摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语表 | 第11-13页 |
第一部分 FGF21对肝细胞糖脂代谢的调控及分子机制探索 | 第13-45页 |
1 前言 | 第13-17页 |
1.1 肝脏中脂代谢 | 第13-15页 |
1.1.1 脂质的消化,吸收和转运 | 第13-14页 |
1.1.2 乳糜微粒的合成及分解 | 第14页 |
1.1.3 脂肪酸的合成及成脂反应 | 第14页 |
1.1.4 脂肪酸的氧化 | 第14-15页 |
1.1.5 VLDL的包装及分泌 | 第15页 |
1.2 非酒精性脂肪肝 | 第15-16页 |
1.3 研究目的和意义 | 第16-17页 |
2 实验材料与方法 | 第17-29页 |
2.1 实验材料 | 第17页 |
2.1.1 实验细胞 | 第17页 |
2.1.2 质粒 | 第17页 |
2.2 主要仪器、试剂及溶液配制 | 第17-20页 |
2.2.1 主要仪器 | 第17-18页 |
2.2.2 主要试剂 | 第18页 |
2.2.3 主要溶液配制 | 第18-20页 |
2.2.4 分子生物学软件 | 第20页 |
2.3 实验方法 | 第20-29页 |
2.3.1 细胞总RNA的提取、纯化及纯度鉴定及cDNA第一链的合成 | 第20-23页 |
2.3.2 实时定量PCR | 第23-26页 |
2.3.3 数据统计分析 | 第26页 |
2.3.4 油红O染色 | 第26页 |
2.3.5 Western blot | 第26-28页 |
2.3.6 启动子的扩增、表达载体构建及双荧光素酶报告基因检测 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-43页 |
3.1 人FGF21基因超表达载体的构建 | 第29-30页 |
3.2 FGF21对肝细胞脂代谢的调控及调控机制的探索 | 第30-41页 |
3.2.1 FGF21对成脂途径的调控及机制 | 第30-41页 |
3.2.2 FGF21对脂肪酸氧化途径的调控 | 第41页 |
3.3 FGF21对肝细胞糖代谢的调控 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
第二部分 猪FGF21基因的克隆及其组织表达特性 | 第45-61页 |
1 前言 | 第45-49页 |
1.1 脂肪细胞因子 | 第45页 |
1.2 FGF21概述 | 第45-49页 |
1.2.1 FGF21及其受体FGFRs、辅助受体β-klotho概况 | 第45-47页 |
1.2.2 FGF21的功能研究 | 第47-49页 |
1.3 研究目的和意义 | 第49页 |
2 实验材料与方法 | 第49-56页 |
2.1 实验材料 | 第49-50页 |
2.1.1 实验动物 | 第49页 |
2.1.2 样品采集 | 第49页 |
2.1.3 菌株 | 第49-50页 |
2.2 主要仪器、试剂及溶液配制 | 第50-51页 |
2.2.1 主要仪器 | 第50页 |
2.2.2 主要试剂 | 第50页 |
2.2.3 主要溶液配制 | 第50-51页 |
2.2.4 分子生物学软件 | 第51页 |
2.3 实验方法 | 第51-56页 |
2.3.1 组织样品总RNA的提取,纯化,纯度鉴定及cDNA第一链的合成 | 第51页 |
2.3.2 目的片段的扩增与纯化 | 第51-54页 |
2.3.3 FGF21的组织表达谱分析 | 第54页 |
2.3.4 FGF21蛋白的表达及初步纯化 | 第54-56页 |
3 结果与分析 | 第56-59页 |
3.1 猪FGF21基因的克隆 | 第56页 |
3.2 FGF21的基因组结构分析 | 第56-57页 |
3.3 FGF21的组织表达谱 | 第57-58页 |
3.4 FGF21蛋白的表达及初步纯化 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-60页 |
5 结论,创新点及不足之处 | 第60-61页 |
5.1 结论 | 第60页 |
5.2 创新点 | 第60页 |
5.3 不足之处 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
研究生期间发表的文章 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |