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猪卵母细胞体外成熟培养与孤雌胚胎发育的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-13页
第一章 引言第13-27页
 1 哺乳动物卵母细胞体外成熟研究进展第13-16页
   ·卵母细胞成熟的机理第13-14页
     ·卵母细胞体内成熟的生理机理第13-14页
     ·卵母细胞体外成熟的机理第14页
   ·卵母细胞成熟过程中的调控机制第14-16页
     ·磷酸二酯酶的作用第15页
     ·一氧化氮的作用第15页
     ·Ca2+的作用第15页
     ·成熟促进因子的作用第15页
     ·有丝分裂原激活的蛋白激酶的作用第15-16页
     ·AMP 激活的蛋白激酶的作用第16页
     ·卵母细胞成熟抑制因子的作用第16页
 2 猪卵母细胞体外成熟研究进展第16-22页
   ·影响猪卵母细胞体外成熟的因素第16-22页
     ·影响猪卵母细胞体外成熟的生理性因素第17-19页
       ·卵巢来源猪的年龄、品种及健康情况第17页
       ·所采集卵巢所处的性周期第17-18页
       ·采集卵巢离体的时间及保存温度第18页
       ·卵泡的大小及卵丘细胞第18-19页
       ·采集卵母细胞的方法第19页
     ·影响猪卵母细胞体外成熟的物理性因素第19-20页
       ·体外成熟培养条件第19页
       ·体外成熟培养时间第19页
       ·体外成熟培养方式第19-20页
     ·影响猪卵母细胞体外成熟的化学性因素第20-22页
       ·成熟培养基第20页
       ·激素第20-21页
       ·血清第21页
       ·卵泡液第21-22页
       ·细胞生长因子第22页
     ·巯基物质的影响第22页
 3 孤雌胚胎体外发育研究进展第22-27页
   ·孤雌激活第24页
   ·孤雌胚的核型第24页
   ·孤雌胚胎的发育第24-25页
   ·孤雌胚胎的体外培养第25-27页
     ·孤雌胚胎体外培养液的研究进展第25页
     ·孤雌胚胎体外培养方法的研究进展第25-27页
       ·微滴培养第25页
       ·孔中孔培养法第25-26页
       ·共培养第26页
       ·序贯培养第26页
       ·微流体培养第26-27页
第二章 培养体系对猪卵母细胞体外成熟的影响第27-36页
 1 材料与方法第27-31页
   ·材料第27-29页
     ·卵巢采集卵巢来自于武汉市某屠宰场收集的废弃卵巢第27页
     ·试剂来源第27页
     ·主要仪器第27-28页
     ·所需各种溶液的配制第28-29页
       ·卵巢保存液第28页
       ·体外成熟培养基础培养液的配制第28页
       ·胚胎培养液NCSU-23 []的配制第28页
       ·PMSG 的配制第28页
       ·hCG 的配制第28页
       ·EGF 的配制第28-29页
   ·方法第29-31页
     ·猪卵巢及卵丘-卵母细胞复合体的收集第29页
     ·猪卵母细胞的分级第29页
     ·猪卵母细胞的体外成熟培养第29页
     ·猪卵泡液PFF 的制备第29-30页
     ·颗粒细胞单层的制备第30页
     ·卵母细胞体外成熟鉴定第30页
     ·成熟卵母细胞的孤雌激活第30页
     ·孤雌激活胚胎的体外培养第30页
     ·试验设计第30-31页
       ·比较基础成熟液mTCM-199 中添加不同的物质对猪卵母细胞体外成熟的影响第30页
       ·基础成熟液m TCM-199 中添加不同浓度梯度EGF 对猪卵母细胞体外成熟的影响第30-31页
       ·基础成熟液mTCM-199 中添加不同浓度梯度 ITS 对猪卵母细胞体外成熟的影响第31页
   ·数据处理第31页
 2 结果与分析第31-33页
   ·PVA 和FBS 对猪卵母细胞体外成熟及孤雌发育的影响第31-32页
   ·EGF 对猪卵母细胞体外成熟及孤雌发育的影响第32-33页
   ·ITS 对猪卵母细胞体外成熟及孤雌发育的影响第33页
 3 讨论第33-35页
 4 小结第35-36页
第三章 培养方法对猪卵母细胞体外成熟的影响第36-43页
 1 材料与方法第36-39页
   ·材料第36-37页
     ·卵巢采集第36页
     ·试剂来源第36页
     ·主要仪器第36-37页
     ·所需各种溶液的配制第37页
       ·卵巢保存液第37页
       ·体外成熟培养基础培养液的配制第37页
       ·PMSG 的配制第37页
       ·hCG 的配制第37页
     ·体外胚胎培养液的配制第37页
   ·方法第37-39页
     ·猪卵巢及卵丘-卵母细胞复合体的收集第37-38页
     ·猪卵母细胞的分级第38页
     ·猪卵母细胞的体外成熟培养第38页
     ·猪卵泡液PFF 的制备第38页
     ·颗粒细胞单层的制备第38页
     ·卵母细胞体外成熟鉴定第38页
     ·成熟卵母细胞的孤雌激活及孤雌胚胎体外培养第38-39页
     ·试验设计第39页
       ·胚胎培养液对猪孤雌胚胎体外发育的影响第39页
       ·序贯培养对猪孤雌胚体外发育的影响第39页
   ·数据处理第39页
 2 结果第39-41页
   ·不同胚胎培养液对猪孤雌胚胎体外发育的影响第39-40页
   ·不同序贯培养对猪孤雌胚胎体外发育的影响第40-41页
 3 讨论第41-42页
 4 小结第42-43页
第四章 低氧环境对猪胚胎发育的影响第43-50页
 1 材料和方法第43-46页
   ·材料第43-44页
     ·卵巢采集第43页
     ·试剂来源第43页
     ·主要仪器第43页
     ·所需各种溶液的配制第43-44页
       ·卵巢保存液第44页
       ·体外成熟培养基础培养液的配制第44页
       ·胚胎培养液的配制第44页
       ·PMSG 的配制第44页
       ·hCG 的配制第44页
       ·FSH 的配制第44页
       ·LH 的配制第44页
       ·LHRH-A3 的配制第44页
   ·方法第44-46页
     ·猪卵巢及卵丘-卵母细胞复合体的收集第44-45页
     ·猪卵母细胞的分级第45页
     ·猪卵母细胞的体外成熟培养第45页
     ·猪卵泡液PFF 的制备第45页
     ·颗粒细胞单层的制备第45页
     ·卵母细胞体外成熟鉴定第45页
     ·成熟卵母细胞的孤雌激活及激活后的体外培养第45-46页
       ·成熟卵母细胞的孤雌激活第46页
       ·成熟卵母细胞孤雌激活后的体外培养第46页
     ·试验设计第46页
       ·比较不同浓度梯度C02 对猪孤雌胚胎体外发育的影响第46页
       ·在低氧条件下,比较不同激素对猪孤雌胚胎体外发育的影响第46页
       ·在低氧条件下,比较不同胚胎培养液对猪孤雌胚胎体外发育的影响第46页
   ·数据处理第46页
 2 结果第46-48页
   ·不同浓度的C02 对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响第47页
   ·不同激素在低氧条件下对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响第47-48页
   ·不同胚胎培养液在低氧条件下对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响第48页
 3 讨论第48-49页
 4 小结第49-50页
结论第50-51页
附录A 文章相关图片第51-53页
附录B 专利排名第53-54页
致谢第54-55页
作者简介第55-56页
参考文献第56-62页

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