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基于蛋白质组学策略的脓毒症生物标志物研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-11页
目录第12-15页
英文缩略语第15-17页
技术路线第17-21页
前言第21-26页
第一章 采用iTRAQ串联质谱蛋白质组学技术筛选脓毒症大鼠血清差异表达蛋白第26-52页
    1. 材料第27-28页
        1.1 实验动物第27页
        1.2 主要材料与试剂第27页
        1.3 主要仪器第27-28页
    2. 方法第28-32页
        2.1 动物饲养第28页
        2.2 大鼠CLP模型建立及分组第28页
        2.3 获取大鼠血清样本第28页
        2.4 去高丰度蛋白第28-29页
        2.5 血清蛋白定量第29页
        2.6 蛋白酶解第29-30页
        2.7 肽段标记第30页
        2.8 肽段的两维nano-HPLC色谱分离第30页
        2.9 质谱检测第30-31页
        2.10 Mascot搜索第31-32页
        2.11 蛋白的定量分析第32页
        2.12 统计学处理第32页
    3. 实验结果第32-49页
        3.1 大鼠CLP模型的复制及存活率的观察第32-33页
        3.2 iTRAQ串联质谱筛选各组差异表达蛋白第33-49页
            3.2.1 蛋白质定量第33-34页
            3.2.2 聚类分析第34页
            3.2.3 Pathway分析第34-44页
            3.2.4 CLP组与假手术组差异表达蛋白第44-47页
            3.2.5 CLP存活组与死亡组差异表达蛋白第47-49页
    4. 分析与讨论第49-51页
    5. 小结第51-52页
第二章 脓毒症大鼠血清生物标志物的筛选及诊断、预后预测模型的建立第52-72页
    1. 材料第53页
        1.1 主要材料与试剂第53页
        1.2 主要仪器第53页
    2. 方法第53-54页
        2.1 PBS缓冲液的配制第53页
        2.2 血清样本稀释第53页
        2.3 酶联免疫吸附实验(enzyme linked immuno-sorbent assay,ELISA)第53-54页
        2.4 统计学处理第54页
    3. 实验结果第54-69页
        3.1 25个差异表达蛋白的ELISA结果第54-60页
        3.2 脓毒症诊断有关生物标志物的筛选第60-64页
            3.2.1 假手术组和脓毒症组之间差异表达蛋白的ELISA分析第60-62页
            3.2.2 脓毒症大鼠诊断模型的建立第62-64页
        3.3 脓毒症预后预测有关生物标志物的筛选第64-69页
            3.3.1 脓毒症存活组与死亡组之间差异表达蛋白的ELISA分析第64-66页
            3.3.2 脓毒症大鼠预后预测模型的建立第66-69页
    4. 分析与讨论第69-71页
    5. 小结第71-72页
第三章 血清正五聚蛋白3在脓毒症患者的诊断和预后预测中的作用第72-83页
    1. 材料第73页
        1.1 主要材料与试剂第73页
        1.2 主要仪器第73页
    2 方法第73-75页
        2.1 临床资料第73-74页
        2.2 血清样本的收集第74页
        2.3 PBS缓冲液的配制第74页
        2.4 血清样本稀释第74页
        2.5 酶联免疫吸附实验(enzyme linked immuno-sorbent assay,ELISA)第74-75页
        2.6 统计学处理第75页
    3. 实验结果第75-81页
        3.1 临床资料分析第75-76页
        3.2 患者APACHEⅡ评分分析和血清PTX3、CRP和PCT浓度第76页
        3.3 APACHEⅡ评分和血清PTX3、CRP和PCT浓度对脓毒症诊断的ROC曲线分析第76-77页
        3.4 APACHEⅡ评分和血清PTX3、CRP和PCT浓度对脓毒症预后预测的ROC曲线分析第77-81页
    4. 分析与讨论第81-82页
    5. 小结第82-83页
第四章 结论第83-84页
参考文献第84-91页
攻读学位期间主要的研究成果第91-92页
综述一第92-102页
    参考文献第98-102页
综述二第102-116页
    参考文献第111-116页
致谢第116页

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