| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 主要缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 药物洗脱支架的现状 | 第13页 |
| 1.2 VE-钙粘素的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 VE-钙粘素介导内皮细胞粘附的机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 VE-钙粘素在血管新生与功能维持中的作用 | 第15-16页 |
| 1.3 贻贝蛋白的应用 | 第16-18页 |
| 1.3.1 贻贝蛋白的来源与功能 | 第16-18页 |
| 1.3.2 贻贝蛋白在生物材料领域的应用 | 第18页 |
| 1.4 融合蛋白的研究现状 | 第18-20页 |
| 1.4.1 基于细胞生长因子的融合蛋白 | 第18-19页 |
| 1.4.2 基于细胞粘附因子的融合蛋白 | 第19页 |
| 1.4.3 基于IgG的Fc段的融合蛋白 | 第19-20页 |
| 1.5 研究内容、意义及技术路线与创新点 | 第20-23页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第20-21页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第21-22页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第22页 |
| 1.5.4 研究创新点 | 第22-23页 |
| 2 VE-M融合蛋白的构建与表达 | 第23-33页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验试剂及仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.3.1 目的片段的获得 | 第24-28页 |
| 2.3.2 表达载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.3.3 融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第29页 |
| 2.3.4 免疫印迹鉴定 | 第29-30页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第30-31页 |
| 2.4.1 VE-M融合蛋白的表达载体构建成功 | 第30-31页 |
| 2.4.2 VE-M融合蛋白的成功表达及纯化 | 第31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-33页 |
| 3 VE-M融合蛋白生物活性涂层的制备与表征 | 第33-41页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验试剂及仪器 | 第33-34页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第33-34页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.3.1 VE-M融合蛋白生物活性涂层的制备 | 第34-35页 |
| 3.3.2 表面等离子体共振测试 | 第35页 |
| 3.3.3 AFM表面形貌观察 | 第35-36页 |
| 3.3.4 静态水接触角测试 | 第36页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第36-39页 |
| 3.4.1 荧光标记融合蛋白的涂层观察 | 第36-37页 |
| 3.4.2 SPR跟踪涂层形成过程 | 第37-38页 |
| 3.4.3 VE-M融合蛋白对不锈钢表面亲形貌的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.4 VE-M融合蛋白对不锈钢表面亲疏水性的影响 | 第39页 |
| 3.5 讨论 | 第39-41页 |
| 4 VE-M融合蛋白的血液相容性 | 第41-45页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 实验试剂及仪器 | 第41-42页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第41页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第41-42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42页 |
| 4.3.1 溶血率测试 | 第42页 |
| 4.3.2 血小板粘附实验 | 第42页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第42-44页 |
| 4.4.1 VE-M融合蛋白不会升高溶血率 | 第42-43页 |
| 4.4.2 VE-M融合蛋白抑制血小板粘附 | 第43-44页 |
| 4.5 讨论 | 第44-45页 |
| 5 VE-M融合蛋白对内皮细胞与内皮祖细胞粘附的影响 | 第45-57页 |
| 5.1 引言 | 第45页 |
| 5.2 实验试剂及仪器 | 第45-46页 |
| 5.2.1 实验试剂 | 第45-46页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第46页 |
| 5.3 实验方法 | 第46-49页 |
| 5.3.1 内皮细胞的培养 | 第46页 |
| 5.3.2 内皮细胞粘附实验 | 第46-47页 |
| 5.3.3 内皮祖细胞的分离与鉴定 | 第47页 |
| 5.3.4 内皮祖细胞的粘附实验 | 第47页 |
| 5.3.5 内皮细胞粘附的中和试验 | 第47-48页 |
| 5.3.6 内源性VE-钙粘素的表达水平检测 | 第48-49页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第49-56页 |
| 5.4.1 VE-M融合蛋白高效地促进内皮细胞的粘附 | 第49-51页 |
| 5.4.2 VE-M融合蛋白有效地促进内皮祖细胞的粘附 | 第51-52页 |
| 5.4.3 VE-M融合蛋白特异地通过VE-钙粘素的相互作用促进内皮细胞的粘附 | 第52-54页 |
| 5.4.4 VE-M融合蛋白能上调内源性VE-钙粘素的表达 | 第54-56页 |
| 5.5 讨论 | 第56-57页 |
| 6 VE-M融合蛋白对内皮细胞增殖和功能的影响 | 第57-69页 |
| 6.1 引言 | 第57页 |
| 6.2 实验试剂及仪器 | 第57-58页 |
| 6.2.1 实验试剂 | 第57-58页 |
| 6.2.2 实验仪器 | 第58页 |
| 6.3 实验方法 | 第58-60页 |
| 6.3.1 内皮细胞增殖实验 | 第58页 |
| 6.3.2 内皮细胞的骨架染色 | 第58-59页 |
| 6.3.3 内皮细胞的通透性检测 | 第59页 |
| 6.3.4 紧密连接蛋白的荧光定量PCR | 第59页 |
| 6.3.5 eNOS的ELASE测定 | 第59页 |
| 6.3.6 THP-1粘附实验 | 第59-60页 |
| 6.4 实验结果与分析 | 第60-67页 |
| 6.4.1 VE-M融合蛋白能促进内皮细胞增殖 | 第60-62页 |
| 6.4.2 VE-M融合蛋白能促进内皮细胞的紧密连接 | 第62-65页 |
| 6.4.3 VE-M融合蛋白能促进eNOS的表达 | 第65-66页 |
| 6.4.4 VE-M融合蛋白不会增加内皮细胞的炎症 | 第66-67页 |
| 6.5 讨论 | 第67-69页 |
| 7 VE-M融合蛋白涂层支架的动物实验 | 第69-81页 |
| 7.1 引言 | 第69页 |
| 7.2 实验试剂及仪器 | 第69-70页 |
| 7.2.1 实验试剂 | 第69-70页 |
| 7.2.2 实验仪器 | 第70页 |
| 7.2.3 实验材料 | 第70页 |
| 7.3 实验方法 | 第70-72页 |
| 7.3.1 支架的准备 | 第70页 |
| 7.3.2 手术前准备 | 第70-71页 |
| 7.3.3 大鼠腹主动脉支架植入 | 第71页 |
| 7.3.4 术后动物喂养与观察 | 第71页 |
| 7.3.5 实验样品的采集 | 第71-72页 |
| 7.3.6 样本的支架电解 | 第72页 |
| 7.3.7 样本的处理 | 第72页 |
| 7.4 实验结果与分析 | 第72-79页 |
| 7.4.1 Enface免疫荧光染色结果观察 | 第72-75页 |
| 7.4.2 石蜡切片HE染色形态学观察分析 | 第75-78页 |
| 7.4.3 扫描电镜样本形态学观察 | 第78-79页 |
| 7.5 讨论 | 第79-81页 |
| 8 结论及后续工作建议 | 第81-83页 |
| 8.1 主要结论 | 第81页 |
| 8.2 存在不足和后续工作建议 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 附录 | 第95-96页 |
| A.作者攻读硕士期间的科研成果 | 第95页 |
| B.作者攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第95页 |
| C.VE-M基因序列(VE-cadEC1-2/linker/Mfp-5) | 第95-96页 |
