| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第9-14页 |
| 1.1 当今国内大豆状况 | 第9-10页 |
| 1.2 MiRNA起源与合成途径 | 第10-11页 |
| 1.3 研究MicroRNA的方法 | 第11页 |
| 1.4 MicroRNA与逆境胁迫 | 第11-12页 |
| 1.5 miR398家族基因的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第13-14页 |
| 第二章 材料和方法 | 第14-29页 |
| 2.1 研究材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第14页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第14页 |
| 2.1.3 酶和化学试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第15-16页 |
| 2.1.5 引物信息 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-29页 |
| 2.2.15 种逆境胁迫下Gma-miR398家族基因和靶基因TC452415的定量分析 | 第16-20页 |
| 2.2.2 Gma-miR398家族靶基因的预测及靶位点验证 | 第20-23页 |
| 2.2.3 Gma-miR398家族基因表达载体的构建及农杆菌转化 | 第23-24页 |
| 2.2.4 Gma-miR398s前体基因转化拟南芥及功能鉴定 | 第24-27页 |
| 2.2.5 TC452415基因烟草亚细胞定位 | 第27-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-44页 |
| 3.1 不同逆境胁迫处理下Gma-miR398家族基因的表达量分析 | 第29-31页 |
| 3.1.1 大豆水培 | 第29页 |
| 3.1.2 大豆样本的总RNA提取 | 第29-30页 |
| 3.1.3 大豆mi R398家族前体基因定量分析 | 第30-31页 |
| 3.2 Gma-miR398s基因的靶基因预测与功能分析 | 第31-33页 |
| 3.2.1 Gma-miR398s基因的靶基因预测 | 第31页 |
| 3.2.2 靶基因剪切位点验证 | 第31-32页 |
| 3.2.3 逆境胁迫处理下靶基因TC452415表达量分析 | 第32-33页 |
| 3.3 靶基因TC452415亚细胞定位 | 第33-35页 |
| 3.3.1 构建pCAMBIA1302-TC452415载体 | 第33页 |
| 3.3.2 pCAMBIA1302-TC452415重组质粒转化农杆菌 | 第33-35页 |
| 3.4 Gma-miR398s植物表达载体的构建及拟南芥转化 | 第35-38页 |
| 3.4.1 植物表达载体构建 | 第35-37页 |
| 3.4.2 重组质粒转化农杆菌 | 第37-38页 |
| 3.5 Gma-miR398家族基因转化拟南芥的研究 | 第38-44页 |
| 3.5.1 Gma-miR398家族前体基因转化拟南芥及基因组PCR鉴定 | 第38-40页 |
| 3.5.2 转基因拟南芥的表型分析 | 第40-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-46页 |
| 4.1 植物逆境胁迫下miRNA的表达量变化 | 第44页 |
| 4.2 靶基因TC452415的鉴定与亚细胞定位分析 | 第44-45页 |
| 4.3 拟南芥的遗传转化和表型分析 | 第45-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 作者简介 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
