摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第9-12页 |
图表索引 | 第12-14页 |
缩略词中英文对照表 | 第14-16页 |
1 引言 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-32页 |
2.1 材料 | 第18-22页 |
2.1.1 细胞来源 | 第18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
2.1.3 实验器材 | 第19-20页 |
2.1.4 siRNA 的设计与筛选 | 第20-21页 |
2.1.5 PCR 引物 | 第21页 |
2.1.6 主要试剂的配制 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-32页 |
2.2.1 细胞培养 | 第22-24页 |
2.2.2 细胞计数 | 第24页 |
2.2.3 细胞转染(以 24 孔板为例) | 第24-25页 |
2.2.4 细胞转染条件的确定 | 第25页 |
2.2.5 siRNA 的筛选 | 第25-27页 |
2.2.6 RNAi 效果检测 | 第27-30页 |
2.2.6.1 细胞增殖活性测定 | 第27页 |
2.2.6.2 Western blot | 第27-30页 |
2.2.6.3 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第30页 |
2.2.7 统计分析 | 第30-32页 |
3 结果 | 第32-44页 |
3.1 A549 细胞转染条件的确定 | 第32-34页 |
3.2 siRNA 的筛选 | 第34-37页 |
3.2.1 RNA 的提取以及纯度和完整性检测 | 第34页 |
3.2.2 Real-Time PCR 检测 RNAi 效果 | 第34-37页 |
3.3 MTT 法检测细胞增殖活性 | 第37-38页 |
3.4 Western blot | 第38-41页 |
3.4.1 转染 HSPA1A-2009 对各组细胞 HSP70 表达量的影响 | 第38-39页 |
3.4.2 转染 HSPA1A-2009 对各组细胞 p-JNK 表达量的影响 | 第39-40页 |
3.4.3 转染 HSP70-2009 对各组细胞活化型 Caspase-3 表达量的影响 | 第40-41页 |
3.5 细胞凋亡率检测 | 第41-44页 |
4 讨论 | 第44-50页 |
4.1 siRNA 的设计与 RNAi 效果检测 | 第44-45页 |
4.2 HSP70 表达下调对细胞增殖活性的影响 | 第45-46页 |
4.3 HSP70、JNK 和 Caspase-3 在细胞凋亡中的作用 | 第46-47页 |
4.4 实验的创新性与不足 | 第47-50页 |
5 结论 | 第50-52页 |
6 参考文献 | 第52-56页 |
综述 | 第56-74页 |
参考文献 | 第68-74页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |