| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1.1 结核病史 | 第9页 |
| 1.2 结核病现状 | 第9-11页 |
| 1.3 结核分支杆菌 | 第11-12页 |
| 1.4 保守蛋白 | 第12页 |
| 1.5 蛋白的分离纯化 | 第12-15页 |
| 1.6 蛋白质晶体 | 第15-17页 |
| 1.6.1 蛋白质结晶原理 | 第15页 |
| 1.6.2 蛋白结晶的方法 | 第15-16页 |
| 1.6.3 蛋白质结晶的条件 | 第16-17页 |
| 1.6.4 蛋白晶体衍射分析 | 第17页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-23页 |
| 2.1.1 菌株、质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.4 相关溶液及其配制 | 第19-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 2.2.2 结核分枝杆菌基因组的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第25页 |
| 2.2.4 Rv3899c基因的PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.5 Rv3899c原核表达载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.2.6 蛋白Rv3899c的表达 | 第28-30页 |
| 2.2.7 蛋白Rv3899c的纯化 | 第30-32页 |
| 2.2.8 目的蛋白的晶体生长及初步优化 | 第32页 |
| 2.2.9 蛋白晶体的X射线初步衍射 | 第32-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-47页 |
| 3.1 生物信息学分析 | 第34-38页 |
| 3.1.1 Rv3899c基因酶切位点分析 | 第34页 |
| 3.1.2 蛋白Rv3899c氨基酸序列基本性质分析 | 第34-35页 |
| 3.1.3 蛋白Rv3899c信号肽预测 | 第35-36页 |
| 3.1.4 蛋白Rv3899c跨膜区的预测 | 第36页 |
| 3.1.5 蛋白Rv3899c结构域的预测 | 第36-37页 |
| 3.1.6 蛋白Rv3899c二级结构的预测 | 第37-38页 |
| 3.2 结核分枝杆菌基因组的提取 | 第38页 |
| 3.3 Rv3899c基因的PCR扩增 | 第38-39页 |
| 3.4 Rv3899c基因表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.5 Rv3899c重组载体测序验证 | 第40-41页 |
| 3.6 重组蛋白的表达纯化 | 第41-45页 |
| 3.6.1 蛋白Rv3899c的试表达 | 第41-42页 |
| 3.6.2 蛋白Rv3899c的Western blot验证 | 第42-43页 |
| 3.6.3 蛋白Rv3899c的Ni-NTA亲和层析柱纯化 | 第43页 |
| 3.6.4 蛋白Rv3899c的凝胶过滤层析纯化 | 第43-44页 |
| 3.6.5 蛋白浓度的测定 | 第44-45页 |
| 3.7 目的蛋白Rv3899c的结晶实验 | 第45-46页 |
| 3.8 晶体的初步衍射 | 第46-47页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第47-49页 |
| 4.1 讨论 | 第47页 |
| 4.2 结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-57页 |
