英文縮略词表 | 第4-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
1 前言 | 第15-32页 |
1.1 鸡新城疫(ND)概述 | 第15-19页 |
1.1.1 病原学 | 第15页 |
1.1.2 NDV的基因组与结构蛋白特征 | 第15-17页 |
1.1.2.1 NDV的基因组结构 | 第15-16页 |
1.1.2.2 NDV的结构蛋白特征 | 第16-17页 |
1.1.3 新城疫的流行特点 | 第17页 |
1.1.4 新城疫的临床症状 | 第17页 |
1.1.5 新城疫的病理变化 | 第17-18页 |
1.1.6 新城疫的诊断及检测方法 | 第18页 |
1.1.7 防制 | 第18页 |
1.1.7.1 加强饲养管理 | 第18页 |
1.1.7.2 做好消毒工作 | 第18页 |
1.1.7.3 免疫接种 | 第18页 |
1.1.8 发生新城疫的紧急措施 | 第18-19页 |
1.2 禽流感(Avain Influenza,AI)概述 | 第19-22页 |
1.2.1 病原学 | 第19页 |
1.2.2 流感病毒的遗传变异 | 第19-20页 |
1.2.2.1 抗原性变异 | 第19-20页 |
1.2.2.2 病毒基因组变异 | 第20页 |
1.2.3 禽流感流行特点 | 第20-21页 |
1.2.4 禽流感病的症状 | 第21页 |
1.2.5 禽流感在中国的流行 | 第21-22页 |
1.2.6 流感病毒传播 | 第22页 |
1.2.7 禽流感的防制 | 第22页 |
1.3 干扰素的概述 | 第22-29页 |
1.3.1 IFN的来源 | 第24页 |
1.3.2 IFN的特点 | 第24-25页 |
1.3.3 IFN的分类 | 第25页 |
1.3.4 IFN的作用 | 第25-26页 |
1.3.4.1 免疫调节作用 | 第25-26页 |
1.3.4.2 抗增生作用 | 第26页 |
1.3.4.3 抗病毒作用 | 第26页 |
1.3.4.4 抗纤维化作用 | 第26页 |
1.3.5 干扰素的其他应用 | 第26-29页 |
1.3.5.1 作为免疫佐剂对疫苗的免疫增效作用 | 第26-27页 |
1.3.5.2 重组鸡干扰素-γ(rChIFN-γ) | 第27页 |
1.3.5.3 干扰素的兽医临床应用 | 第27-28页 |
1.3.5.4 口腔黏膜途径给予IFN-α应用情况 | 第28-29页 |
1.4 胶体金检测技术 | 第29-31页 |
1.4.1 胶体金检测技术的原理 | 第29-30页 |
1.4.2 胶体金检测技术的功能 | 第30-31页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第31-32页 |
2 材料与方法 | 第32-49页 |
2.1 材料 | 第32-34页 |
2.1.1 样品与鸡胚 | 第32页 |
2.1.2 仪器 | 第32页 |
2.1.3 试验试剂及耗材 | 第32页 |
2.1.4 质粒及受体菌 | 第32-33页 |
2.1.5 试验所用溶液及其配制 | 第33-34页 |
2.2 试验方法 | 第34-49页 |
2.2.1 试验动物及实验场 | 第34页 |
2.2.2 试验动物分组 | 第34页 |
2.2.3 新城疫病毒的分离与增值 | 第34-35页 |
2.2.3.1 新城疫病毒的分离 | 第34-35页 |
2.2.3.2 新城疫病毒的增值 | 第35页 |
2.2.3.3 新城疫病毒效价的检测 | 第35页 |
2.2.4 RT-PCR技术检测样本中新城疫病毒 | 第35-40页 |
2.2.4.1 引物设计 | 第35页 |
2.2.4.2 样品中新城疫病毒mRNA的提取 | 第35-36页 |
2.2.4.3 新城疫病毒部分片段的RT-PCR扩增 | 第36-37页 |
2.2.4.4 ND部分片段PCR产物的纯化回收 | 第37页 |
2.2.4.5 目的基因的连接转化及鉴定 | 第37-40页 |
2.2.4.5.1 目的基因与pMD18-T载体的连接体系 | 第37-38页 |
2.2.4.5.2 大肠杆菌感受态细胞(E.coli DH5 α)的制备 | 第38页 |
2.2.4.5.3 连接产物转化 | 第38-39页 |
2.2.4.5.4 重组质粒DNA的提取 | 第39-40页 |
2.2.4.5.5 重组质粒的鉴定 | 第40页 |
2.2.4.5.6 阳性克隆序列的测序 | 第40页 |
2.2.5 新城疫病毒胶体金快速检测试验 | 第40-41页 |
2.2.5.1 测试步骤 | 第40页 |
2.2.5.2 检测流程图 | 第40-41页 |
2.2.6 禽流感H9病毒的分离与增值 | 第41页 |
2.2.6.1 禽流感H9病毒的分离 | 第41页 |
2.2.6.2 禽流感H9病毒的增值 | 第41页 |
2.2.6.3 禽流感H9病毒效价的检测 | 第41页 |
2.2.7 RT-PCR技术检测样本中禽流感H9病毒 | 第41-46页 |
2.2.7.1 引物设计 | 第41页 |
2.2.7.2 样品中禽流感H9病毒mRNA的提取 | 第41-42页 |
2.2.7.3 禽流感H9病毒部分片段的RT-PCR扩增 | 第42-43页 |
2.2.7.4 禽流感H9病毒部分片段PCR产物的纯化回收 | 第43-44页 |
2.2.7.5 目的基因的连接转化及鉴定 | 第44-46页 |
2.2.7.5.1 目的基因与pMD18-T载体的连接体系 | 第44页 |
2.2.7.5.2 连接产物转化 | 第44页 |
2.2.7.5.3 重组质粒DNA的提取 | 第44-45页 |
2.2.7.5.4 重组质粒的鉴定 | 第45-46页 |
2.2.7.5.5 阳性克隆序列的测序 | 第46页 |
2.2.8 禽流感病毒胶体金快速检测试验 | 第46页 |
2.2.8.1 测试步骤 | 第46页 |
2.2.8.2 检测流程图 | 第46页 |
2.2.9 干扰素免疫调节活性的检测 | 第46-49页 |
2.2.9.1 样品采集 | 第46页 |
2.2.9.2 新城疫和禽流感H9病毒在18、28、42日龄鸡体内的抗体水平的检测 | 第46-47页 |
2.2.9.3 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测样本中新城疫抗体的浓度 | 第47页 |
2.2.9.3.1 标准曲线的建立 | 第47页 |
2.2.9.3.2 样本的测定 | 第47页 |
2.2.9.4 免疫器官组织切片 | 第47-49页 |
2.2.9.5 肉鸡称重 | 第49页 |
3 试验结果 | 第49-58页 |
3.1 新城疫病毒的分离 | 第49页 |
3.2 新城疫病毒PCR检测结果 | 第49-50页 |
3.3 新城疫病毒胶体金试纸卡检测结果 | 第50页 |
3.4 禽流感H9病毒的分离 | 第50-51页 |
3.5 禽流感H9病毒PCR检测结果 | 第51-52页 |
3.6 禽流感H9病毒胶体金试纸卡检测结果 | 第52页 |
3.7 鸡用干扰素对商品肉鸡新城疫疫苗和禽流感疫苗抗体水平的影响 | 第52-54页 |
3.7.1 18、28、42日龄新城疫、禽流感血凝抑制抗体检测结果 | 第52-53页 |
3.7.2 不同种属干扰素对商品肉鸡新城疫疫苗和禽流感疫苗抗体水平的影响 | 第53-54页 |
3.8 酶联免疫吸附试验结果 | 第54-55页 |
3.8.1 鸡用干扰素在新城疫疫苗使用过程中免疫调节作用的检测 | 第54页 |
3.8.2 鸡用干扰素在禽流感H9病毒疫苗使用过程中免疫调节作用的检测 | 第54-55页 |
3.9 鸡用干扰素对肉鸡免疫器官的影响 | 第55-57页 |
3.9.1 鸡用干扰素对法氏囊组织的影响 | 第55页 |
3.9.2 鸡用干扰素对脾脏组织的影响 | 第55-56页 |
3.9.3 鸡用干扰素对胸腺组织的影响 | 第56-57页 |
3.10 肉鸡增重结果 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
硕士研究生期间发表的文章 | 第66页 |