摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第1章 绪论 | 第9-14页 |
1.1 人绒毛膜促性腺激素 | 第9-10页 |
1.2 单域抗体 | 第10-12页 |
1.3 CABBCⅡ10 骨架 | 第12-13页 |
1.4 研究目的及意义 | 第13-14页 |
第2章 ANTI-HCG-Α 蛋白与CABBCⅡ10-HCGBP1/3 单链抗体载体构建 | 第14-28页 |
2.1 实验材料与耗材 | 第14页 |
2.2 实验仪器与主要试剂及配方 | 第14-17页 |
2.2.1 实验仪器 | 第14-16页 |
2.2.2 软件工具 | 第16页 |
2.2.3 主要试剂 | 第16页 |
2.2.4 分子实验中所使用配方 | 第16-17页 |
2.3 分子实验操作技术 | 第17-23页 |
2.3.1 超级感受态的制备 | 第17-18页 |
2.3.2 DNA琼脂糖凝胶回收(同Axygen公司说明书) | 第18-19页 |
2.3.3 PCR清洁(Clean up) | 第19页 |
2.3.4 PCR | 第19-20页 |
2.3.5 酶切 | 第20页 |
2.3.6 连接 | 第20-21页 |
2.3.7 转化 | 第21页 |
2.3.8 质粒DNA小量提取(同Axygen公司说明书) | 第21-22页 |
2.3.9 质粒DNA中量提取(康为世纪中提试剂盒) | 第22-23页 |
2.4 实验方法 | 第23-26页 |
2.4.1 质粒的构建 | 第23-26页 |
2.5 实验结果与分析 | 第26页 |
2.6 讨论 | 第26-28页 |
第3章 ANTI-HCG-Α蛋白与CABBCⅡ10-HCGBP1/3 单链抗体的表达纯化及浓度测定 | 第28-38页 |
3.1 实验材料与耗材 | 第28页 |
3.2 实验仪器与主要试剂及配方 | 第28-31页 |
3.2.1 实验仪器 | 第28页 |
3.2.2 主要试剂 | 第28-29页 |
3.2.3 实验配方 | 第29-31页 |
3.3 实验方法 | 第31-34页 |
3.3.1 抗体融合蛋白的表达 | 第31-32页 |
3.3.2 抗体融合蛋白的纯化与透析 | 第32-33页 |
3.3.3 抗体融合蛋白的浓度测定 | 第33-34页 |
3.4 实验结果与分析 | 第34-36页 |
3.4.1 抗体融合蛋白的表达 | 第34-35页 |
3.4.2 抗体融合蛋白的纯化 | 第35-36页 |
3.4.3 抗体融合蛋白的浓度测定 | 第36页 |
3.5 讨论 | 第36-38页 |
第4章 CABBCⅡ10-HCGBP1/3 单链抗体的活性、滴度、特异性检测及稳定性分析 | 第38-49页 |
4.1 实验材料与耗材 | 第38页 |
4.2 实验仪器与主要试剂及配方 | 第38-40页 |
4.2.1 实验仪器 | 第38-39页 |
4.2.2 主要试剂 | 第39-40页 |
4.2.3 主要配方 | 第40页 |
4.3 实验方法 | 第40-43页 |
4.3.1 获取h CG抗原 | 第40-42页 |
4.3.2 cAbBCⅡ10-h CGBP1/3 单链抗体的活性测定 | 第42页 |
4.3.3 cAbBCⅡ10-h CGBP1/3 单链抗体的滴度测定 | 第42页 |
4.3.4 cAbBCⅡ10-h CGBP1/3 单链抗体的特异性测定 | 第42-43页 |
4.3.5 cAbBCⅡ10-h CGBP1/3 单链抗体的稳定性实验 | 第43页 |
4.4 实验结果 | 第43-47页 |
4.4.1 h CG抗原分泌情况 | 第43-44页 |
4.4.2 融合蛋白的活性分析 | 第44-45页 |
4.4.3 抗体融合蛋白的滴度 | 第45-46页 |
4.4.4 抗体融合蛋白的特异性 | 第46页 |
4.4.5 cAbBCⅡ10-h CGBP1/3 单链抗体的稳定性 | 第46-47页 |
4.5 讨论 | 第47-49页 |
第5章 结论与展望 | 第49-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58-59页 |
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第59页 |