摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第10-12页 |
1 研究方案 | 第12-13页 |
1.1 研究内容 | 第12页 |
1.2 技术路线 | 第12-13页 |
2 材料与仪器设备 | 第13-17页 |
2.1 主要仪器 | 第13页 |
2.2 主要试剂 | 第13-14页 |
2.3 主要试剂配制 | 第14-16页 |
2.4 样本来源 | 第16-17页 |
3 实验方法 | 第17-26页 |
3.1 检测宫颈癌和胃癌细胞系 DNA 中 septin 9 启动子甲基化 | 第17-20页 |
3.1.1 宫颈癌和胃癌细胞系的收集 | 第17页 |
3.1.2 提取人细胞基因组 DNA | 第17页 |
3.1.3 重亚硫酸钠处理基因组 DNA,纯化回收 Bis-DNA | 第17-18页 |
3.1.4 PCR 及 MS-HRM 分析 | 第18-19页 |
3.1.5 数据分析 | 第19-20页 |
3.2 检测宫颈癌肿瘤组织 DNA 中 septin 9 基因的甲基化 | 第20-21页 |
3.2.1 宫颈癌肿瘤组织标本的收集 | 第20页 |
3.2.2 提取石蜡包埋组织 DNA | 第20页 |
3.2.3 重亚硫酸钠处理基因组 DNA,纯化回收 Bis-DNA | 第20页 |
3.2.4 PCR 及 MS-HRM 分析 | 第20页 |
3.2.5 数据分析 | 第20-21页 |
3.3 DAPI 核染色观察药物诱导肿瘤细胞凋亡 | 第21-22页 |
3.3.1 细胞培养与传代 | 第21页 |
3.3.2 细胞冻存 | 第21页 |
3.3.3 细胞复苏 | 第21-22页 |
3.3.4 DAPI 核染色观察药物诱导肿瘤细胞凋亡 | 第22页 |
3.4 检测 SAMe 处理后宫颈癌和胃癌细胞系中 septin 9 基因 mRNA 表达水平 | 第22-25页 |
3.4.1 提取人细胞 RNA | 第22-23页 |
3.4.2 逆转录反应 | 第23页 |
3.4.3 PCR 反应 | 第23-25页 |
3.4.4 数据分析 | 第25页 |
3.5 检测由 SAMe 处理后宫颈癌和胃癌细胞系 DNA 中 septin 9 基因的甲基化 | 第25-26页 |
3.5.1 宫颈癌和胃癌细胞系收集 | 第25页 |
3.5.2 提取人细胞基因组 DNA | 第25页 |
3.5.3 重亚硫酸钠处理基因组 DNA,纯化回收 Bis-DNA | 第25页 |
3.5.4 PCR 及 MS-HRM 分析 | 第25页 |
3.5.5 数据分析 | 第25-26页 |
4 实验结果 | 第26-32页 |
4.1 检测宫颈癌和胃癌细胞系 DNA 中 septin 9 基因的甲基化 | 第26-27页 |
4.2 检测宫颈癌肿瘤组织 DNA 中 septin 9 基因的甲基化 | 第27页 |
4.3 DAPI 核染色观察药物诱导肿瘤细胞凋亡 | 第27-29页 |
4.4 检测 SAMe 处理后宫颈癌和胃癌细胞系中 septin 9 基因 mRNA 表达水平 | 第29-30页 |
4.5 检测由 SAMe 处理后宫颈癌和胃癌细胞系 DNA 中 septin 9 基因的甲基化 | 第30-32页 |
5 讨论 | 第32-36页 |
6 全文总结 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-39页 |
附录A 缩略词 | 第39-40页 |
附录B 综述 | 第40-49页 |
参考文献 | 第45-49页 |
在学研究成果 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |