摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第1章 绪论 | 第10-23页 |
1.1 研究背景、意义和目的 | 第10-12页 |
1.1.1 研究背景 | 第10-12页 |
1.1.2 研究意义 | 第12页 |
1.1.3 研究目的 | 第12页 |
1.2 研究工作的突破点和理论基础 | 第12-15页 |
1.2.1 研究工作的突破点 | 第12-13页 |
1.2.2 研究工作的理论基础 | 第13-15页 |
1.3 多肽、蛋白质溶液结构的NMR研究方法 | 第15-21页 |
1.3.1 用NMR的方法研究多肽在溶液中的结构 | 第15页 |
1.3.2 用NMR的方法研究蛋白质在溶液中的结构 | 第15-21页 |
1.4 应用于大分子量蛋白质结构和动力学研究的NMR方法 | 第21-23页 |
1.4.1 TROSY脉冲技术 | 第21-22页 |
1.4.2 氘代与选择性标记 | 第22-23页 |
第2章 稳定硫氧还蛋白还原酶的制备优化 | 第23-32页 |
2.1 原始质粒的表达 | 第23-26页 |
2.1.1 将含有TrxR的质粒导入到感受态细胞中 | 第23-24页 |
2.1.2 将含有TrxR质粒的细胞进行培养,分离和纯化 | 第24-26页 |
2.2 修饰质粒的表达 | 第26-30页 |
2.2.1 构建含有His-tag的重组质粒 | 第26-29页 |
2.2.2 含His-tag的重组质粒的表达 | 第29-30页 |
2.3 NMR实验结果 | 第30-31页 |
2.4 小结 | 第31-32页 |
第3章 硫氧还蛋白还原酶稳定结构的探究 | 第32-53页 |
3.1 TRXR蛋白质结构的分析 | 第32页 |
3.2 TRXR蛋白质稳定结构的探究方法 | 第32-36页 |
3.2.1 荧光光谱法 | 第32-34页 |
3.2.2 电化学方法 | 第34-36页 |
3.3 TRXR蛋白质结构的影响因素的探究 | 第36-51页 |
3.3.1 FAD对TrxR蛋白质结构的影响 | 第36-38页 |
3.3.2 pH对TrxR蛋白质二级结构的影响 | 第38-39页 |
3.3.3 突变体对TrxR蛋白质结构的影响 | 第39-42页 |
3.3.4 醋酸苯汞(PMA)对TrxR蛋白质结构的影响 | 第42-45页 |
3.3.5 温度的对TrxR蛋白质结构的影响 | 第45页 |
3.3.6 助溶剂(甘油)对TrxR蛋白质结构的影响 | 第45-46页 |
3.3.7 氘代 | 第46-47页 |
3.3.8 浓度对TrxR蛋白质结构的影响 | 第47-49页 |
3.3.9 结构域分开的尝试 | 第49-51页 |
3.4 结果与讨论 | 第51-53页 |
第4章 硫氧还蛋白还原酶结构的归属 | 第53-59页 |
4.1 核磁共振实验部分 | 第53-57页 |
4.2 实验结果 | 第57-58页 |
4.3 总结与展望 | 第58-59页 |
第5章 溶液中溶剂峰压制NMR实验的探究和比较 | 第59-68页 |
5.1 前言 | 第59-60页 |
5.2 实验部分 | 第60-64页 |
5.2.1 样品制备 | 第60-61页 |
5.2.2 NMR实验 | 第61-64页 |
5.3 结果与讨论 | 第64-67页 |
5.4 总结与展望 | 第67-68页 |
附录 | 第68-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
攻读硕士学位期间参加的会议及发表的学术论文 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |