| 中文摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 第一部分 龟鹿二仙胶通过抑制荷瘤小鼠肿瘤周围T细胞PD-1表达抑制肿瘤生长 | 第18-30页 |
| 一、材料与方法 | 第18-22页 |
| (一)实验材料 | 第18-19页 |
| 1 实验细胞 | 第18页 |
| 2 实验动物 | 第18页 |
| 3 实验药物 | 第18页 |
| 4 实验试剂 | 第18-19页 |
| 5 实验仪器及耗材 | 第19页 |
| 6 实验用溶液配制 | 第19页 |
| (二)实验方法 | 第19-22页 |
| 1 顺铂浓度梯度分组筛选 | 第19页 |
| 2 建立荷瘤小鼠模型 | 第19-20页 |
| 3 实验分组及给药 | 第20页 |
| 4 荷瘤小鼠瘤重检测 | 第20页 |
| 5 小鼠脾脏T淋巴细胞凋亡比例检测 | 第20-21页 |
| 6 流式细胞仪检测肿瘤浸润性T淋巴细胞中PD-1的比例 | 第21-22页 |
| 7 统计学方法 | 第22页 |
| 二、实验结果 | 第22-30页 |
| 第二部分 龟鹿二仙胶体外通过降低肿瘤细胞诱导的T细胞PD-1表达抑制其凋亡 | 第30-39页 |
| 一、材料与方法 | 第30-35页 |
| (一)实验材料 | 第30-35页 |
| 1 实验细胞及试剂 | 第30页 |
| 2 溶液配制 | 第30页 |
| 3 主要仪器及耗材 | 第30-31页 |
| 4 实验分组给药方式 | 第31页 |
| 5 引物设计 | 第31页 |
| 6 TGF-β1-siRNA转染复合物的制备 | 第31-35页 |
| 7 统计学方法 | 第35页 |
| 二、实验结果 | 第35-39页 |
| 第三部分 WesternBlot法检测体外培养的恶性肿瘤细胞经实验药物干预后细胞周围PD-1蛋白表达水平的影响 | 第39-45页 |
| 一、材料与方法 | 第39-43页 |
| (一)实验材料 | 第39-40页 |
| 1 实验所需的试剂 | 第39页 |
| 2 实验所需的抗体 | 第39-40页 |
| 3 实验所需的仪器 | 第40页 |
| 4 实验所需的细胞样品 | 第40页 |
| 5 实验分组同实验研究三 | 第40页 |
| (二)实验方法 | 第40-43页 |
| 1 蛋白定量 | 第40-41页 |
| 2 PAGE胶的制备 | 第41页 |
| 3 上样及电泳 | 第41-42页 |
| 4 蛋白转膜 | 第42页 |
| 5 膜上蛋白的检测 | 第42页 |
| 6 膜的封闭及抗体孵育 | 第42页 |
| 7 蛋白检测 | 第42页 |
| 8 统计学方法 | 第42-43页 |
| 二、实验结果 | 第43-45页 |
| 讨论 | 第45-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 文献综述 | 第54-62页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
