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胰岛素诱导C2C12细胞增殖和凋亡的机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
目录第10-13页
英文缩略词表第13-14页
第一章 引言第14-19页
第二章 实验材料及溶液配制第19-24页
    2.1 实验用细胞和质粒构建第19页
    2.2 主要试剂和溶液配制第19-22页
        2.2.1 主要试剂第19页
        2.2.2 主要溶液配制第19-22页
    2.3 主要仪器第22-24页
第三章 实验方法及统计分析第24-37页
    3.0 细胞复苏第24页
    3.1 细胞培养第24页
    3.2 细胞冻存第24页
    3.3 稳定表达细胞系的建立第24-25页
    3.4 细胞转染及荧光素酶报告基因实验第25-26页
    3.5 细胞总 RNA 的提取与逆转录第26-27页
        3.5.1 细胞总 RNA 的提取第26页
        3.5.2 琼脂糖凝胶电泳检测 RNA 的完整性第26页
        3.5.3 逆转录第26-27页
    3.6 Quantitative Real-Time PCR第27-28页
    3.7 重组质粒的构建第28-30页
        3.7.1 载体和目的片段的酶切及连接第28-29页
        3.7.2 转化第29-30页
    3.8 大提质粒第30-32页
    3.9 Western Blot 分析第32-34页
        3.9.1 细胞核蛋白提取第32页
        3.9.2 Bradford 法测蛋白浓度第32-33页
        3.9.3 SDS-PAGE 电泳及 Western Blot第33-34页
    3.10 MTT 细胞增殖分析第34-35页
    3.11 流式细胞分析第35页
    3.12 DAPI 染色法第35-36页
    3.14 统计学分析第36-37页
第四章 实验结果第37-52页
    4.1 不同浓度胰岛素对细胞增殖的影响第37-38页
    4.2 不同浓度胰岛素对细胞周期的影响第38-39页
    4.3 不同浓度胰岛素对细胞凋亡的影响第39-40页
    4.4 GATA-6 和 PPARα对不同浓度胰岛素处理的细胞增殖、周期和凋亡的影响第40-41页
    4.5 不同浓度胰岛素处理对 cyclinD1 和 BAD 转录的影响第41-44页
        4.5.1 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 转录的影响第41-42页
        4.5.2 不同浓度胰岛素对 BAD 转录的影响第42-44页
    4.6 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 和 BAD mRNA 表达水平的影响第44-46页
        4.6.1 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 mRNA 表达水平的影响第44-45页
        4.6.2 不同浓度胰岛素对 BAD mRNA 表达水平的影响第45-46页
    4.7 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 和 BAD 蛋白表达水平的影响第46-50页
        4.7.1 不同浓度胰岛素对 cyclinD1 蛋白表达的影响第48页
        4.7.2 不同浓度胰岛素对 BAD 蛋白表达的影响第48-50页
    4.8 小结第50-52页
第五章 讨论第52-55页
参考文献第55-62页
个人简历第62-63页
致谢第63页

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