| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 绪论 | 第12-18页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第12-13页 |
| 1.2 白桦三萜化合物合成途径 | 第13-15页 |
| 1.2.1 白桦三萜化合物 | 第13页 |
| 1.2.2 三萜类化合物的合成途径 | 第13-15页 |
| 1.3 植物次生代谢途径的调控 | 第15-18页 |
| 1.3.1 外源诱导子的调控作用 | 第15-16页 |
| 1.3.2 关键酶基因的调控作用 | 第16-17页 |
| 1.3.3 转录因子的调控作用 | 第17-18页 |
| 2 白桦BpMYB21和BpMYB61基因克隆及生物信息学分析 | 第18-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-20页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第18页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.2 结果与分析 | 第20-30页 |
| 2.2.1 BpMYB21 cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第20-25页 |
| 2.2.2 BpMYB61 cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第25-30页 |
| 2.3 讨论 | 第30-31页 |
| 2.4 本章小结 | 第31-32页 |
| 3 白桦BpMYB21和BpMYB61基因表达模式分析 | 第32-44页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32页 |
| 3.1.1 材料与试剂 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 BpMYB21和BpMYB61基因的实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 3.2.2 BpMYB21和BpMYB61基因的亚细胞定位 | 第33-36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-42页 |
| 3.3.1 白桦BpMYB21和BpMYB61不同月份表达模式 | 第36页 |
| 3.3.2 白桦BpMYB21和BpMYB61组织特异性表达 | 第36-37页 |
| 3.3.3 BpMYB21和BpMYB61基因对不同植物激素诱导的响应模式 | 第37-41页 |
| 3.3.4 BpMYB21和BpMYB61蛋白在洋葱表皮细胞内的分布 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 3.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 4 白桦BpMYB21和BpMYB61基因的启动子克隆与分析 | 第44-56页 |
| 4.1 材料与方法 | 第44-48页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第44页 |
| 4.1.2 菌种与载体 | 第44页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第44页 |
| 4.1.4 实验方法 | 第44-48页 |
| 4.2 结果与分析 | 第48-54页 |
| 4.2.1 BpMYB21和BpMYB61基因启动子序列克隆 | 第48-49页 |
| 4.2.2 BpMYB21和BpMYB61基因启动子序列分析 | 第49-53页 |
| 4.2.3 BpMYB21和BpMYB61基因启动子活性分析 | 第53-54页 |
| 4.3 讨论 | 第54-55页 |
| 4.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 5 白桦BpMYB21和BpMYB61基因在酿酒酵母中的表达 | 第56-64页 |
| 5.1 材料及方法 | 第56-59页 |
| 5.1.1 菌株和载体 | 第56页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第56页 |
| 5.1.3 实验方法 | 第56-59页 |
| 5.2 结果与分析 | 第59-62页 |
| 5.2.1 酵母重组子的获得 | 第59-60页 |
| 5.2.2 重组酵母鲨烯产量的检测 | 第60-61页 |
| 5.2.3 重组酵母总三萜产量的检测 | 第61-62页 |
| 5.3 讨论 | 第62-63页 |
| 5.4 本章小结 | 第63-64页 |
| 6 白桦BpMYB21和BpMYB61过表达载体遗传转化及对三萜基因表达的影响 | 第64-72页 |
| 6.1 材料与方法 | 第64-66页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第64页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第64页 |
| 6.1.3 实验方法 | 第64页 |
| 6.1.4 pCAMBIA1303-BpMYB21和pCAMBIA1303-BpMYB61农杆菌介导侵染白桦组培苗 | 第64-65页 |
| 6.1.5 转基因白桦DNA提取 | 第65页 |
| 6.1.6 转基因白桦PCR鉴定 | 第65页 |
| 6.1.7 野生型以及转基因白桦组培苗RNA的提取及反转录cDNA | 第65页 |
| 6.1.8 转基因白桦苗三萜合成关键基因的表达 | 第65-66页 |
| 6.2 结果与分析 | 第66-70页 |
| 6.2.1 BpMYB21和BpMYB61基因遗传转化与转基因白桦的鉴定 | 第66-69页 |
| 6.2.2 BpMYB21和BpMYB61转基因白桦苗三萜合成关键基因的表达 | 第69-70页 |
| 6.3 讨论 | 第70-71页 |
| 6.4 本章小结 | 第71-72页 |
| 7 白桦BpMYB21和BpMYB61转录因子对白桦三萜合成途径基因的调控 | 第72-82页 |
| 7.1 材料与方法 | 第72-75页 |
| 7.1.1 实验材料 | 第72页 |
| 7.1.2 实验试剂 | 第72页 |
| 7.1.3 试验方法 | 第72-75页 |
| 7.2 结果与分析 | 第75-80页 |
| 7.2.1 MBS元件的构建 | 第75-76页 |
| 7.2.2 诱饵载体的构建 | 第76页 |
| 7.2.3 pHis-元件酵母的自转录激活验证 | 第76-78页 |
| 7.2.4 pGADT7-Rec2重组载体的构建及重组酵母的遗传转化 | 第78-79页 |
| 7.2.5 MBS元件与BpMYB21和BpMYB61的互作 | 第79-80页 |
| 7.3 讨论 | 第80-81页 |
| 7.4 本章小结 | 第81-82页 |
| 结论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-93页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
