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狐狸毛色基因TYR、CBD103、MITF启动子活性探究

缩略词第4-5页
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 绪论第12-22页
    1.1 毛色遗传研究现状第12-13页
    1.2 TYR基因研究现状第13-16页
        1.2.1 TYR基因的结构与功能第13-14页
        1.2.2 TYR基因与毛色关系的研究现状第14-16页
    1.3 MITF基因研究现状第16-17页
        1.3.1 MITF基因的结构和功能第16页
        1.3.2 MITF基因与毛色关系的研究现状第16-17页
    1.4 CBD103基因研究现状第17-18页
        1.4.1 CBD103基因的结构与功能第17-18页
        1.4.2 CBD103基因与毛色关系的研究现状第18页
    1.5 启动子的相关研究方法第18-20页
        1.5.1 真核生物的启动子第18-19页
        1.5.2 启动子的相关研究方法第19-20页
    1.6 转录因子结合位点的研究方法第20-21页
        1.6.1 真核生物的转录因子第20页
        1.6.2 转录因子结合位点的研究方法第20-21页
    1.7 本研究的主要内容及意义第21-22页
        1.7.1 本研究的主要内容第21页
        1.7.2 本研究的重要意义第21-22页
第二章 材料与方法第22-45页
    2.1 材料第22-27页
        2.1.1 北极狐DNA样品第22页
        2.1.2 菌株第22页
        2.1.3 质粒(载体)第22-24页
        2.1.4 细胞第24页
        2.1.5 主要试验试剂及配制第24-26页
        2.1.6 主要试验仪器设备第26-27页
        2.1.7 生物信息学分析软件第27页
    2.2 方法第27-45页
        2.2.1 北极狐基因组DNA提取第27-28页
        2.2.2 北极狐总RNA提取及反转录RNA第28-30页
        2.2.3 北极狐CBD103基因引物设计第30-31页
        2.2.4 北极狐MITF-M基因引物设计第31-33页
        2.2.5 北极狐TYR基因引物设计第33-34页
        2.2.6 PCR扩增第34-35页
        2.2.7 琼脂糖凝胶电泳检测第35-36页
        2.2.8 PCR产物的回收第36-37页
        2.2.9 PCR产物与克隆载体(T-VectorpMD18)连接第37页
        2.2.10 连接产物的转化第37页
        2.2.11 重组质粒的筛选第37-38页
        2.2.12 质粒的小量提取第38-39页
        2.2.13 重组质粒和pGL3-Basic质粒的双酶切及目的片段回收第39页
        2.2.14 报告基因载体的构建(pGL3-Basic-X)第39-40页
        2.2.15 阳性重组载体pGL3-Basic-X的无内毒素质粒大量提取第40-41页
        2.2.16 细胞培养第41-42页
        2.2.17 细胞瞬时转染第42-43页
        2.2.18 双荧光素酶报告基因活性鉴定第43-44页
        2.2.19 数据处理第44-45页
第三章 结果与分析第45-71页
    3.1 北极狐CBD103、MITF-M和TYR基因5′侧翼序列的生物信息学分析第45-53页
        3.1.1 CBD103基因5′侧翼序列的生物信息学分析第45-47页
        3.1.2 MITF-M基因5′侧翼序列的生物信息学分析第47-51页
        3.1.3 TYR基因5′侧翼序列的生物信息学分析第51-53页
    3.2 北极狐CBD103、MITF-M和TYR基因启动子缺失片段的扩增第53-55页
        3.2.1 CBD103基因启动子缺失片段的扩增第53-54页
        3.2.2 MITF-M基因启动子缺失片段的扩增第54-55页
        3.2.3 TYR基因启动子缺失片段的扩增第55页
    3.3 北极狐CBD103、MITF-M和TYR基因启动子缺失片段荧光素酶表达载体的构建第55-59页
        3.3.1 CBD103基因启动子缺失片段荧光素酶表达载体的构建第55-57页
        3.3.2 MITF-M基因启动子缺失片段荧光素酶表达载体的构建第57-58页
        3.3.3 TYR基因启动子缺失片段荧光素酶表达载体的构建第58-59页
    3.4 细胞培养第59页
    3.5 细胞转染及活性检测第59-63页
        3.5.1 最佳转染条件的摸索第59-60页
        3.5.2 北极狐CBD103、MITF-M和TYR基因启动子活性分析第60-63页
    3.6 北极狐CBD103、MITF-M和TYR基因启动子区转录因子结合位点的预测分析第63-64页
    3.7 北极狐CBD103、MITF-M和TYR基因启动子区转录因子结合位点突变体活性分析第64-71页
        3.7.1 CBD103基因启动子区转录因子结合位点突变体活性分析第64-66页
        3.7.2 MITF-M基因启动子区转录因子结合位点突变体活性分析第66-68页
        3.7.3 TYR基因启动子区转录因子结合位点突变体活性分析第68-71页
第四章 讨论第71-77页
    4.1 实验方法讨论第71-72页
    4.2 实验结果讨论第72-77页
        4.2.1 CBD103基因启动子活性区分析第72-73页
        4.2.2 MITF-M基因启动子活性区分析第73-75页
        4.2.3 TYR基因启动子活性区分析第75-77页
第五章 结论第77-78页
参考文献第78-84页
发表论文和参加科研情况说明第84-85页
致谢第85页

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