摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
技术路线 | 第12-13页 |
缩略语表 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-19页 |
1.1 植物挥发物简介 | 第14-15页 |
1.2 昆虫对气味物质的识别 | 第15页 |
1.3 气味结合蛋白(OBPs)的特征及功能 | 第15-16页 |
1.4 OBPs的研究方法 | 第16-17页 |
1.5 稻纵卷叶螟简介 | 第17-18页 |
1.6 研究目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 稻纵卷叶螟翅与足的扫描电镜 | 第19-25页 |
2.1 材料与方法 | 第19-20页 |
2.1.1 供试虫源 | 第19-20页 |
2.1.2 样品制备与观察 | 第20页 |
2.1.3 触角感器的鉴定与命名 | 第20页 |
2.2 结果与分析 | 第20-23页 |
2.2.1 稻纵卷叶螟翅上感器的扫描 | 第20-21页 |
2.2.2 稻纵卷叶螟足上感器的扫描 | 第21-23页 |
2.3 讨论 | 第23-25页 |
第三章 稻纵卷叶螟OBPs基因的克隆及序列分析 | 第25-34页 |
3.1 材料与方法 | 第25-30页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第25-26页 |
3.1.2 供试试剂 | 第26页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第26页 |
3.1.4 稻纵卷叶螟PCR模板的制备 | 第26-28页 |
3.1.5 稻纵卷叶螟CmedOBPs基因的克隆 | 第28-30页 |
3.2 结果分析 | 第30-32页 |
3.2.1 稻纵卷叶螟6个CmedOBPs基因的分析 | 第30-31页 |
3.2.2 稻纵卷叶螟OBPs基因的克隆 | 第31-32页 |
3.3 讨论 | 第32-34页 |
第四章 稻纵卷叶螟OBPs基因的时空表达分析 | 第34-41页 |
4.1 材料与方法 | 第34-37页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第34页 |
4.1.2 主要试剂 | 第34页 |
4.1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
4.1.4 样品RNA的提取 | 第35页 |
4.1.5 cDNA第一条链的合成 | 第35页 |
4.1.6 引物设计及合成 | 第35-36页 |
4.1.7 qPCR反应 | 第36-37页 |
4.1.8 数据分析 | 第37页 |
4.2 结果和分析 | 第37-40页 |
4.2.1 引物特异性和扩增效率检测 | 第37页 |
4.2.2 稻纵卷叶螟CmedOBPs基因的时空表达 | 第37-40页 |
4.3 讨论 | 第40-41页 |
第五章 稻纵卷叶螟OBPs的表达、纯化及结合特性分析 | 第41-66页 |
5.1 材料与方法 | 第42-50页 |
5.1.1 供试试剂 | 第42-44页 |
5.1.2 主要仪器设备 | 第44页 |
5.1.3 原核表达载体的构建 | 第44-46页 |
5.1.4 目的蛋白的表达 | 第46-48页 |
5.1.5 荧光竞争结合 | 第48页 |
5.1.6 荧光猝灭 | 第48-49页 |
5.1.7 数据分析 | 第49-50页 |
5.2 结果分析 | 第50-64页 |
5.2.1 原核表达载体的构建 | 第50页 |
5.2.2 目的蛋白的表达与纯化 | 第50-51页 |
5.2.3 荧光竞争结合 | 第51-53页 |
5.2.4 CmedOBP14与挥发物的结合特性 | 第53-56页 |
5.2.5 CmedOBP5与挥发物的结合特性 | 第56-59页 |
5.2.6 荧光猝灭结果 | 第59-64页 |
5.3 讨论 | 第64-66页 |
第六章 行为活性物质的筛选 | 第66-76页 |
6.1 材料与方法 | 第67-70页 |
6.1.1 供试昆虫 | 第67页 |
6.1.2 实验试剂 | 第67页 |
6.1.3 主要仪器 | 第67-68页 |
6.1.4 CmedOBP14基因的干扰 | 第68-69页 |
6.1.5 触角电位(EAG)反应 | 第69页 |
6.1.6 H型嗅觉实验 | 第69-70页 |
6.1.7 数据处理与分析 | 第70页 |
6.2 结果分析 | 第70-74页 |
6.3 讨论 | 第74-76页 |
第七章 结果与展望 | 第76-78页 |
7.1 主要结果 | 第76-77页 |
7.2 展望 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-91页 |
致谢 | 第91页 |