| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-30页 |
| 第一章 质型多角体病毒的研究进展 | 第13-21页 |
| 1．质型多角体病毒的发现 | 第13-14页 |
| 2．质型多角体病毒的结构 | 第14页 |
| 3．质型多角体病毒的入侵和复制 | 第14-17页 |
| 3.1 质型多角体病毒的宿主 | 第14页 |
| 3.2 质型多角体病毒的交叉感染 | 第14-15页 |
| 3.3 质型多角体病毒病的典型症状 | 第15-16页 |
| 3.4 家蚕质型多角体病毒的入侵和复制机制 | 第16-17页 |
| 4．家蚕质型多角体病毒的抗性分析 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-21页 |
| 第二章 质型多角体病毒基因组的研究进展 | 第21-30页 |
| 1．基因组结构 | 第21页 |
| 2．基因组研究进展 | 第21-25页 |
| 3．BmCPV S7 片段的研究进展 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-30页 |
| 第二部分 研究报告 | 第30-97页 |
| 第三章 研究目的与研究内容 | 第30-33页 |
| 1．研究目的及意义 | 第30-31页 |
| 2．研究内容 | 第31-32页 |
| 3．技术路线 | 第32-33页 |
| 第四章 VP7 的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第33-51页 |
| 摘要 | 第33页 |
| 1 引言 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-46页 |
| 2.1 材料 | 第34-41页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.1.2 工具酶及 Kit | 第34-35页 |
| 2.1.3 其它试剂 | 第35页 |
| 2.1.4 主要实验试剂的配制 | 第35-40页 |
| 2.1.5 实验常用仪器设备 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-46页 |
| 2.2.1 BmCPV-S7 基因的克隆 | 第41-42页 |
| 2.2.2 重组表达载体 pET-28a-S7 的构建 | 第42-44页 |
| 2.2.3 重组表达载体 pET-28a-S7 的原核表达 | 第44页 |
| 2.2.4 VP7 重组蛋白的 SDS-PAGE 检测 | 第44-45页 |
| 2.2.5 VP7 重组蛋白的 Western blotting 检测 | 第45页 |
| 2.2.6 VP7 多克隆抗体的制备 | 第45-46页 |
| 2.2.7 多克隆抗体的鉴定 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-48页 |
| 3.1 S7 片段的克隆以及重组载体的酶切鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2 VP7 重组蛋白和多克隆抗体的鉴定 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第五章 重组蛋白 VP7 在转化细胞中的切割及病毒粒子中 VP7 的检测 | 第51-64页 |
| 摘要 | 第51页 |
| 1 引言 | 第51-52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-56页 |
| 2.1 材料 | 第52-54页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 2.1.2 试剂 | 第53页 |
| 2.1.3 细胞培养基的配制 | 第53页 |
| 2.1.4 镍柱亲和层析相关试剂的配制 | 第53-54页 |
| 2.1.5 实验仪器及设备 | 第54页 |
| 2.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 2.2.1 pIZT/V5-His-S7 重组载体的构建 | 第54-55页 |
| 2.2.2 BmN 细胞的培养以及转染 | 第55页 |
| 2.2.3 转染细胞的筛选 | 第55页 |
| 2.2.4 细胞蛋白的提取 | 第55页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE、Western blotting 检测 | 第55页 |
| 2.2.6 VP7 蛋白断裂位点分析 | 第55-56页 |
| 2.2.7 BmCPV 病毒粒子中 VP7 检测 | 第56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-60页 |
| 3.1 pIZT/V5-His-S7 重组表达载体的酶切鉴定 | 第56-57页 |
| 3.2 转染细胞的筛选 | 第57-58页 |
| 3.3 稳定转化细胞中 VP7 重组蛋白的鉴定 | 第58页 |
| 3.4 重组 VP7 及其断裂蛋白的纯化 | 第58-60页 |
| 3.5 BmCPV 病毒粒子中 VP7 检测 | 第60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 第六章 VP7 的亚细胞定位及 BmCPV 感染过程中 VP7 蛋白水平的变化 | 第64-76页 |
| 摘要 | 第64页 |
| 1 引言 | 第64-65页 |
| 2 材料与方法 | 第65-69页 |
| 2.1 实验材料 | 第65-66页 |
| 2.1.1 材料 | 第65页 |
| 2.1.2 试剂 | 第65页 |
| 2.1.3 免疫组织荧光相关试剂的配制 | 第65-66页 |
| 2.1.5 实验仪器及设备 | 第66页 |
| 2.2 实验方法 | 第66-69页 |
| 2.2.1 感染细胞（组织）中的 VP7 检测 | 第66-67页 |
| 2.2.2 VP7 的亚细胞定位（组织免疫荧光检测） | 第67-68页 |
| 2.2.3 VP7 表达水平检测 | 第68-69页 |
| 3 结果与分析 | 第69-72页 |
| 3.1 BmCPV 感染 BmN 细胞中 VP7 的检测 | 第69页 |
| 3.2 BmCPV 感染家蚕中肠组织中的 VP7 检测 | 第69-70页 |
| 3.3 VP7 的亚细胞定位 | 第70-71页 |
| 3.4 病毒感染与 VP7 的切割 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 第七章 抑制 vp7 基因表达对病毒增殖的影响 | 第76-84页 |
| 摘要 | 第76页 |
| 1 引言 | 第76-77页 |
| 2 材料与方法 | 第77-79页 |
| 2.1 实验材料 | 第77页 |
| 2.1.1 材料 | 第77页 |
| 2.1.2 试剂 | 第77页 |
| 2.1.3 实验仪器及设备 | 第77页 |
| 2.2 实验方法 | 第77-79页 |
| 2.2.1 家蚕个体水平和细胞水平的 RNA 干扰 | 第77-78页 |
| 2.2.2 qRT-PCR 检测 S7 和 S1 片段的表达水平 | 第78-79页 |
| 3 结果与分析 | 第79-82页 |
| 3.1 感染 BmCPV 家蚕中肠组织中的 VP7 以及 VP1 的 RNA 检测 | 第79-80页 |
| 3.2 感染 BmCPV BmN 细胞中的 VP7 以及 VP1 的 RNA 检测 | 第80-82页 |
| 4 讨论 | 第82页 |
| 参考文献 | 第82-84页 |
| 第八章 VP7 互作宿主蛋白的筛选与鉴定 | 第84-97页 |
| 摘要 | 第84页 |
| 1 引言 | 第84-85页 |
| 2 材料与方法 | 第85-87页 |
| 2.1 实验材料 | 第85页 |
| 2.1.1 材料 | 第85页 |
| 2.1.2 实验仪器及设备 | 第85页 |
| 2.2 实验方法 | 第85-87页 |
| 2.2.1 组织免疫共沉淀（Co-IP） | 第85-86页 |
| 2.2.2 蛋白的质谱鉴定 | 第86-87页 |
| 3 结果与分析 | 第87-91页 |
| 3.1 免疫共沉淀捕获 VP7 互作宿主蛋白 | 第87页 |
| 3.2 VP7 互作宿主蛋白的筛选与鉴定 | 第87-91页 |
| 4 讨论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-97页 |
| 结论 | 第97-98页 |
| 1．已取得的成果 | 第97页 |
| 2．有待进一步研究的问题 | 第97-98页 |
| 附录一 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第98-99页 |
| 附录二 英文简写对照表 | 第99-100页 |
| 附录三 质谱 Bsaepeak 图 | 第100-101页 |
| 附录四 质粒图谱 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
