| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 大豆花叶病毒研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1.1 病毒属性 | 第13页 |
| 1.1.2 分布与传播 | 第13-14页 |
| 1.1.3 发病症状与危害 | 第14-15页 |
| 1.1.4 防治措施 | 第15-16页 |
| 1.2 大豆基因工程技术研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.1 在抗病育种上的应用 | 第16-17页 |
| 1.2.2 在抗病育种上的优势 | 第17页 |
| 1.3 MAPK级联途径研究进展 | 第17-23页 |
| 1.3.1 MAPK级联途径反应机制 | 第18页 |
| 1.3.2 MAPK级联途径基本成员 | 第18-20页 |
| 1.3.3 MAPK级联途径生物学功能 | 第20-23页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 转GmMAPKKK基因植株的鉴定 | 第24-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 供试植株 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 草丁膦涂抹检测法 | 第25页 |
| 2.2.2 Bar试纸条检测法 | 第25-26页 |
| 2.2.3 PCR检测法 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-30页 |
| 2.3.1 草丁膦检测法鉴定T_2代转GmMAPKKK基因植株结果 | 第28-29页 |
| 2.3.2 bar试纸条检测法鉴定T_2代转GmMAPKKK基因植株结果 | 第29页 |
| 2.3.3 PCR检测法鉴定T_2代转GmMAPKKK基因植株结果 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-35页 |
| 2.4.1 转基因植株筛选标记比较 | 第30-32页 |
| 2.4.2 转基因植株鉴定方法比较 | 第32-35页 |
| 3 转GmMAPKKK植株基因分析 | 第35-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.1 供试植株 | 第35页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 GmMAPKKK基因系统进化树和同源性比对 | 第35-36页 |
| 3.2.2 T_2代转基因植株GmMAPKKK基因表达量测定 | 第36-39页 |
| 3.2.3 T_2代转GmMAPKKK基因植株MAPK激酶活性测定 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-44页 |
| 3.3.1 GmMAPKKK基因系统进化树和同源性比对结果 | 第40-42页 |
| 3.3.2 T_2代不同独立转基因GmMAPKKK株系基因表达量分析 | 第42-43页 |
| 3.3.3 MAPK激酶活性测定结果 | 第43-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-45页 |
| 3.4.1 不同株系间超表达GmMAPKKK基因情况分析 | 第44页 |
| 3.4.2 超表达GmMAPKKK与MAPK激酶活性分析 | 第44-45页 |
| 4 GmMAPKKK基因功能研究 | 第45-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 供试植株 | 第45页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第45-46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-51页 |
| 4.2.1 T_2代转GmMAPKKK基因植株大豆花叶病毒接种和抗性测定 | 第46-47页 |
| 4.2.2 SMV接种后转基因植株GmMAPKKK基因相对表达量检测 | 第47-48页 |
| 4.2.3 SMV接种后转基因植株防御基因相对表达量检测 | 第48-49页 |
| 4.2.4 SMV接种后转基因植株ROS相关基因表达量分析及生理测定 | 第49-51页 |
| 4.3 结果与分析 | 第51-59页 |
| 4.3.1 SMV接种后感病情况及DAS-ELISA检测结果 | 第51-53页 |
| 4.3.2 SMV接种后转基因植株GmMAPKKK基因半定量及荧光定量结果 | 第53-55页 |
| 4.3.3 SMV接种后转基因植株防御基因半定量及荧光定量结果 | 第55-57页 |
| 4.3.4 SMV接种后转基因植株ROS测定结果 | 第57-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-64页 |
| 4.4.1 超表达GmMAPKKK与SMV抗性分析 | 第59-61页 |
| 4.4.2 超表达GmMAPKKK与防御基因表达分析 | 第61-62页 |
| 4.4.3 超表达GmMAPKKK与ROS系统互作分析 | 第62-64页 |
| 5 结论与展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
