| 致谢 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-12页 |
| Abstract | 第12-17页 |
| 论文创新点 | 第18-19页 |
| 缩略词表 | 第19-21页 |
| 目次 | 第21-23页 |
| 引言 | 第23-26页 |
| 实验仪器和材料 | 第26-30页 |
| 1 仪器 | 第26页 |
| 2 主要实验材料及配制 | 第26-28页 |
| 2.1 试剂、抗体及耗材 | 第26-27页 |
| 2.2 常用液体配制 | 第27-28页 |
| 3 实验动物与细胞株 | 第28-30页 |
| 实验方法 | 第30-36页 |
| 1 细胞培养 | 第30-31页 |
| 1.1 ES细胞支持培养 | 第30-31页 |
| 1.2 小鼠ES细胞体外分化为心肌细胞 | 第31页 |
| 2 PP242最适浓度的选择 | 第31-32页 |
| 3 Rictor shRNA和Raptor shRNA慢病毒表达载体构建及慢病毒包装、转染 | 第32页 |
| 4 小鼠ES细胞体外定向分化为心肌细胞分化率统计 | 第32-33页 |
| 5 免疫荧光法检测心肌特异性蛋白α-Actinin表达以及Cx43、N-cadherin、Desmoplakin的表达 | 第33页 |
| 6 流式细胞术定量检测ES细胞体外定向分化的心肌细胞数量 | 第33页 |
| 7 Western Blot | 第33-34页 |
| 7.1 总蛋白提取 | 第33-34页 |
| 7.2 蛋白质印迹 | 第34页 |
| 8 ES衍生的心肌细胞的纯化 | 第34页 |
| 9 膜片钳记录干扰Rictor的ES衍生的心肌细胞的电生理学特点 | 第34-35页 |
| 10 数据分析 | 第35-36页 |
| 第一部分 Rictor/mTORC2介导小鼠ES细胞体外定向分化为心肌细胞的作用研究 | 第36-51页 |
| 1 实验结果 | 第36-49页 |
| 1.1 PP242对小鼠ES细胞体外定向分化为心肌细胞作用研究 | 第36-38页 |
| 1.2 shRNA-Rictor对小鼠ES细胞体外定向分化为心肌细胞的影响 | 第38-49页 |
| 1.2.1 干扰Rictor和干扰Raptor对小鼠ES细胞体外定向心肌分化的影响 | 第38-40页 |
| 1.2.2 Western blot检测干扰Rictor和干扰Raptor对小鼠ES细胞定向心肌分化相关蛋白表达的影响 | 第40-45页 |
| 1.2.3 Raptor/mTORC1和Rictor/mTORC2在介导心肌分化中的关系 | 第45-49页 |
| 2 讨论 | 第49-50页 |
| 3 小结 | 第50-51页 |
| 第二部分 Rictor/mTORC2在小鼠ES细胞定向分化为心肌细胞的功能研究 | 第51-63页 |
| 1 实验结果 | 第51-59页 |
| 1.1 Western Blot检测小鼠ES细胞体外定向分化的心肌细胞中Rictor/mTORC2与细胞连接蛋白的关系 | 第51-52页 |
| 1.2 免疫荧光技术检测干扰Rictor对心肌细胞连接蛋白表达和分布的影 | 第52-55页 |
| 1.3 膜片钳技术考察小鼠ES细胞衍生心肌细胞中干扰Rictor后的电生理学特点 | 第55-59页 |
| 2 讨论 | 第59-62页 |
| 3 小结 | 第62-63页 |
| 总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 文献综述 Rictor/mTORC2在心血管形成和疾病发生中的作用研究进展 | 第72-82页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第82-84页 |
