摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
符号说明 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-29页 |
1 日本血吸虫疫苗研究进展 | 第13-20页 |
·虫源性疫苗 | 第13页 |
·基因工程苗 | 第13-16页 |
·核酸疫苗 | 第16-17页 |
·表位疫苗 | 第17-18页 |
·抗独特性抗体疫苗(antiidiotype antibody vaccine) | 第18-20页 |
2 血吸虫病疫苗研究的问题和展望 | 第20-22页 |
·疫苗研究面临的问题 | 第20-21页 |
·血吸虫病疫苗研究展望 | 第21-22页 |
3 血吸虫体被蛋白的研究 | 第22-29页 |
·体被蛋白结构 | 第22-23页 |
·血吸虫体被的功能 | 第23-25页 |
·体被一些重要的膜蛋白 | 第25-28页 |
·结语 | 第28-29页 |
第二章 日本血吸虫pET32a(+)-Sj23(EC1-EC2) 和pET32a(+)-Sj23(EC2)-Tsp2(EC2)的构建、克隆与表达 | 第29-64页 |
1 材料 | 第29-33页 |
·实验动物 | 第29页 |
·日本血吸虫与尾蚴 | 第29-30页 |
·文库、质粒及菌种 | 第30页 |
·实验试剂 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30页 |
·主要试剂配制 | 第30-33页 |
2 实验方法 | 第33-53页 |
·荧光实时定量PCR 检测Sj23(Genebank ID:BU717012)和Sj-Tsp2(Genebank ID:EF553319)基因的转录时相 | 第33-38页 |
·生物信息学分析 Sj23(Genebank ID:BU717012)和 Sj-Tsp2(Genebank ID:EF553319) | 第38-40页 |
·Sj23(EC1-EC2) 和Sj-Tsp2(EC2)-Sj23(EC2)基因克隆与鉴定 | 第40-51页 |
·pET32a-Sj23(EC1-EC2)/BL21, pET32a-Sj-Tsp2(EC2)-Sj23(EC2)/BL21 的诱导表达 | 第51-53页 |
·融合蛋白pET32a-Sj23(EC1-EC2)/BL21, pET32a-Sj-Tsp2(EC2)-Sj23(EC2)/BL21的western blotting 鉴定 | 第53页 |
3 结果 | 第53-62页 |
·Sj23 和Sj-Tsp2 基因转录时相的荧光定量PCR 检测结果 | 第53-55页 |
·PCR 扩增目的片段及构建质粒酶切鉴定 | 第55-56页 |
·核酸序列比对 | 第56-57页 |
·目的基因核苷酸序列推测氨基酸序列 | 第57-59页 |
·诱导目的蛋白的表达 | 第59-60页 |
·诱导表达pET32a-Sj23(EC1-EC2)/BL21 | 第59页 |
·诱导表达pET32a-SjTsp2(EC2)-Sj23(EC2)/BL21 | 第59-60页 |
·pET32a-Sj23(EC1-EC2)/BL21 和 pET32a-SjTsp2(EC2)-Sj23(EC2)/BL21 蛋白的纯化 | 第60-61页 |
·表达产物抗原性的鉴定 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
第三章 日本血吸虫体被蛋白重组抗原的免疫保护试验 | 第64-73页 |
1 实验材料 | 第64-65页 |
·工程菌株 | 第64页 |
·实验动物 | 第64-65页 |
·主要试剂 | 第65页 |
2 实验方法 | 第65-67页 |
·免疫抗原制备 | 第65页 |
·重组蛋白免疫BALB/c 小鼠试验 | 第65页 |
·小鼠的攻击感染和减虫率,减卵率的计算 | 第65-66页 |
·间接ELISA 方法检测小鼠血清特异性IgG 抗体水平 | 第66页 |
·Real-time PCR 分析免疫后虫体目的基因转录 | 第66-67页 |
·统计学处理 | 第67页 |
3 结果 | 第67-71页 |
·动物免疫保护试验结果 | 第67-68页 |
·间接ELISA 检测小鼠血清IgG 水平 | 第68-69页 |
·Real-time PCR 分析免疫后虫体目的基因转录 | 第69-71页 |
4 讨论 | 第71-73页 |
第四章 全文小结 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间发表论文 | 第84页 |