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基于磁共振的硫氧还蛋白还原酶结构的表征

摘要第6-7页
Abstract第7页
第1章 绪论第10-23页
    1.1 研究背景、意义和目的第10-12页
        1.1.1 研究背景第10-12页
        1.1.2 研究意义第12页
        1.1.3 研究目的第12页
    1.2 研究工作的突破点和理论基础第12-15页
        1.2.1 研究工作的突破点第12-13页
        1.2.2 研究工作的理论基础第13-15页
    1.3 多肽、蛋白质溶液结构的NMR研究方法第15-21页
        1.3.1 用NMR的方法研究多肽在溶液中的结构第15页
        1.3.2 用NMR的方法研究蛋白质在溶液中的结构第15-21页
    1.4 应用于大分子量蛋白质结构和动力学研究的NMR方法第21-23页
        1.4.1 TROSY脉冲技术第21-22页
        1.4.2 氘代与选择性标记第22-23页
第2章 稳定硫氧还蛋白还原酶的制备优化第23-32页
    2.1 原始质粒的表达第23-26页
        2.1.1 将含有TrxR的质粒导入到感受态细胞中第23-24页
        2.1.2 将含有TrxR质粒的细胞进行培养,分离和纯化第24-26页
    2.2 修饰质粒的表达第26-30页
        2.2.1 构建含有His-tag的重组质粒第26-29页
        2.2.2 含His-tag的重组质粒的表达第29-30页
    2.3 NMR实验结果第30-31页
    2.4 小结第31-32页
第3章 硫氧还蛋白还原酶稳定结构的探究第32-53页
    3.1 TRXR蛋白质结构的分析第32页
    3.2 TRXR蛋白质稳定结构的探究方法第32-36页
        3.2.1 荧光光谱法第32-34页
        3.2.2 电化学方法第34-36页
    3.3 TRXR蛋白质结构的影响因素的探究第36-51页
        3.3.1 FAD对TrxR蛋白质结构的影响第36-38页
        3.3.2 pH对TrxR蛋白质二级结构的影响第38-39页
        3.3.3 突变体对TrxR蛋白质结构的影响第39-42页
        3.3.4 醋酸苯汞(PMA)对TrxR蛋白质结构的影响第42-45页
        3.3.5 温度的对TrxR蛋白质结构的影响第45页
        3.3.6 助溶剂(甘油)对TrxR蛋白质结构的影响第45-46页
        3.3.7 氘代第46-47页
        3.3.8 浓度对TrxR蛋白质结构的影响第47-49页
        3.3.9 结构域分开的尝试第49-51页
    3.4 结果与讨论第51-53页
第4章 硫氧还蛋白还原酶结构的归属第53-59页
    4.1 核磁共振实验部分第53-57页
    4.2 实验结果第57-58页
    4.3 总结与展望第58-59页
第5章 溶液中溶剂峰压制NMR实验的探究和比较第59-68页
    5.1 前言第59-60页
    5.2 实验部分第60-64页
        5.2.1 样品制备第60-61页
        5.2.2 NMR实验第61-64页
    5.3 结果与讨论第64-67页
    5.4 总结与展望第67-68页
附录第68-71页
参考文献第71-79页
攻读硕士学位期间参加的会议及发表的学术论文第79-80页
致谢第80页

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