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拟南芥胱硫醚β-裂解酶具有催化H2S产生的新功能

基金资助第4-11页
中文摘要第11-13页
ABSTRACT第13-14页
第一章 综述第15-31页
    1.1 H_2S第15-17页
        1.1.1 H_2S的毒性第15-16页
        1.1.2 H_2S与气体信号分子第16-17页
    1.2 气体信号分子H_2S的研究进展第17-25页
        1.2.1 动物中H_2S生理功能研究进展第17-18页
        1.2.2 植物中H_2S生理功能研究进展第18-25页
    1.3 H_2S的内源产生酶的研究进展第25-28页
        1.3.1 动物中催化内源性H_2S产生的酶第25-27页
        1.3.2 植物中催化内源性H_2S产生的酶第27-28页
    1.4 本实验的研究内容及意义第28-31页
        1.4.1 研究内容第28-29页
        1.4.2 研究意义第29-31页
第二章 pMD18-T-AtCBL重组载体与pET28a-AtCBL原核表达载体的构建第31-39页
    2.1 材料、试剂和仪器第31页
    2.2 pMD18-T-AtCBL重组载体的构建、转化及鉴定第31-37页
        2.2.1 野生型拟南芥RNA的提取与反转录第31-33页
        2.2.2 目的基因的克隆第33-34页
        2.2.3 重组载体的构建与转化第34-35页
        2.2.4 重组质粒的提取、酶切与测序鉴定第35-37页
    2.3 pET28a-AtCBL原核表达载体的构建第37-39页
        2.3.1 重组载体的构建与转化第37-39页
第三章 AtCBL的诱导表达第39-43页
    3.1 材料、试剂和仪器第39页
        3.1.1 菌株第39页
        3.1.2 试剂第39页
        3.1.3 仪器第39页
    3.2 大肠杆菌中AtCBL的诱导表达第39-40页
    3.3 SDS-PAGE蛋白电泳胶体的制备第40页
    3.4 蛋白样品的制备第40-43页
第四章 AtCBL催化H_2S产生的酶活测定第43-45页
    4.1 试剂和仪器第43页
        4.1.1 试剂第43页
        4.1.2 仪器第43页
    4.2 H_2S产率测定第43-45页
第五章 实验结果分析与讨论第45-53页
    5.1 pMD18-T-AtCBL重组载体与pET28a-AtCBL原核表达载体的构建第45-48页
        5.1.1 拟南芥植株的培养第45页
        5.1.2 拟南芥总RNA的提取第45页
        5.1.3 拟南芥AtCBL基因的克隆与回收第45-46页
        5.1.4 重组质粒pMD18-T-AtCBL的构建、转化和鉴定第46-47页
        5.1.5 重组质粒pET28a-AtCBL的构建、转化和鉴定第47-48页
    5.2 大肠杆菌重组AtCBL蛋白的诱导表达及鉴定第48-49页
    5.3 重组AtCBL蛋白催化H_2S产生的酶活测定第49-50页
    5.4 讨论第50-53页
参考文献第53-61页
附录第61-62页
攻读硕士学位期间取得的成果第62-63页
致谢第63-65页
个人简况及联系方式第65-66页

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