摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一部分、研究背景 | 第9-15页 |
1、膀胱癌现状 | 第9-10页 |
2、蛇葡萄素来源与分布 | 第10页 |
3、蛇葡萄素的基本理化性质 | 第10-11页 |
4、蛇葡萄素抗肿瘤作用的研究 | 第11页 |
5、蛇葡萄素的其他作用 | 第11-12页 |
6、线粒体与细胞凋亡 | 第12-13页 |
7、Bcl-2家族与细胞凋亡 | 第13页 |
8、Caspase家族与细胞凋亡 | 第13-15页 |
立题依据 | 第15-16页 |
第二部分、Amp对人膀胱癌细胞株SW780抑制作用 | 第16-24页 |
一、MTT法检测Amp对人膀胱癌细胞株SW780的抑制作用 | 第16-24页 |
1、实验材料 | 第16-18页 |
1.1、药品 | 第16页 |
1.2、试剂 | 第16-18页 |
1.3、细胞株 | 第18页 |
1.4、主要仪器 | 第18页 |
2、实验方法 | 第18-20页 |
2.1、细胞培养 | 第18-19页 |
2.2、MTT法测定Amp对膀胱癌细胞株SW780增殖作用的影响 | 第19-20页 |
2.2.1、96孔板培养 | 第19页 |
2.2.2、加药 | 第19-20页 |
2.2.3、加MTT染料 | 第20页 |
2.2.4、测OD值 | 第20页 |
3、实验结果 | 第20-22页 |
3.1、Amp处理人膀胱癌细胞株SW780 48 h对其增殖的影响 | 第20-21页 |
3.2、Amp处理人膀胱癌细胞株SW780 72 h对其增殖的影响 | 第21-22页 |
3.3、Amp处理人膀胱癌细胞株SW780 48 h、72 h的差异性 | 第22页 |
4、实验小结 | 第22-24页 |
第三部分、Amp诱导人膀胱癌细胞株SW780凋亡机理的研究 | 第24-45页 |
一、荧光显微镜观察不同浓度Amp处理人膀胱癌细胞株SW780 48h细胞的凋亡状态 | 第24-28页 |
1、实验材料 | 第24页 |
2、实验方法 | 第24-25页 |
2.1、细胞悬液的制备 | 第24页 |
2.2、给药 | 第24-25页 |
2.3、样本的处理及检测 | 第25页 |
3、实验结果 | 第25-28页 |
4、实验小结 | 第28页 |
二、激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位,细胞pH及细胞内Ca~(2+)浓度的变化 | 第28-33页 |
1、实验材料与试剂 | 第28页 |
2、实验方法 | 第28-30页 |
2.1、细胞悬液的制备 | 第28-29页 |
2.2、给药 | 第29页 |
2.3、样本的处理 | 第29页 |
2.4、激光共聚焦显微镜检测并分析 | 第29-30页 |
3、实验结果 | 第30-32页 |
3.1、激光共聚焦检测线粒体膜电位的变化 | 第30-31页 |
3.2、激光共聚焦检测细胞内Ca~(2+)浓度的变化 | 第31-32页 |
3.3、激光共聚焦显微镜检测细胞内pH值的变化 | 第32页 |
4、实验小结 | 第32-33页 |
三、Western Blot检测Amp对人膀胱癌细胞株SW780表达蛋白p-Bcl-2、Bax与Cleaved caspase-3的影响 | 第33-45页 |
1、实验材料与试剂 | 第33-36页 |
2、实验方法 | 第36-38页 |
2.1、细胞培养及Amp处理 | 第36页 |
2.2、细胞蛋白的提取与含量测定 | 第36-37页 |
2.3、Western Blot步骤 | 第37-38页 |
3、实验结果 | 第38-43页 |
3.1、Amp处理人膀胱癌细胞株SW780不同时间时p-Bcl-2、Bax蛋白相对表达量 | 第38-39页 |
3.2、不同浓度Amp处理人膀胱癌细胞株SW780 p-Bcl-2、Bax蛋白相对表达量 | 第39-41页 |
3.3、不同浓度Amp处理人膀胱癌细胞株SW780 48 h Cleaved caspase-3蛋白相对表达量 | 第41-42页 |
3.4、Amp处理人膀胱癌细胞株SW780不同时间时Cleaved caspase-3蛋白相对表达量 | 第42-43页 |
4、实验小结 | 第43-45页 |
第四部分、实验讨论 | 第45-52页 |
1、Amp对人膀胱癌细胞株SW780增值的抑制作用 | 第45-46页 |
2、Amp诱导人膀胱癌细胞株SW780凋亡机理的研究 | 第46-51页 |
2.1、Amp诱导人膀胱癌细胞株SW780凋亡线粒体膜电位、细胞pH值及细胞内Ca~(2+)浓度的变化 | 第46页 |
2.2、Amp诱导人膀胱癌细胞株SW780凋亡细胞状态的变化 | 第46-48页 |
2.3、Amp诱导人膀胱癌细胞株SW780凋亡p-Bcl-2、Bax与Cleavedcaspase-3蛋白的表达变化 | 第48-51页 |
直观图 | 第51-52页 |
第五部分、结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
附录一、缩略词表 | 第56-57页 |
附录二、MTT试验相关数据 | 第57-59页 |
附录三、激光共聚焦检测线粒体膜电位图 | 第59-60页 |
附录四、激光共聚焦检测Ca~(2+)图 | 第60-61页 |
附录五、激光共聚焦检测pH图 | 第61-62页 |
在学期间的研究成果 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |