摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 引言 | 第13-22页 |
1.1 心血管疾病及血栓倾向的高血脂症概述 | 第13-14页 |
1.1.1 血栓性疾病概述 | 第13页 |
1.1.2 血栓倾向的高血脂症概述 | 第13-14页 |
1.2 血栓形成及溶栓机制 | 第14-15页 |
1.2.1 血栓形成机制 | 第14页 |
1.2.2 血栓溶解机制 | 第14-15页 |
1.3 溶栓剂简介 | 第15-16页 |
1.4 溶栓剂研究进展 | 第16-19页 |
1.4.1 新型溶栓剂 | 第16页 |
1.4.2 天然来源溶栓药物—纤溶酶的提纯及其抗栓、溶栓作用的研究现状 | 第16-19页 |
1.4.3 蛹虫草纤溶酶的研究进展 | 第19页 |
1.5 蛹虫草及其生理活性研究概述 | 第19-20页 |
1.5.1 蛹虫草简介 | 第19-20页 |
1.5.2 蛹虫草生理活性成分简介 | 第20页 |
1.6 课题的研究内容及意义 | 第20-22页 |
2 蛹虫草纤溶酶的分离纯化 | 第22-43页 |
2.1 引言 | 第22-24页 |
2.1.1 蛋白质分离纯化的意义和原则 | 第22页 |
2.1.2 蛋白质分离纯化常用策略方法 | 第22-23页 |
2.1.3 分离纯化路线 | 第23-24页 |
2.2 材料 | 第24-28页 |
2.2.1 原料 | 第24页 |
2.2.2 主要材料和试剂 | 第24-25页 |
2.2.3 实验仪器 | 第25-26页 |
2.2.4 主要溶液及配制 | 第26-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-33页 |
2.3.1 蛋白质含量的测定 | 第28-31页 |
2.3.2 纤溶酶活力测定 | 第31页 |
2.3.3 发酵液制备方法 | 第31页 |
2.3.4 硫酸铵盐析 | 第31页 |
2.3.5 Sephadex G-25 凝胶过滤色谱 | 第31-32页 |
2.3.6 Phenyl-Sepharose HP 疏水相互作用色谱 | 第32页 |
2.3.7 CM-Sepharose FF 弱阳离子交换色谱 | 第32页 |
2.3.8 Superdex 75 凝胶过滤色谱 | 第32页 |
2.3.9 纤溶酶纯度鉴定 | 第32-33页 |
2.4 结果与讨论 | 第33-42页 |
2.4.1 20%硫酸铵盐析除多糖 | 第33页 |
2.4.2 Sephadex G-25 凝胶过滤色谱 | 第33-35页 |
2.4.3 Phenyl-Sepharose HP 疏水相互作用色谱 | 第35-36页 |
2.4.4 CM-Sepharose FF 弱阳离子交换色谱 | 第36-38页 |
2.4.5 Superdex 75 凝胶过滤色谱 | 第38-40页 |
2.4.6 蛹虫草纤溶酶的纯化回收情况 | 第40-41页 |
2.4.7 蛹虫草纤溶酶的纯度鉴定 | 第41-42页 |
2.5 本章小结 | 第42-43页 |
3 蛹虫草纤溶酶分离提纯方法的优化 | 第43-60页 |
3.1 引言 | 第43-44页 |
3.1.1 蛋白质的分离纯化条件优化的意义和原则 | 第43页 |
3.1.2 本实验需要解决的问题及原因分析 | 第43-44页 |
3.1.3 本章纯化路线优化思路 | 第44页 |
3.2 材料 | 第44-46页 |
3.2.1 实验材料及试剂 | 第44-45页 |
3.2.2 实验仪器及装置 | 第45页 |
3.2.3 主要溶液及配制 | 第45-46页 |
3.3 实验方法 | 第46-47页 |
3.3.1 Sephadex G-25 凝胶色谱 | 第46页 |
3.3.2 Phenyl-Sepharose HP 疏水相互作用色谱 | 第46页 |
3.3.3 改进的 CM-Sepharose FF 弱阳离子交换色谱 | 第46页 |
3.3.4 改进的 Superdex 75 凝胶色谱 | 第46页 |
3.3.5 纤溶酶纯度鉴定 | 第46-47页 |
3.3.6 蛹虫草纤溶酶的氨基酸序列测定 | 第47页 |
3.4 结果与讨论 | 第47-59页 |
3.4.1 Sephadex G-25 凝胶色谱 | 第47页 |
3.4.2 Phenyl-Sepharose HP 疏水相互作用色谱 | 第47-48页 |
3.4.3 改进的 CM-Sepharose FF 弱阳离子交换色谱 | 第48-55页 |
3.4.4 改进的 Superdex 75 凝胶过滤色谱 | 第55-56页 |
3.4.5 蛹虫草纤溶酶的纯化回收情况 | 第56-57页 |
3.4.6 纤溶酶纯度鉴定及分子量测定 | 第57-58页 |
3.4.7 蛹虫草纤溶酶的氨基酸序列测定 | 第58-59页 |
3.5 本章小结 | 第59-60页 |
4 蛹虫草纤溶酶的溶栓性质研究 | 第60-76页 |
4.1 引言 | 第60页 |
4.2 原料、试剂与仪器 | 第60-62页 |
4.2.1 原料 | 第60页 |
4.2.2 实验动物 | 第60页 |
4.2.3 主要材料和试剂 | 第60-61页 |
4.2.4 主要仪器和装置 | 第61页 |
4.2.5 主要溶液的配制 | 第61-62页 |
4.3 实验方法 | 第62-65页 |
4.3.1 蛹虫草纤溶酶体外抗凝血作用 | 第62页 |
4.3.2 蛹虫草纤溶酶对血凝块的溶解作用 | 第62页 |
4.3.3 蛹虫草纤溶酶类凝血酶活性及对纤维蛋白原与凝血酶交联作用影响.. | 第62页 |
4.3.4 蛹虫草纤溶酶对人血纤维蛋白原降解作用 | 第62-63页 |
4.3.5 蛹虫草纤溶酶对人血纤维蛋白降解作用 | 第63页 |
4.3.6 蛹虫草纤溶酶对部分血液成分的影响 | 第63页 |
4.3.7 蛹虫草纤溶酶对正常小鼠一般行为的影响 | 第63页 |
4.3.8 蛹虫草纤溶酶对具有血栓倾向的高血脂症动物纤溶能力的影响 | 第63-64页 |
4.3.9 小鼠体重称量与脏器指数的测定 | 第64-65页 |
4.4 结果与讨论 | 第65-75页 |
4.4.1 蛹虫草纤溶酶对血液的抗凝血作用 | 第65页 |
4.4.2 蛹虫草纤溶酶对血液凝块的溶解作用的影响 | 第65-66页 |
4.4.3 蛹虫草纤溶酶类凝血酶活性及对纤维蛋白原与凝血酶交联作用影响 | 第66-67页 |
4.4.4 蛹虫草纤溶酶对人血纤维蛋白原降解作用图谱 | 第67-68页 |
4.4.5 蛹虫草纤溶酶对人血纤维蛋白降解作用图谱 | 第68-69页 |
4.4.6 蛹虫草纤溶酶对部分血液成分的影响 | 第69-71页 |
4.4.7 蛹虫草纤溶酶对正常小鼠一般行为的影响 | 第71页 |
4.4.8 蛹虫草纤溶酶对具有血栓倾向的高血脂症动物纤溶能力的影响 | 第71-73页 |
4.4.9 小鼠体重与脏器指数变化情况 | 第73-75页 |
4.5 本章小结 | 第75-76页 |
结论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-85页 |
附录 A 蛹虫草纤溶酶氨基酸序列图谱 | 第85-88页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |