| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-31页 |
| 1.1 植物雄性不育 | 第11-16页 |
| 1.1.1 植物雄性不育的概述 | 第11页 |
| 1.1.2 植物雄性不育的类型 | 第11-12页 |
| 1.1.3 植物雄性不育遗传机制 | 第12-13页 |
| 1.1.4 十字花科雄性不育的细胞学研究 | 第13-14页 |
| 1.1.5 雄性不育的分子生物学研究 | 第14-16页 |
| 1.2 植物隐性核雄性不育的研究 | 第16-17页 |
| 1.3 植物自交不亲和 | 第17-20页 |
| 1.3.1 植物自交不亲和性概述 | 第17-18页 |
| 1.3.2 植物自交不亲和性遗传机制 | 第18-20页 |
| 1.4 植物激素茉莉酸的研究进展 | 第20-23页 |
| 1.4.1 茉莉酸的简介 | 第20页 |
| 1.4.2 茉莉酸的生物合成途径 | 第20-21页 |
| 1.4.3 JA与雄性不育 | 第21-23页 |
| 1.4.4 JA与植物抗逆性 | 第23页 |
| 1.5 RNA干扰技术 | 第23-24页 |
| 1.6 DNA双链断裂修复机制 | 第24-25页 |
| 1.7 基因组编辑技术 | 第25-29页 |
| 1.7.1 ZFN技术 | 第25页 |
| 1.7.2 TALENs技术 | 第25页 |
| 1.7.3 CRISPER/Cas技术 | 第25-29页 |
| 1.8 甘蓝雄性不育研究现状 | 第29-31页 |
| 第2章 引言 | 第31-37页 |
| 2.1 研究目的与意义 | 第31-33页 |
| 2.2 研究思路与技术路线 | 第33-34页 |
| 2.2.1 研究思路 | 第33-34页 |
| 2.2.2 技术路线 | 第34页 |
| 2.3 研究内容 | 第34-37页 |
| 2.3.1 拟南芥表达载体,甘蓝干扰、敲除表达载体的构建 | 第34页 |
| 2.3.2 转基因植株的获得 | 第34-35页 |
| 2.3.3 阳性转基因植株的鉴定以及基因表达分析 | 第35-37页 |
| 第3章 BoEMS1基因功能鉴定 | 第37-53页 |
| 3.1 试验材料和用具 | 第37-39页 |
| 3.1.1 供试植物材料 | 第37页 |
| 3.1.2 菌株与载体质粒 | 第37页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第37页 |
| 3.1.4 试验主要溶液与培养基配方 | 第37-38页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第38-39页 |
| 3.1.6 试验引物 | 第39页 |
| 3.2 试验方法 | 第39-46页 |
| 3.2.1 表达载体的构建 | 第39-43页 |
| 3.2.2 表达载体质粒转化农杆菌 | 第43-44页 |
| 3.2.3 花絮浸泡法转化拟南芥 | 第44-45页 |
| 3.2.4 拟南芥阳性转基因植株的筛选与鉴定 | 第45-46页 |
| 3.3 结果与分析 | 第46-51页 |
| 3.3.1 表达载体PCA13BarPAtEMS1-EMS1的构建 | 第46-49页 |
| 3.3.2 拟南芥阳性转基因植株的获得 | 第49-50页 |
| 3.3.3 拟南芥阳性转基因植株基因型鉴定 | 第50页 |
| 3.3.4 拟南芥阳性转基因植株是否恢复育性鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第51-53页 |
| 第4章 BoEMS1基因控制甘蓝雄性不育的研究 | 第53-77页 |
| 4.1 试验材料与用具 | 第53-55页 |
| 4.1.1 供试植物材料 | 第53页 |
| 4.1.2 菌株与载体质粒 | 第53页 |
| 4.1.3 试验试剂 | 第53页 |
| 4.1.4 试验主要溶液与培养基配方 | 第53-54页 |
| 4.1.5 试验主要仪器 | 第54页 |
| 4.1.6 试验引物 | 第54-55页 |
| 4.2 试验方法 | 第55-59页 |
| 4.2.1 表达载体的构建 | 第55-56页 |
| 4.2.2表达载体质粒转化农杆菌EHA105 | 第56-57页 |
| 4.2.3 农杆菌介导甘蓝遗传转化 | 第57-58页 |
| 4.2.4 阳性转基因植株的筛选与鉴定 | 第58页 |
| 4.2.5 阳性转基因植株育性与亲和性鉴定 | 第58-59页 |
| 4.3 结果与分析 | 第59-74页 |
| 4.3.1 载体的构建 | 第59-63页 |
| 4.3.2 RNAi干扰、敲除T0代转基因植株的获得 | 第63-64页 |
| 4.3.3 CRISPR/Cas9敲除甘蓝BoEMS、BoSRK基因突变体分析 | 第64-69页 |
| 4.3.4 RNAi干扰阳性转基因植株育性与亲和性鉴定 | 第69-74页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第74-77页 |
| 第5章 BoDAD基因控制甘蓝雄性不育的研究 | 第77-93页 |
| 5.1 试验材料与用具 | 第77-78页 |
| 5.2 试验方法 | 第78-80页 |
| 5.2.1 表达载体的构建 | 第78页 |
| 5.2.2 农杆菌介导甘蓝的遗传转化 | 第78页 |
| 5.2.3 阳性转基因植株的筛选与鉴定 | 第78页 |
| 5.2.4 阳性转基因植株的RealTimePCR荧光定量分析 | 第78-80页 |
| 5.2.5 阳性转基因植株育性与亲和性的鉴定 | 第80页 |
| 5.3 结果与分析 | 第80-91页 |
| 5.3.1 表达载体的构建 | 第80-83页 |
| 5.3.2 RNAi干扰、CRISPR/Cas9敲除T0代转基因植株的获得 | 第83-84页 |
| 5.3.3 CRISPR/Cas9敲除甘蓝BoDAD、BoSRKT0代基因突变体分析 | 第84-87页 |
| 5.3.4 PCA13BariDAD/iSRK转基因植株各基因的表达分析 | 第87-88页 |
| 5.3.5 PCA13BariDAD/iSRK转基因植株育性与亲和性分析 | 第88-91页 |
| 5.4 结论与讨论 | 第91-93页 |
| 第6章 总结与后续研究 | 第93-95页 |
| 6.1 结论 | 第93页 |
| 6.2 创新点 | 第93页 |
| 6.3 后续待研究 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-109页 |
| 附录 | 第109-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 在学期间所发表的文章、参研项目 | 第113页 |
