摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6页 |
1 前言 | 第9-20页 |
1.1 木薯概况 | 第9页 |
1.1.1 木薯起源和分布 | 第9页 |
1.1.2 木薯主要经济利用价值 | 第9页 |
1.2 植物淀粉合成和代谢相关酶基因的研究现状 | 第9-13页 |
1.2.1 植物颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS)基因 | 第9-10页 |
1.2.2 植物淀粉分支酶(SBE)基因 | 第10-11页 |
1.2.3 中性/碱性转化酶基因家族 | 第11-12页 |
1.2.4 己糖激酶基因 | 第12-13页 |
1.3 荧光原位杂交技术的原理和发展 | 第13-15页 |
1.3.1 染色体制片技术的发展 | 第13-14页 |
1.3.2 探针的分类的标记系统的发展 | 第14-15页 |
1.4 染色体原位杂交技术的应用 | 第15-16页 |
1.4.1 植物rDNA-FISH分析的应用 | 第15-16页 |
1.4.2 在构建植物染色体物理图谱上的应用 | 第16页 |
1.4.3 物种起源进化及物种间亲缘关系的分析 | 第16页 |
1.4.4 植物基因工程及基因表达研究 | 第16页 |
1.5 木薯细胞遗传学研究进展 | 第16-18页 |
1.5.1 木薯核型的研究 | 第17页 |
1.5.2 木薯分子细胞遗传学研究 | 第17-18页 |
1.6 本研究的目的意义和技术路线 | 第18-20页 |
1.6.1 研究的目的和意义 | 第18-19页 |
1.6.2 实验技术路线 | 第19-20页 |
2.材料与方法 | 第20-27页 |
2.1 材料与试剂 | 第20-21页 |
2.1.1 实验材料与试剂 | 第20页 |
2.1.2 实验用仪器 | 第20页 |
2.1.3 实验试剂 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-27页 |
2.2.1 染色体标本的制备方法 | 第21-22页 |
2.2.2 木薯DNA的提取方法 | 第22页 |
2.2.3 特异引物的合成 | 第22-23页 |
2.2.4 特异PCR反应体系、扩增程序及PCR扩增产物的纯化回收与测序 | 第23-25页 |
2.2.5 木薯荧光原位杂交技术流程 | 第25-27页 |
3 结果与分析 | 第27-43页 |
3.1 木薯基因组DNA检测 | 第27-28页 |
3.2 基因特异DNA序列的扩增与测序比对结果 | 第28-31页 |
3.3 探针制备与标记效果的检测 | 第31-32页 |
3.4 木薯荧光原位杂交技术体系的优化 | 第32-36页 |
3.4.1 根尖预处理的优化 | 第32-34页 |
3.4.2 染色体标本预处理的优化 | 第34页 |
3.4.3 染色体标本后处理优化 | 第34-36页 |
3.5 基因的染色体定位分析 | 第36-41页 |
3.5.1 GBSS和SBEI基因的染色体定位结果 | 第36-38页 |
3.5.2 MeNINVI基因的FISH分析 | 第38-39页 |
3.5.3 MeHXK2基因的FISH分析 | 第39-40页 |
3.5.4 nINV1基因的FISH分析 | 第40-41页 |
3.6 基因之间的连锁分析 | 第41-42页 |
3.7 杂交信号位点检出率统计 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
4.1 染色体标本制备方法的改进 | 第43页 |
4.2 FISH中信号检出率和信号点个数的讨论 | 第43-44页 |
4.3 木薯FISH技术要点的探讨 | 第44页 |
4.4 目的基因位置确定及基因间连锁分布特点的讨论 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
附录Ⅰ | 第54-57页 |
附录Ⅱ | 第57-58页 |
附录Ⅲ | 第58-60页 |
致谢 | 第60页 |