摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
文献综述 | 第10-24页 |
1. 链霉菌的生长发育及进化树分析 | 第10-14页 |
2. 除虫链霉菌基因组的研究进展 | 第14-15页 |
3. 阿维菌素的生物合成及其调控的研究进展 | 第15-19页 |
4. 寡霉素生物合成及其调控研究进展 | 第19-21页 |
5. 戊内酯菌素生物合成及其调控研究进展 | 第21-23页 |
6. 结束语 | 第23-24页 |
引言 | 第24-25页 |
1. 材料与方法 | 第25-36页 |
·材料 | 第25-27页 |
·菌株、质粒及引物 | 第25-26页 |
·培养基 | 第26-27页 |
·主要试剂和仪器 | 第27页 |
·uhk01sav 基因缺失cosmid 的构建 | 第27-30页 |
·uhk01sav 中断盒的扩增 | 第29页 |
·BW25113/pIJ790/cosmid7-41 的构建 | 第29页 |
·uhk01sav 缺失cosmid 的构建 | 第29-30页 |
·除虫链霉菌中uhk01sav 基因缺失突变体的构建 | 第30-32页 |
·接合转移实验 | 第30页 |
·突变体进行菌液PCR 验证 | 第30页 |
·Southern blot 验证 | 第30-32页 |
·划线收取uhk01sav 基因缺失突变体孢子 | 第32页 |
·uhk01sav 基因缺失突变体的表型观察 | 第32-33页 |
·uhk01sav 基因缺失突变体的电镜观察 | 第32页 |
·uhk01sav 基因缺失突变体的发酵及抗生素测定 | 第32-33页 |
·8165△uhk01sav 的互补实验 | 第33-34页 |
·互补载体的构建 | 第33页 |
·8165△uhk01sav 的交叉互补实验 | 第33-34页 |
·表型观察 | 第34页 |
·菌株发酵及抗生素测定 | 第34页 |
·天蓝色链霉菌M145△uhk01 突变体的交叉互补实验 | 第34页 |
·RNA 提取及real-time RT-PCR 分析 | 第34-36页 |
2. 结果 | 第36-47页 |
·除虫链霉菌uhk01sav 基因的序列分析 | 第36页 |
·uhk01sav 基因缺失突变体的构建及表型分析 | 第36-40页 |
·cosmid?uhk01sav 的构建 | 第37-38页 |
·8165?uhk01sav 突变体的构建及验证 | 第38页 |
·8165 和8165△uhk01sav 的电镜观察结果 | 第38-39页 |
·8165 和8165△uhk01sav 的抗生素产量比较 | 第39-40页 |
·8165△uhk01sav 的交叉互补实验及表型分析 | 第40-43页 |
·互补载体的构建 | 第41页 |
·互补菌株的验证 | 第41-42页 |
·互补菌株的表型分析和电镜观察 | 第42-43页 |
·互补菌株的抗生素测定 | 第43页 |
·M145△uhk01 的互补实验 | 第43-44页 |
·Real-time RT-PCR 分析比较原始株与突变体中3 种重要抗生素生物合成基因簇的转录差异 | 第44-47页 |
·RNA 定量和Tm 值优化结果 | 第44-45页 |
·uhk01sav 参与寡霉素生物合成的调控是由途径特异性调控因子介导的 | 第45页 |
·uhk01sav 还参与阿维菌素及戊内酯菌素生物合成的调控 | 第45-47页 |
3. 讨论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第54页 |