| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1.1 铁素营养对植物的重要性 | 第9页 |
| 1.2 铁元素对果树的重要性 | 第9-10页 |
| 1.3 高等植物的铁吸收机理 | 第10-12页 |
| 1.3.1 机理Ⅰ植物铁吸收的分子生理机制 | 第10页 |
| 1.3.2 机理Ⅱ植物铁吸收的分子生理机制 | 第10-11页 |
| 1.3.3 可能的机理Ⅲ植物铁吸收的分子生理机制 | 第11-12页 |
| 1.4 机理Ⅰ植物中铁吸收相关基因 | 第12-13页 |
| 1.4.1 质膜H~+-ATPase家族基因 | 第12页 |
| 1.4.2 Fe(Ⅲ)螯合物还原酶家族基因——FRO基因 | 第12-13页 |
| 1.4.3 IRT1基因在机理Ⅰ植物中的作用 | 第13页 |
| 1.5 缺铁应答中关键转录因子 | 第13-15页 |
| 1.6 TATA-box结合蛋白(TBP) | 第15页 |
| 1.7 缺铁应答反应中信号研究 | 第15-16页 |
| 1.8 NO对蛋白的翻译后修饰作用 | 第16-18页 |
| 1.8.1 蛋白质巯基的亚硝基化修饰 | 第17页 |
| 1.8.2 蛋白质巯基的亚硝基化的理论研究 | 第17-18页 |
| 1.9 研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 第二章 TATA-box上游调控途径的研究 | 第19-32页 |
| 2.1. 材料与方法 | 第19-20页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 试验处理 | 第19页 |
| 2.1.3 试验药剂 | 第19-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 酵母单杂交筛选转录因子 | 第20-24页 |
| 2.2.2 凝胶迁移实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)验证转录因子 | 第24-26页 |
| 2.2.3 IRT1基因和转录因子在小金海棠和山定子缺铁根部的定量表达 | 第26页 |
| 2.2.4 数据统计分析 | 第26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-30页 |
| 2.3.1 小金海棠TATA-box binding protein (TBP)的筛选 | 第26-27页 |
| 2.3.2 酵母单杂交筛选转录因子 | 第27-28页 |
| 2.3.3 EMSA验证转录因子 | 第28-29页 |
| 2.3.4 TFIID与IRT1关系分析 | 第29-30页 |
| 2.4. 讨论 | 第30-31页 |
| 2.4.1 TATA-box元件插入是一种新的基因进化方式 | 第30-31页 |
| 2.4.2 基因标记辅助预选 | 第31页 |
| 2.5. 结论 | 第31-32页 |
| 第三章 IRT1基因亚硝基化分化节点的研究 | 第32-58页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第32页 |
| 3.1.2 试验药剂 | 第32页 |
| 3.2 试验方法 | 第32-44页 |
| 3.2.1 苹果,番茄,拟南芥IRT1基因亚硝基化位点与进化关系 | 第32-33页 |
| 3.2.2 小金海棠和山定子缺铁外施处理及根部总蛋白的获得 | 第33页 |
| 3.2.3 小金海棠和山定子根部总蛋白亚硝基化程度检测 | 第33-34页 |
| 3.2.4 亚硝基化位点分析 | 第34页 |
| 3.2.5 拟南芥,苹果,番茄IRT1基因全长的获得及亚硝基化位点定点突变 | 第34-39页 |
| 3.2.6 转化拟南芥irt1-1突变体 | 第39-40页 |
| 3.2.7 纯合体转化植株的筛选,获得以及根系铁活体染色 | 第40-41页 |
| 3.2.8 IRT1蛋白体外诱导 | 第41-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-56页 |
| 3.3.1 苹果,番茄,拟南芥IRT1基因亚硝基化位点与进化关系 | 第44-48页 |
| 3.3.2 小金海棠、山定子根部NO荧光观测 | 第48-49页 |
| 3.3.3 Western Blot验证亚硝基化结果 | 第49-50页 |
| 3.3.4 IRT1蛋白亚硝基化位点预测 | 第50页 |
| 3.3.5 拟南芥,番茄,小金海棠IRT1基因全长序列的获得 | 第50-51页 |
| 3.3.6 拟南芥、苹果、番茄IRT1基因定点突变 | 第51-52页 |
| 3.3.7 表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 3.3.8 纯合体转化植株的筛选以及后代根系铁活体染色 | 第53-55页 |
| 3.3.9 IRT1蛋白体外诱导结果 | 第55-56页 |
| 3.4. 讨论 | 第56-57页 |
| 3.4.1 膜蛋白IRT1蛋白的体外诱导 | 第56-57页 |
| 3.4.2 IRT1基因进化关系 | 第57页 |
| 3.5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |
| 个人简历 | 第68页 |
