致谢 | 第5-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
缩略词表 | 第15-20页 |
1 引言 | 第20-33页 |
1.1 PRRS的功能研究进展简介 | 第21-30页 |
1.1.1 RLRS结构、组成及功能介绍 | 第22-25页 |
1.1.2 TLRS结构、组成及功能介绍 | 第25-27页 |
1.1.3 DNA模式识别受体结构、组成及功能介绍 | 第27-30页 |
1.2 TRAF3泛素化研究进展简介 | 第30-33页 |
2 实验材料与方法 | 第33-58页 |
2.1 实验材料 | 第33-38页 |
2.1.1 实验动物 | 第33-34页 |
2.1.2 实验细胞 | 第34页 |
2.1.3 实验病毒、细菌 | 第34-35页 |
2.1.4 实验仪器、试剂与耗材 | 第35-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-58页 |
2.2.1 主要溶液的配置 | 第38-40页 |
2.2.2 细胞复苏、传代与冻存 | 第40-41页 |
2.2.3 细胞总RNA的提取及荧光定量PCR | 第41-44页 |
2.2.4 细胞总DNA的提取及MHV68 GENOME COPY NUMBER测定 | 第44-45页 |
2.2.5 细胞蛋白提取、浓度测定及WESTERN BLOT | 第45-47页 |
2.2.6 细胞因子ELISA测定 | 第47页 |
2.2.7 质粒扩增及抽提 | 第47-48页 |
2.2.8 原代巨噬细胞和MEF细胞提取与培养 | 第48-49页 |
2.2.9 髓系细胞系特异性RIOK3敲除小鼠基因鉴定 | 第49-51页 |
2.2.10 病毒扩增、滴度测定及体内感染 | 第51-54页 |
2.2.11 金黄色葡萄球菌生长曲线与CFU测定 | 第54页 |
2.2.12 细胞转染与干扰 | 第54-56页 |
2.2.13 免疫共沉淀 | 第56页 |
2.2.14 体外泛素化实验 | 第56-57页 |
2.2.15 激光共聚焦(CONFOCAL)实验 | 第57页 |
2.2.16 RAW264.7稳转细胞系的构建 | 第57-58页 |
2.2.17 统计学处理 | 第58页 |
3 实验结果 | 第58-92页 |
3.1 髓系细胞系RIOK3条件性敲除小鼠的构建 | 第58-59页 |
3.2 RIOK3在体内外负向调控抗病毒天然免疫应答 | 第59-73页 |
3.2.1 RIOK3的缺失选择性抑制RNA病毒体外复制 | 第60-67页 |
3.2.2 RIOK3的缺失抑制RNA病毒体内复制 | 第67-72页 |
3.2.3 RIOK3的缺失促进RNA病毒感染激活的Ⅰ型干扰素信号通路 | 第72-73页 |
3.3 RIOK3负向调控RIG-I/MDA5激活诱导的抗病毒信号通路 | 第73-79页 |
3.4 RIOK3正向调控TLR3/TLR4激活诱导的抗病毒信号通路 | 第79-83页 |
3.5 RIOK3不影响DNA胞质受体激活诱导的抗病毒信号通路 | 第83-85页 |
3.6 RIOK3结合并催化TRAF3泛素化降解 | 第85-92页 |
4 讨论 | 第92-94页 |
5 小结 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-106页 |
综述 | 第106-120页 |
参考文献 | 第114-120页 |
作者简介及攻读学位期间科研成果 | 第120页 |