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抗日本血吸虫病二价多表位疫苗研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
符号说明第11-12页
第一章 绪论第12-29页
 1 日本血吸虫疫苗研究进展第13-20页
   ·虫源性疫苗第13页
   ·基因工程苗第13-16页
   ·核酸疫苗第16-17页
   ·表位疫苗第17-18页
   ·抗独特性抗体疫苗(antiidiotype antibody vaccine)第18-20页
 2 血吸虫病疫苗研究的问题和展望第20-22页
   ·疫苗研究面临的问题第20-21页
   ·血吸虫病疫苗研究展望第21-22页
 3 血吸虫体被蛋白的研究第22-29页
   ·体被蛋白结构第22-23页
   ·血吸虫体被的功能第23-25页
   ·体被一些重要的膜蛋白第25-28页
   ·结语第28-29页
第二章 日本血吸虫pET32a(+)-Sj23(EC1-EC2) 和pET32a(+)-Sj23(EC2)-Tsp2(EC2)的构建、克隆与表达第29-64页
 1 材料第29-33页
   ·实验动物第29页
   ·日本血吸虫与尾蚴第29-30页
   ·文库、质粒及菌种第30页
   ·实验试剂第30页
   ·主要仪器设备第30页
   ·主要试剂配制第30-33页
 2 实验方法第33-53页
   ·荧光实时定量PCR 检测Sj23(Genebank ID:BU717012)和Sj-Tsp2(Genebank ID:EF553319)基因的转录时相第33-38页
   ·生物信息学分析 Sj23(Genebank ID:BU717012)和 Sj-Tsp2(Genebank ID:EF553319)第38-40页
   ·Sj23(EC1-EC2) 和Sj-Tsp2(EC2)-Sj23(EC2)基因克隆与鉴定第40-51页
   ·pET32a-Sj23(EC1-EC2)/BL21, pET32a-Sj-Tsp2(EC2)-Sj23(EC2)/BL21 的诱导表达第51-53页
   ·融合蛋白pET32a-Sj23(EC1-EC2)/BL21, pET32a-Sj-Tsp2(EC2)-Sj23(EC2)/BL21的western blotting 鉴定第53页
 3 结果第53-62页
   ·Sj23 和Sj-Tsp2 基因转录时相的荧光定量PCR 检测结果第53-55页
   ·PCR 扩增目的片段及构建质粒酶切鉴定第55-56页
   ·核酸序列比对第56-57页
   ·目的基因核苷酸序列推测氨基酸序列第57-59页
   ·诱导目的蛋白的表达第59-60页
     ·诱导表达pET32a-Sj23(EC1-EC2)/BL21第59页
     ·诱导表达pET32a-SjTsp2(EC2)-Sj23(EC2)/BL21第59-60页
   ·pET32a-Sj23(EC1-EC2)/BL21 和 pET32a-SjTsp2(EC2)-Sj23(EC2)/BL21 蛋白的纯化第60-61页
   ·表达产物抗原性的鉴定第61-62页
 4 讨论第62-64页
第三章 日本血吸虫体被蛋白重组抗原的免疫保护试验第64-73页
 1 实验材料第64-65页
   ·工程菌株第64页
   ·实验动物第64-65页
   ·主要试剂第65页
 2 实验方法第65-67页
   ·免疫抗原制备第65页
   ·重组蛋白免疫BALB/c 小鼠试验第65页
   ·小鼠的攻击感染和减虫率,减卵率的计算第65-66页
   ·间接ELISA 方法检测小鼠血清特异性IgG 抗体水平第66页
   ·Real-time PCR 分析免疫后虫体目的基因转录第66-67页
   ·统计学处理第67页
 3 结果第67-71页
   ·动物免疫保护试验结果第67-68页
   ·间接ELISA 检测小鼠血清IgG 水平第68-69页
   ·Real-time PCR 分析免疫后虫体目的基因转录第69-71页
 4 讨论第71-73页
第四章 全文小结第73-74页
参考文献第74-83页
致谢第83-84页
攻读学位期间发表论文第84页

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