| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 卵母细胞玻璃化冷冻与TET蛋白介导DNA甲基化过程研究 | 第12-20页 |
| 1.1 卵母细胞玻璃化冷冻 | 第12-14页 |
| 1.1.1 玻璃化冷冻 | 第12-13页 |
| 1.1.2 卵母细胞玻璃化冷冻方法 | 第13页 |
| 1.1.3 玻璃化冷冻卵母细胞的安全性 | 第13-14页 |
| 1.2 卵母细胞与胚胎DNA甲基化与羟甲基化 | 第14-16页 |
| 1.2.1 DNA甲基化与羟甲基化 | 第14-15页 |
| 1.2.2 卵母细胞和胚胎甲基化动态过程 | 第15页 |
| 1.2.3 DNA甲基化的建立和去除 | 第15-16页 |
| 1.3 卵母细胞和早期胚胎发育过程中TET蛋白介导的DNA去甲基化 | 第16-20页 |
| 1.3.1 TET蛋白 | 第17页 |
| 1.3.2 卵母细胞和早期胚胎中TET介导的DNA去甲基化机制 | 第17-18页 |
| 1.3.3 TET蛋白活性调控 | 第18-20页 |
| 实验部分 | 第20-42页 |
| 第二章 冷冻-解冻过程中TETs表达和DNA甲基化和羟甲基化水平变化 | 第20-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 实验设备和仪器 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 小鼠MⅡ卵母细胞的采集 | 第23页 |
| 2.2.2 卵母细胞玻璃化冷冻和解冻 | 第23页 |
| 2.2.3 卵母细胞免疫荧光染色程序 | 第23-24页 |
| 2.2.4 免疫荧光染色图片分析方法 | 第24页 |
| 2.2.5 卵母细胞荧光定量 | 第24-26页 |
| 2.2.6 结果数据分析 | 第26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-29页 |
| 2.3.1 玻璃化冷冻-解冻过程中MⅡ卵母细胞TETsmRNA表达水平的变化 | 第26-27页 |
| 2.3.2 玻璃化冷冻-解冻过程中MⅡ卵母细胞TETs蛋白表达水平的变化 | 第27-28页 |
| 2.3.3 玻璃化冷冻-解冻过程中MⅡ卵母细胞DNA甲基化水平的变化 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 TET3对玻璃化冷冻卵母细胞DNA甲基化和羟甲基化水平的影响 | 第31-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第32页 |
| 3.1.2 主要仪器和设备 | 第32页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 卵母细胞采集 | 第32页 |
| 3.2.4 MⅡ卵母细胞的玻璃化冷冻和VC、DMOG处理 | 第32-33页 |
| 3.2.3 卵母细胞显微注射 | 第33页 |
| 3.2.4 TET3干扰片段设计 | 第33-34页 |
| 3.2.5 卵母细胞免疫荧光染色程序 | 第34页 |
| 3.2.6 免疫荧光图片分析方法 | 第34页 |
| 3.2.7 卵母细胞荧光定量 | 第34页 |
| 3.2.8 实验结果分析 | 第34页 |
| 3.3 实验结果 | 第34-40页 |
| 3.3.1 VC处理对玻璃化冷冻卵母细胞TET3表达影响 | 第34-36页 |
| 3.3.2 VC对玻璃化冷冻后卵母细胞DNA甲基化的影响 | 第36页 |
| 3.3.3 DMOG处理对TET3表达的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.4 DMOG对玻璃化冷冻后卵母细胞DNA甲基化的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.5 TET3干扰片段对玻璃化冷冻后卵母细胞甲基化和羟甲基化的影响 | 第38-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 3.5 小结 | 第41-42页 |
| 全文结论 | 第42-43页 |
| 创新点以及后续研究工作 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 缩略词表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
