摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10页 |
第一章 蛋白酶抑制剂的研究进展(文献综述) | 第11-20页 |
1.1 蛋白酶抑制剂的来源 | 第11-13页 |
1.1.1 植物源蛋白酶抑制剂 | 第11-12页 |
1.1.2 动物源蛋白酶抑制剂 | 第12-13页 |
1.1.3 微生物源蛋白酶抑制剂 | 第13页 |
1.2 蛋白酶抑制剂在农业虫害防治方面的研究 | 第13-16页 |
1.2.1 蛋白酶抑制剂在转基因抗虫品种中的研究 | 第13-15页 |
1.2.2 蛋白酶抑制剂在抗虫方面的影响因素 | 第15-16页 |
1.3 植食性昆虫与植物防御机制 | 第16-18页 |
1.3.1 植物对昆虫的防御反应 | 第16-17页 |
1.3.2 苜蓿虫害与苜蓿斑蚜的防治研究 | 第17-18页 |
1.4 蚜虫人工饲料的研究 | 第18页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第18-20页 |
第二章 苜蓿斑蚜取食后不同品种紫花苜蓿差异基因组学分析 | 第20-32页 |
2.1 材料与方法 | 第20-22页 |
2.1.1 试验材料 | 第20页 |
2.1.2 试验取样方法 | 第20页 |
2.1.3 紫花苜蓿总RNA提取 | 第20-21页 |
2.1.4 RNA测序文库构建流程 | 第21页 |
2.1.5 生物学信息分析流程 | 第21-22页 |
2.1.6 差异基因转录水平检测 | 第22页 |
2.1.7 数据处理 | 第22页 |
2.2 结果与分析 | 第22-31页 |
2.2.1 苜蓿叶总RNA提取结果 | 第22-23页 |
2.2.2 测序数据质量 | 第23页 |
2.2.3 拼接后的转录本长度 | 第23-24页 |
2.2.4 非冗余unigenes基因功能注释 | 第24-25页 |
2.2.5 非冗余unigenes功能分类 | 第25-27页 |
2.2.6 基因差异表达分析 | 第27-29页 |
2.2.7 紫花苜蓿与苜蓿斑蚜互作基因 | 第29页 |
2.2.8 荧光定量差异表达验证 | 第29-31页 |
2.3 讨论 | 第31-32页 |
第三章 紫花苜蓿胰蛋白酶抑制剂基因的克隆与原核表达 | 第32-48页 |
3.1 材料与方法 | 第32-40页 |
3.1.1 试验试剂与仪器 | 第32-33页 |
3.1.2 试验用培养基及相关试剂配制 | 第33页 |
3.1.3 苜蓿苗栽培方法 | 第33-34页 |
3.1.4 苜蓿目的基因c DNA克隆 | 第34-38页 |
3.1.5 苜蓿胰蛋白酶抑制剂基因的原核载体构建 | 第38-39页 |
3.1.6 TPTG诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第39-40页 |
3.1.7 生物软件 | 第40页 |
3.2 结果与分析 | 第40-46页 |
3.2.1 苜蓿胰蛋白酶抑制剂基因的获取与分析 | 第40-43页 |
3.2.2 苜蓿胰蛋白酶抑制剂基因的克隆 | 第43-44页 |
3.2.3 苜蓿胰蛋白酶抑制剂基因的原核表达载体构建与诱导表达 | 第44-45页 |
3.2.4 目的蛋白的纯化 | 第45-46页 |
3.3 讨论 | 第46-48页 |
第四章 紫花苜蓿胰蛋白酶抑制剂对苜蓿斑蚜的抑制作用 | 第48-62页 |
4.1 材料与方法 | 第48-53页 |
4.1.1 供试虫源 | 第48页 |
4.1.2 试剂与仪器 | 第48页 |
4.1.3 蚜虫人工饲料配制 | 第48-49页 |
4.1.4 蚜虫饲育器的制作 | 第49-50页 |
4.1.5 重组表达菌体对苜蓿斑蚜杀虫活性的研究 | 第50-51页 |
4.1.6 重组纯化蛋白对苜蓿斑蚜杀虫活性的研究 | 第51页 |
4.1.7 重组表达蛋白对苜蓿斑蚜体内酶活性的影响 | 第51-52页 |
4.1.8 数据统计与分析 | 第52-53页 |
4.2 结果与分析 | 第53-60页 |
4.2.1 Msti-95,Msti-16 重组表达菌体对苜蓿斑蚜杀虫活性 | 第53-54页 |
4.2.2 Msti-95,Msti-16 重组纯化蛋白对苜蓿斑蚜杀虫活性 | 第54-56页 |
4.2.3 Msti-95,Msti-16 重组表达菌体对苜蓿斑蚜体内酶活性影响 | 第56-58页 |
4.2.4 Msti-95,Msti-16 重组纯化蛋白对苜蓿斑蚜体内酶活性影响 | 第58-60页 |
4.3 讨论 | 第60-62页 |
第五章 全文总结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录:英文缩略表 | 第69-70页 |
附录:图目录 | 第70-72页 |
附录:表目录 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读学位论文期间发表文章 | 第74-75页 |