目录 | 第5-8页 |
致谢 | 第8-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
引言 | 第13页 |
1 拟南芥中N-Glycan的合成和功能 | 第13-19页 |
1.1 寡糖链与肽链的连接方式 | 第13-14页 |
1.2 N-glycan的合成和修饰 | 第14-17页 |
1.2.1 内质网中N-glycan的加工 | 第14-16页 |
1.2.2 高尔基体中N-glycan的加工 | 第16-17页 |
1.3 拟南芥中N-glycan的功能 | 第17-19页 |
2 生长素在植物生长发育中的作用 | 第19-24页 |
2.1 生长素在胚发育中的作用 | 第20-22页 |
2.2 生长素在胚后发育中的作用 | 第22-24页 |
3 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 突变体筛选和基因定位 | 第25-36页 |
1 材料和方法 | 第25-31页 |
1.1 材料 | 第25页 |
1.2 方法 | 第25-31页 |
1.2.1 水稻营养液配制 | 第25页 |
1.2.2 突变体筛选和生长条件 | 第25-26页 |
1.2.3 照片拍摄 | 第26页 |
1.2.4 根部细胞形态学观察 | 第26页 |
1.2.5 突变基因的定位与克隆 | 第26-27页 |
1.2.5.1 F2突变体的构建及遗传分析 | 第26页 |
1.2.5.2 F2突变体样品DNA的提取 | 第26-27页 |
1.2.5.3 突变基因的图位克隆 | 第27页 |
1.2.6 转基因互补验证 | 第27-30页 |
1.2.6.1 互补载体35S::OsMOGS的构建 | 第27-28页 |
1.2.6.2 互补载体35S::OsMOGS转化突变体愈伤 | 第28-29页 |
1.2.6.3 转基因阳性植株的鉴定 | 第29-30页 |
1.2.7 Promoter_(OsCYCB1;1)::GUS报告基因在根部表达分析 | 第30-31页 |
2 结果和分析 | 第31-35页 |
2.1 突变体筛选和表型分析 | 第31-32页 |
2.2 突变基因的图位克隆 | 第32-34页 |
2.3 转OsMOGS基因互补验证分析 | 第34-35页 |
3 小结和讨论 | 第35-36页 |
第三章 基因生物信息学和表达分析 | 第36-46页 |
1 材料和方法 | 第36-39页 |
1.1 材料 | 第36页 |
1.2 方法 | 第36-39页 |
1.2.1 进化树分析 | 第36页 |
1.2.2 OsMOGS基因的RT-PCR和qRT-PCR表达分析 | 第36-37页 |
1.2.3 OsMOGS基因在不同处理条件下的qRT-PCR表达分析 | 第37页 |
1.2.4 OsMOGS在烟草叶片表皮细胞的定位 | 第37-39页 |
1.2.4.1 融合蛋白载体35S-OsMOGS-sGFP的构建 | 第37-39页 |
1.2.4.2 农杆菌介导的烟草瞬时表达 | 第39页 |
2 结果和分析 | 第39-45页 |
2.1 植物中糖基水解酶家族63进化树分析 | 第39-42页 |
2.2 OsMOGS基因在水稻各组织中的表达分析 | 第42页 |
2.3 OsMOGS基因的启动子分析及逆境胁迫响应 | 第42-44页 |
2.4 OsMOGS蛋白的亚细胞定位分析 | 第44-45页 |
3 小结和讨论 | 第45-46页 |
第四章 osmogs表皮细胞和细胞壁结构分析 | 第46-52页 |
1 材料和方法 | 第46-48页 |
1.1 材料 | 第46页 |
1.2 方法 | 第46-48页 |
1.2.1 体视镜根毛观察 | 第46页 |
1.2.2 扫描电镜(Scanning Electron Microscopy,SEM)样品制备程序 | 第46页 |
1.2.3 透射电镜(Transmission Electronic Microscopy,TEM)样品制备程序 | 第46-47页 |
1.2.4 细胞壁纤维素含量的测定 | 第47-48页 |
1.2.5 纤维素合成酶CESA的qRT-PCR分析 | 第48页 |
2 结果和分析 | 第48-50页 |
2.1 根毛表型分析 | 第48-49页 |
2.2 成熟区根表皮细胞形态分析 | 第49页 |
2.3 成熟区根表皮细胞壁形态和根中纤维素含量分析 | 第49-50页 |
3 小结与讨论 | 第50-52页 |
第五章 osmogs生长素信号分析 | 第52-58页 |
1 材料和方法 | 第52-54页 |
1.1 材料 | 第52页 |
1.2 方法 | 第52-54页 |
1.2.1 生长素响应基因的qRT-PCR分析 | 第52页 |
1.2.2 生长素敏感性分析 | 第52页 |
1.2.3 生长素报告基因DR5::GUS表达分析 | 第52-53页 |
1.2.4 生长素含量测定方法 | 第53页 |
1.2.5 水稻根部生长素极性运输测定方法 | 第53-54页 |
2 结果和分析 | 第54-57页 |
2.1 生长素响应基因的qRT-PCR表达分析 | 第54-55页 |
2.2 生长素处理osmogs敏感性分析 | 第55-56页 |
2.3 生长素含量及极性运输分析 | 第56-57页 |
3 小结和讨论 | 第57-58页 |
第六章 可溶性糖恢复分析 | 第58-63页 |
1 材料和方法 | 第58-59页 |
1.1 材料 | 第58页 |
1.2 方法 | 第58-59页 |
1.2.1 可溶性糖恢复分析 | 第58页 |
1.2.2 可溶性糖含量分析 | 第58页 |
1.2.3 根恢复局部体视镜分析 | 第58页 |
1.2.4 GUS表达分析 | 第58页 |
1.2.5 糖处理对生长素信号影响分析 | 第58-59页 |
3 结果和分析 | 第59-62页 |
3.1 可溶性糖恢复osmogs表型分析 | 第59-60页 |
3.2 外源糖的施加对osmogs根中可溶性糖含量的分析 | 第60-61页 |
3.3 外源糖的施加对osmogs根中生长素信号的分析 | 第61-62页 |
4 小结和讨论 | 第62-63页 |
第七章 结论和展望 | 第63-66页 |
1 结论 | 第63-64页 |
2 展望 | 第64-66页 |
附录 试验方法 | 第66-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |