| 摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 犬瘟热和犬瘟热病毒概述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 犬瘟热 | 第13页 |
| 1.1.2 犬瘟热病毒形态和理化特性 | 第13页 |
| 1.1.3 犬瘟热病毒分类及其基因组结构 | 第13-15页 |
| 1.1.4 犬瘟热病毒的分离培养 | 第15-16页 |
| 1.1.5 犬瘟热病毒的鉴定 | 第16-17页 |
| 1.2 犬瘟热的防治 | 第17-18页 |
| 1.2.1 犬瘟热疫苗免疫接种 | 第17-18页 |
| 1.2.2 犬瘟热临床治疗 | 第18页 |
| 1.3 犬瘟热疫苗免疫抗体的检测方法 | 第18-19页 |
| 1.3.1 血清中和试验(SN) | 第18-19页 |
| 1.3.2 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第19页 |
| 1.4 凝集试验 | 第19页 |
| 1.4.1 直接凝集试验 | 第19页 |
| 1.4.2 间接凝集试验 | 第19页 |
| 1.5 纳米微球在疾病检测领域的应用 | 第19-20页 |
| 1.5.1 纳米微球的种类 | 第19-20页 |
| 1.5.2 纳米微球在疾病检测领域的应用 | 第20页 |
| 1.5.3 纳米微球致敏技术 | 第20页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-30页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 菌毒株、质粒、实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂、培养基和耗材 | 第22页 |
| 2.1.3 病料和血清 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-30页 |
| 2.2.1 犬瘟热病毒的分离鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.2 犬瘟热病毒H基因克隆及序列分析 | 第24-25页 |
| 2.2.3 犬瘟热疫苗免疫犬血清抗体检测 | 第25-26页 |
| 2.2.4 重组CDVH蛋白的表达 | 第26-27页 |
| 2.2.5 重组蛋白的纯化 | 第27页 |
| 2.2.6 重组蛋白的Western-blot鉴定 | 第27页 |
| 2.2.7 重组蛋白免疫原性比较 | 第27-28页 |
| 2.2.8 CDV抗体检测间接凝集试验的建立 | 第28-29页 |
| 2.2.9 CDV抗体检测间接凝集试验的初步应用 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-50页 |
| 3.1 CDV分离鉴定 | 第30-32页 |
| 3.1.1 细胞病变 | 第30页 |
| 3.1.2 电镜观察 | 第30-31页 |
| 3.1.3 RT-PCR鉴定 | 第31页 |
| 3.1.4 间接免疫荧光鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2 CDVH基因克隆及序列分析 | 第32-38页 |
| 3.2.1 CDVH基因的扩增 | 第32-33页 |
| 3.2.2 CDVH基因核苷酸序列分析 | 第33-35页 |
| 3.2.3 CDVH基因氨基酸的序列分析 | 第35-36页 |
| 3.2.4 H蛋白的糖基化位点预测 | 第36-37页 |
| 3.2.5 分离毒株与疫苗毒株H蛋白抗原表位分析 | 第37-38页 |
| 3.3 CDV疫苗免疫犬血清抗体检测 | 第38-39页 |
| 3.3.1 CDVTCID_(50)测定 | 第38页 |
| 3.3.2 免疫犬血清中和试验 | 第38-39页 |
| 3.3.3 商品试剂盒检测犬血清抗体 | 第39页 |
| 3.4 重组CDVH蛋白的表达 | 第39-41页 |
| 3.4.1 CDVH基因的分段克隆 | 第39页 |
| 3.4.2 重组菌的构建 | 第39-41页 |
| 3.4.3 重组蛋白的表达 | 第41页 |
| 3.5 重组蛋白的纯化和免疫原性鉴定 | 第41-43页 |
| 3.5.1 重组蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| 3.5.2 Western-blot免疫原性鉴定 | 第42-43页 |
| 3.6 重组蛋白免疫原性比较 | 第43-44页 |
| 3.6.1 免疫抗体检测 | 第43页 |
| 3.6.2 细胞中和试验 | 第43-44页 |
| 3.7 CDV抗体检测间接凝集试验的建立 | 第44-50页 |
| 3.7.1 聚苯乙烯微球致敏条件优化 | 第44-45页 |
| 3.7.2 CDV抗体检测间接凝集试验阳性标准确立 | 第45-46页 |
| 3.7.3 凝集反应的特异性和敏感性试验 | 第46-47页 |
| 3.7.4 凝集反应的重复性和稳定性试验 | 第47-48页 |
| 3.7.5 犬瘟热病毒抗体检测间接凝集试验的初步应用 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 犬瘟热病毒分离病料选取 | 第50页 |
| 4.2 犬瘟热病毒的细胞分离培养 | 第50-51页 |
| 4.3 犬瘟热毒株的遗传变异 | 第51页 |
| 4.4 用于致敏纳米微球的重组蛋白的选择 | 第51-52页 |
| 4.5 间接凝集试验检测犬血清抗体的应用前景 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
