鉴定 | 第43-44页 |
| ·制备Ox-LDL的氧化比值鉴定 | 第43页 |
| ·制备Ox-LDL的电泳鉴定 | 第43-44页 |
| 五、ApoA-I对Ox-LDL诱导的人脐动脉内皮细胞趋化因子表达的抑制作用 | 第44-46页 |
| 六、预实验:ApoA-I对Ox-LDL诱导的人动脉壁共培养细胞趋化因子表达的抑制作用 | 第46-48页 |
| 实验讨论 | 第48-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 研究方向 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 综述 | 第75-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
