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小干扰RNA下调热休克蛋白70对A549细胞增殖与凋亡的影响

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
目录第9-12页
图表索引第12-14页
缩略词中英文对照表第14-16页
1 引言第16-18页
2 材料与方法第18-32页
    2.1 材料第18-22页
        2.1.1 细胞来源第18页
        2.1.2 实验试剂第18-19页
        2.1.3 实验器材第19-20页
        2.1.4 siRNA 的设计与筛选第20-21页
        2.1.5 PCR 引物第21页
        2.1.6 主要试剂的配制第21-22页
    2.2 方法第22-32页
        2.2.1 细胞培养第22-24页
        2.2.2 细胞计数第24页
        2.2.3 细胞转染(以 24 孔板为例)第24-25页
        2.2.4 细胞转染条件的确定第25页
        2.2.5 siRNA 的筛选第25-27页
        2.2.6 RNAi 效果检测第27-30页
            2.2.6.1 细胞增殖活性测定第27页
            2.2.6.2 Western blot第27-30页
            2.2.6.3 流式细胞仪检测细胞凋亡率第30页
        2.2.7 统计分析第30-32页
3 结果第32-44页
    3.1 A549 细胞转染条件的确定第32-34页
    3.2 siRNA 的筛选第34-37页
        3.2.1 RNA 的提取以及纯度和完整性检测第34页
        3.2.2 Real-Time PCR 检测 RNAi 效果第34-37页
    3.3 MTT 法检测细胞增殖活性第37-38页
    3.4 Western blot第38-41页
        3.4.1 转染 HSPA1A-2009 对各组细胞 HSP70 表达量的影响第38-39页
        3.4.2 转染 HSPA1A-2009 对各组细胞 p-JNK 表达量的影响第39-40页
        3.4.3 转染 HSP70-2009 对各组细胞活化型 Caspase-3 表达量的影响第40-41页
    3.5 细胞凋亡率检测第41-44页
4 讨论第44-50页
    4.1 siRNA 的设计与 RNAi 效果检测第44-45页
    4.2 HSP70 表达下调对细胞增殖活性的影响第45-46页
    4.3 HSP70、JNK 和 Caspase-3 在细胞凋亡中的作用第46-47页
    4.4 实验的创新性与不足第47-50页
5 结论第50-52页
6 参考文献第52-56页
综述第56-74页
    参考文献第68-74页
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果第74-76页
致谢第76页

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