中文摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
前言 | 第13-15页 |
第一章 材料方法 | 第15-24页 |
1.1 实验材料 | 第15-17页 |
1.1.1 血清与培养基 | 第15页 |
1.1.2 常用试剂 | 第15页 |
1.1.3 实验动物 | 第15页 |
1.1.4 蛋白、抗体及抑制剂 | 第15-16页 |
1.1.5 相关试剂盒 | 第16页 |
1.1.6 实验耗材与仪器设备 | 第16页 |
1.1.7 引物 | 第16-17页 |
1.2 实验方法 | 第17-24页 |
1.2.1 健康人外周血单个核细胞(PBMC)分离及单核细胞纯化 | 第17-18页 |
1.2.2 人单核细胞来源的巨噬细胞的分化 | 第18页 |
1.2.3 小鼠骨髓来源的巨噬细胞分化 | 第18页 |
1.2.4 细胞培养 | 第18-19页 |
1.2.5 流式细胞术 | 第19页 |
1.2.6 TRAP染色 | 第19页 |
1.2.7 RNA提取 | 第19页 |
1.2.8 RNA逆转录cDNA | 第19-20页 |
1.2.9 实时荧光定量核酸扩增(Q-PCR) | 第20-21页 |
1.2.10 TRITCPhalloidin罗丹明标记鬼笔环肽染色 | 第21页 |
1.2.11 骨细胞培养板检测骨吸收能力 | 第21页 |
1.2.12 胶原蛋白诱导的关节炎(CIA)小鼠模型 | 第21页 |
1.2.13 免疫组化 | 第21-22页 |
1.2.14 单克隆抗体的制备、纯化与鉴定 | 第22-24页 |
第二章 人单核细胞来源的巨噬细胞及小鼠骨髓细胞来源的巨噬细胞的分化 | 第24-29页 |
2.1 人单核细胞的纯化 | 第24-25页 |
2.2 人单核来源的巨噬细胞的分化及鉴定 | 第25-26页 |
2.2.1 人单核来源的巨噬细胞的分化 | 第25页 |
2.2.2 人单核细胞来源的巨噬细胞的表型鉴定 | 第25-26页 |
2.2.3 人单核细胞来源的巨噬细胞的细胞因子鉴定 | 第26页 |
2.3 小鼠骨髓来源巨噬细胞的分化及鉴定 | 第26-28页 |
2.3.1 小鼠骨髓来源巨噬细胞的分化 | 第27页 |
2.3.2 小鼠骨髓来源巨噬细胞的表型鉴定 | 第27-28页 |
2.4 本章小结 | 第28-29页 |
第三章 M-CSF+RANKL诱导M2细胞分化成破骨细胞 | 第29-40页 |
3.1 M-CSF+RANKL诱导人和小鼠M2巨噬细胞分化后TRAP染色 | 第29-30页 |
3.2 M-CSF+RANKL诱导人和小鼠M2巨噬细胞分化后Factin-ring染色 | 第30-31页 |
3.3 M-CSF+RANKL诱导人和小鼠M2巨噬细胞分化后破骨细胞相关标志分子变化情况 | 第31-32页 |
3.4 M-CSF+RANKL诱导人和小鼠M2巨噬细胞分化后骨吸收功能的鉴定 | 第32-33页 |
3.5 M0/M1/M2巨噬细胞RANK的表达 | 第33页 |
3.6 比较M0/M2巨噬细胞通过M-CSF+RANKL向破骨细胞分化的时间与剂量关系 | 第33-37页 |
3.7 不同分化方案获得的M2型巨噬细胞向破骨细胞分化的能力均高于其他巨噬细胞 | 第37-38页 |
3.8 本章小结 | 第38-40页 |
第四章 CIA模型小鼠中M2巨噬细胞向破骨细胞分化 | 第40-47页 |
4.1 CIA小鼠模型建立及发病关节中CD206~+M2巨噬细胞浸润比例 | 第40-42页 |
4.2 CIA小鼠骨髓中M2巨噬细胞向破骨细胞分化 | 第42-43页 |
4.3 CIA小鼠发病关节中M2巨噬细胞向破骨细胞分化 | 第43-45页 |
4.4 本章小结 | 第45-47页 |
第五章 M2巨噬细胞向破骨细胞分化的可能机制 | 第47-53页 |
5.1 M0/M1/M2巨噬细胞CD206的表达 | 第47-48页 |
5.2 CIA小鼠模型中M2巨噬细胞表型分析 | 第48-49页 |
5.3 人外周血单核细胞CD206~+的单核细胞向破骨细胞分化能力强于CD206~-的单核细胞 | 第49-51页 |
5.4 甘露糖阻断M2巨噬细胞向破骨细胞分化 | 第51页 |
5.5 本章小结 | 第51-53页 |
第六章 LTF-IC诱导M2巨噬细胞分化成破骨细胞 | 第53-68页 |
6.1 乳铁蛋白单抗的制备 | 第53-54页 |
6.2 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化后TRAP染色 | 第54-55页 |
6.3 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化后Factin-ring染色 | 第55-56页 |
6.4 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化后破骨细胞相关标志分子变化情况 | 第56-57页 |
6.5 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化后骨吸收功能的鉴定 | 第57-58页 |
6.6 比较M0/M1/M2巨噬细胞在LTF-IC作用下向破骨细胞分化的时间与剂量关系 | 第58-59页 |
6.7 LTF-IC诱导人M2巨噬细胞分化的机制研究 | 第59-61页 |
6.8 LTF-IC不能活化CD32a转基因小鼠M2巨噬细胞 | 第61-66页 |
6.8.1 CD32a转基因小鼠骨髓来源的M2巨噬细胞的分化与鉴定 | 第61-62页 |
6.8.2 LTF-IC处理CD32a转基因小鼠BMDM2后TRAP染色 | 第62-63页 |
6.8.3 LTF-IC处理CD32a转基因小鼠BMDM2后Factin-ring染色 | 第63-64页 |
6.8.4 LTF-IC处理CD32a转基因小鼠BMDM2后破骨细胞相关标志分子mRNA水平变化情况 | 第64-65页 |
6.8.5 LTF-IC处理CD32a转基因小鼠BMDM2后骨吸收功能的鉴定 | 第65-66页 |
6.9 本章小结 | 第66-68页 |
第七章 讨论 | 第68-74页 |
7.1 人单核细胞来源以及小鼠骨髓细胞来源的巨噬细胞的分化及鉴定 | 第68-69页 |
7.2 M-CSF+RANKL诱导体外分化的M2巨噬细胞分化成破骨细胞 | 第69-70页 |
7.3 CD206高表达的M2巨噬细胞表现出更强的向破骨细胞分化能力 | 第70-71页 |
7.4 LTF-IC诱导M2型巨噬细胞分化成破骨细胞 | 第71-72页 |
7.5 总结 | 第72-74页 |
文献综述 | 第74-83页 |
参考文献 | 第83-92页 |
英文缩略词 | 第92-94页 |
个人简历 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-96页 |