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柑橘黄化脉明病毒侵染对柠檬基因及小RNA表达的影响

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第12-13页
第一章 文献综述第13-24页
    1.1 柑橘黄化脉明病毒(CYVCV)的研究第13-17页
        1.1.1 CYVCV的发现及分布第13-14页
        1.1.2 CYVCV传播方式与寄主范围第14页
        1.1.3 CYVCV分子生物学特性第14-16页
        1.1.4 柑橘黄化脉明病毒的防控第16-17页
    1.2 miRNA与植物基因表达第17-19页
        1.2.1 miRNA的发现第17页
        1.2.2 植物miRNA的调控模式第17-18页
        1.2.3 植物miRNA对基因的调控第18-19页
    1.3 病毒侵染对寄主植物miRNA及基因表达的影响第19-22页
        1.3.1 植物病毒调控寄主基因表达第19-20页
        1.3.2 miRNA表达与病毒侵染第20-22页
    1.4 转录组测序和小RNA测序在植物响应生物胁迫中的应用第22页
    1.5 研究目的和意义第22-24页
第二章 转录组测序鉴定CYVCV侵染诱导柠檬差异表达基因第24-51页
    2.1 研究材料第24-25页
        2.1.1 植物材料第24-25页
        2.1.2 所用试剂第25页
    2.2 研究方法第25-30页
        2.2.1 转录组测序第25-26页
        2.2.2 转录组测序数据分析第26页
        2.2.3 总RNA提取第26-27页
        2.2.4 RNA的DNA消化处理第27页
        2.2.5 总RNA反转录第27-28页
        2.2.6 巢式RT-PCR扩增第28页
        2.2.7 引物设计及qRT-PCR第28-30页
    2.3 结果与分析第30-48页
        2.3.1 嫁接接种CYVCV柠檬植株病毒检测及症状观察第30-31页
        2.3.2 柠檬叶片中CYVCV相对含量的qRT-PCR检测第31-32页
        2.3.3 测序结果分析第32-33页
        2.3.4 差异表达基因筛选第33-34页
        2.3.5 差异表达基因功能注释第34-37页
        2.3.6 CYVCV侵染对寄主候选基因的时间动态影响第37-44页
        2.3.7 差异表达基因在三种柑橘类植物中的时间动态分析第44-47页
        2.3.8 接种及模拟接种CYVCV柠檬第60d叶片样品转录组测序分析第47-48页
    2.4 小结与讨论第48-51页
第三章 小RNA测序鉴定柑橘黄化脉明病毒诱导柠檬差异表达miRNA第51-71页
    3.1 研究材料第51页
        3.1.1 植物材料第51页
        3.1.2 所用试剂第51页
    3.2 研究方法第51-56页
        3.2.1 小RNA测序第51-52页
        3.2.2 小RNA测序数据分析第52-53页
        3.2.3 引物设计及miRNA的定量RT-PCR分析第53-54页
        3.2.4 目标片段的回收第54-55页
        3.2.5 目标片段连接克隆载体第55页
        3.2.6 热激转化大肠杆菌DH5α感受态细胞第55页
        3.2.7 阳性克隆筛选及测序第55-56页
    3.3 结果与分析第56-69页
        3.3.1 小RNA测序结果分析第56-57页
        3.3.2 差异表达miRNA分析第57-58页
        3.3.3 新miRNA鉴定第58-60页
        3.3.4 差异表达miRNA靶基因预测及功能分析第60-65页
        3.3.5 CYVCV侵染的柠檬植株中差异表达miRNA时间动态分析第65-66页
        3.3.6 差异表达的已知miRNA与第60d柠檬叶片样品转录组测序关联分析第66-68页
        3.3.7 来源于CYVCV的vsiRNA分析第68-69页
    3.4 小结与讨论第69-71页
第四章 全文结论与展望第71-72页
参考文献第72-84页
附录A:常用溶液配方第84-85页
附录B:差异表达miRNA信息第85-86页
硕士期间已发表或已接收的文章第86-87页
致谢第87页

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