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M2巨噬细胞分化为破骨细胞的机制研究

中文摘要第5-7页
abstract第7-8页
前言第13-15页
第一章 材料方法第15-24页
    1.1 实验材料第15-17页
        1.1.1 血清与培养基第15页
        1.1.2 常用试剂第15页
        1.1.3 实验动物第15页
        1.1.4 蛋白、抗体及抑制剂第15-16页
        1.1.5 相关试剂盒第16页
        1.1.6 实验耗材与仪器设备第16页
        1.1.7 引物第16-17页
    1.2 实验方法第17-24页
        1.2.1 健康人外周血单个核细胞(PBMC)分离及单核细胞纯化第17-18页
        1.2.2 人单核细胞来源的巨噬细胞的分化第18页
        1.2.3 小鼠骨髓来源的巨噬细胞分化第18页
        1.2.4 细胞培养第18-19页
        1.2.5 流式细胞术第19页
        1.2.6 TRAP染色第19页
        1.2.7 RNA提取第19页
        1.2.8 RNA逆转录cDNA第19-20页
        1.2.9 实时荧光定量核酸扩增(Q-PCR)第20-21页
        1.2.10 TRITCPhalloidin罗丹明标记鬼笔环肽染色第21页
        1.2.11 骨细胞培养板检测骨吸收能力第21页
        1.2.12 胶原蛋白诱导的关节炎(CIA)小鼠模型第21页
        1.2.13 免疫组化第21-22页
        1.2.14 单克隆抗体的制备、纯化与鉴定第22-24页
第二章 人单核细胞来源的巨噬细胞及小鼠骨髓细胞来源的巨噬细胞的分化第24-29页
    2.1 人单核细胞的纯化第24-25页
    2.2 人单核来源的巨噬细胞的分化及鉴定第25-26页
        2.2.1 人单核来源的巨噬细胞的分化第25页
        2.2.2 人单核细胞来源的巨噬细胞的表型鉴定第25-26页
        2.2.3 人单核细胞来源的巨噬细胞的细胞因子鉴定第26页
    2.3 小鼠骨髓来源巨噬细胞的分化及鉴定第26-28页
        2.3.1 小鼠骨髓来源巨噬细胞的分化第27页
        2.3.2 小鼠骨髓来源巨噬细胞的表型鉴定第27-28页
    2.4 本章小结第28-29页
第三章 M-CSF+RANKL诱导M2细胞分化成破骨细胞第29-40页
    3.1 M-CSF+RANKL诱导人和小鼠M2巨噬细胞分化后TRAP染色第29-30页
    3.2 M-CSF+RANKL诱导人和小鼠M2巨噬细胞分化后Factin-ring染色第30-31页
    3.3 M-CSF+RANKL诱导人和小鼠M2巨噬细胞分化后破骨细胞相关标志分子变化情况第31-32页
    3.4 M-CSF+RANKL诱导人和小鼠M2巨噬细胞分化后骨吸收功能的鉴定第32-33页
    3.5 M0/M1/M2巨噬细胞RANK的表达第33页
    3.6 比较M0/M2巨噬细胞通过M-CSF+RANKL向破骨细胞分化的时间与剂量关系第33-37页
    3.7 不同分化方案获得的M2型巨噬细胞向破骨细胞分化的能力均高于其他巨噬细胞第37-38页
    3.8 本章小结第38-40页
第四章 CIA模型小鼠中M2巨噬细胞向破骨细胞分化第40-47页
    4.1 CIA小鼠模型建立及发病关节中CD206~+M2巨噬细胞浸润比例第40-42页
    4.2 CIA小鼠骨髓中M2巨噬细胞向破骨细胞分化第42-43页
    4.3 CIA小鼠发病关节中M2巨噬细胞向破骨细胞分化第43-45页
    4.4 本章小结第45-47页
第五章 M2巨噬细胞向破骨细胞分化的可能机制第47-53页
    5.1 M0/M1/M2巨噬细胞CD206的表达第47-48页
    5.2 CIA小鼠模型中M2巨噬细胞表型分析第48-49页
    5.3 人外周血单核细胞CD206~+的单核细胞向破骨细胞分化能力强于CD206~-的单核细胞第49-51页
    5.4 甘露糖阻断M2巨噬细胞向破骨细胞分化第51页
    5.5 本章小结第51-53页
第六章 LTF-IC诱导M2巨噬细胞分化成破骨细胞第53-68页
    6.1 乳铁蛋白单抗的制备第53-54页
    6.2 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化后TRAP染色第54-55页
    6.3 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化后Factin-ring染色第55-56页
    6.4 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化后破骨细胞相关标志分子变化情况第56-57页
    6.5 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化后骨吸收功能的鉴定第57-58页
    6.6 比较M0/M1/M2巨噬细胞在LTF-IC作用下向破骨细胞分化的时间与剂量关系第58-59页
    6.7 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化的机制研究第59-61页
    6.8 LTF-IC不能活化CD32a转基因小鼠M2巨噬细胞第61-66页
        6.8.1 CD32a转基因小鼠骨髓来源的M2巨噬细胞的分化与鉴定第61-62页
        6.8.2 LTF-IC处理CD32a转基因小鼠BMDM2后TRAP染色第62-63页
        6.8.3 LTF-IC处理CD32a转基因小鼠BMDM2后Factin-ring染色第63-64页
        6.8.4 LTF-IC处理CD32a转基因小鼠BMDM2后破骨细胞相关标志分子mRNA水平变化情况第64-65页
        6.8.5 LTF-IC处理CD32a转基因小鼠BMDM2后骨吸收功能的鉴定第65-66页
    6.9 本章小结第66-68页
第七章 讨论第68-74页
    7.1 人单核细胞来源以及小鼠骨髓细胞来源的巨噬细胞的分化及鉴定第68-69页
    7.2 M-CSF+RANKL诱导体外分化的M2巨噬细胞分化成破骨细胞第69-70页
    7.3 CD206高表达的M2巨噬细胞表现出更强的向破骨细胞分化能力第70-71页
    7.4 LTF-IC诱导M2型巨噬细胞分化成破骨细胞第71-72页
    7.5 总结第72-74页
文献综述第74-83页
参考文献第83-92页
英文缩略词第92-94页
个人简历第94-95页
致谢第95-96页

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