摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第10-13页 |
英文缩略词表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-19页 |
第二章 实验材料及溶液配制 | 第19-24页 |
2.1 实验用细胞和质粒构建 | 第19页 |
2.2 主要试剂和溶液配制 | 第19-22页 |
2.2.1 主要试剂 | 第19页 |
2.2.2 主要溶液配制 | 第19-22页 |
2.3 主要仪器 | 第22-24页 |
第三章 实验方法及统计分析 | 第24-37页 |
3.0 细胞复苏 | 第24页 |
3.1 细胞培养 | 第24页 |
3.2 细胞冻存 | 第24页 |
3.3 稳定表达细胞系的建立 | 第24-25页 |
3.4 细胞转染及荧光素酶报告基因实验 | 第25-26页 |
3.5 细胞总 RNA 的提取与逆转录 | 第26-27页 |
3.5.1 细胞总 RNA 的提取 | 第26页 |
3.5.2 琼脂糖凝胶电泳检测 RNA 的完整性 | 第26页 |
3.5.3 逆转录 | 第26-27页 |
3.6 Quantitative Real-Time PCR | 第27-28页 |
3.7 重组质粒的构建 | 第28-30页 |
3.7.1 载体和目的片段的酶切及连接 | 第28-29页 |
3.7.2 转化 | 第29-30页 |
3.8 大提质粒 | 第30-32页 |
3.9 Western Blot 分析 | 第32-34页 |
3.9.1 细胞核蛋白提取 | 第32页 |
3.9.2 Bradford 法测蛋白浓度 | 第32-33页 |
3.9.3 SDS-PAGE 电泳及 Western Blot | 第33-34页 |
3.10 MTT 细胞增殖分析 | 第34-35页 |
3.11 流式细胞分析 | 第35页 |
3.12 DAPI 染色法 | 第35-36页 |
3.14 统计学分析 | 第36-37页 |
第四章 实验结果 | 第37-52页 |
4.1 不同浓度胰岛素对细胞增殖的影响 | 第37-38页 |
4.2 不同浓度胰岛素对细胞周期的影响 | 第38-39页 |
4.3 不同浓度胰岛素对细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
4.4 GATA-6 和 PPARα对不同浓度胰岛素处理的细胞增殖、周期和凋亡的影响 | 第40-41页 |
4.5 不同浓度胰岛素处理对 cyclinD1 和 BAD 转录的影响 | 第41-44页 |
4.5.1 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 转录的影响 | 第41-42页 |
4.5.2 不同浓度胰岛素对 BAD 转录的影响 | 第42-44页 |
4.6 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 和 BAD mRNA 表达水平的影响 | 第44-46页 |
4.6.1 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 mRNA 表达水平的影响 | 第44-45页 |
4.6.2 不同浓度胰岛素对 BAD mRNA 表达水平的影响 | 第45-46页 |
4.7 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 和 BAD 蛋白表达水平的影响 | 第46-50页 |
4.7.1 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 蛋白表达的影响 | 第48页 |
4.7.2 不同浓度胰岛素对 BAD 蛋白表达的影响 | 第48-50页 |
4.8 小结 | 第50-52页 |
第五章 讨论 | 第52-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
个人简历 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |