摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第12-15页 |
1.材料与方法 | 第15-45页 |
1.1 主要实验材料 | 第15-17页 |
1.2 主要设备 | 第17-19页 |
1.3 实验方法 | 第19-44页 |
1.3.1 颗粒物的采集与处理 | 第19页 |
1.3.2 细胞培养 | 第19-21页 |
1.3.3 制备PM_(2.5)混悬液 | 第21-22页 |
1.3.4 CCK-8 法检测细胞活力 | 第22页 |
1.3.5 检测IL6、IL1β 的转录水平 | 第22-23页 |
1.3.6 ELISA测炎性因子的蛋白水平 | 第23-25页 |
1.3.7 不同浓度PM_(2.5)刺激HUVECs的测序结果分析 | 第25-28页 |
1.3.8 检测候选lncRNA的转录本水平 | 第28-29页 |
1.3.9 胞浆胞核亚细胞定位实验 | 第29-31页 |
1.3.10 瞬时转染确定lncRNA有效的干扰序列 | 第31-32页 |
1.3.11 lncRNA功能验证试验 | 第32-33页 |
1.3.12 ChIRP-MS实验 | 第33-38页 |
1.3.13 蛋白免疫印迹法(Western blot) | 第38-43页 |
1.3.14 检测阻断NFκB信号通路后lnc RNA表达变化 | 第43-44页 |
1.4 统计学处理 | 第44-45页 |
2.结果 | 第45-62页 |
2.1 PM_(2.5)诱导HUVECs产生炎性反应 | 第45-47页 |
2.1.1 CCK-8 法检测PM_(2.5)对HUVECs细胞活力的影响 | 第45页 |
2.1.2 PM_(2.5)对IL6、IL1β 的转录水平和蛋白水平的影响 | 第45-47页 |
2.2 筛选出与炎症相关异常表达的lnc RNA | 第47-53页 |
2.3 NONHSAT247851.1 的功能验证 | 第53-55页 |
2.4 NONHSAT247851.1 的促炎症机制探究 | 第55-62页 |
2.4.1 NONHSAT247851.1 的亚细胞定位实验 | 第55-56页 |
2.4.2 验证raf-1 与NONHSAT247851.1 相互结合 | 第56-60页 |
2.4.3 NONHSAT247851.1 与NFκB之间的相互关系 | 第60-62页 |
3.讨论 | 第62-70页 |
4.总结 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
附录 | 第80-83页 |
综述 | 第83-93页 |
参考文献 | 第89-93页 |
致谢 | 第93-95页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第95页 |