| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 核糖体 | 第11-15页 |
| 1.1.1 核糖体的生物功能 | 第11-12页 |
| 1.1.2 核糖蛋白在核糖体功能中扮演的角色 | 第12-13页 |
| 1.1.3 核糖体蛋白双拷贝基因 | 第13-15页 |
| 1.1.4 Ribosome code假说 | 第15页 |
| 1.2 酿酒酵母核糖蛋白基因L36A和L36B | 第15-16页 |
| 1.2.1 酿酒酵母RPL36A和RPL36B在染色体上的位置结构 | 第15-16页 |
| 1.2.2 RPL36A与RPL36B的比较 | 第16页 |
| 1.3 几种药物对细胞的影响 | 第16-19页 |
| 1.3.1 Paromomycin影响翻译的准确性 | 第16-17页 |
| 1.3.2 Rapamycin对细胞具有抗增殖作用 | 第17-18页 |
| 1.3.3 Tunicamycin影响细胞周期 | 第18-19页 |
| 1.3.4 Calcofluor white结合细胞壁 | 第19页 |
| 1.3.5 Caffeine影响细胞的TOR1/Ras/cAMP通路 | 第19页 |
| 1.4 本课题研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 菌种 | 第21页 |
| 2.1.2 质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.3 引物序列 | 第22-23页 |
| 2.1.4 酶及化学试剂 | 第23页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.1.6 培养基 | 第23-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 提取酵母基因组DNA | 第26页 |
| 2.2.2 引物设计与Touchdown PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.3 DNA产物纯化试剂盒 | 第27页 |
| 2.2.4 酶切体系(TaKaRa) | 第27-28页 |
| 2.2.5 酶连体系(TaKaRa) | 第28页 |
| 2.2.6 质粒DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.7 DH5α感受态细胞的制备与转化 | 第29页 |
| 2.2.8 酵母转化 | 第29-30页 |
| 2.2.9 酵母菌落PCR | 第30页 |
| 2.2.10 Spotting assay | 第30-31页 |
| 2.2.11 酵母菌在YEPD培养基中的生长曲线 | 第31页 |
| 2.2.12 RNA抽提 | 第31-32页 |
| 2.2.13 RNA变性电泳 | 第32-33页 |
| 2.2.14 RT-PCR | 第33页 |
| 2.2.15 β-半乳糖苷酶活性检测 | 第33-35页 |
| 第3章 结果与分析 | 第35-57页 |
| 3.1 本课题前期工作介绍 | 第35页 |
| 3.2 实验结果 | 第35-57页 |
| 3.2.1 利用spotting assay检测RPL36A与RPL36B的区别 | 第35-36页 |
| 3.2.2 利用spotting assay检测RPL36A与RPL36B染色体和质粒上的区别 | 第36-38页 |
| 3.2.3 分析RPL36同源基因在不同染色体上的差异性 | 第38-40页 |
| 3.2.4 分析RPL36基因在染色体上不同位置组合的差异性 | 第40-42页 |
| 3.2.5 利用报告基因去检测各个菌种 | 第42-43页 |
| 3.2.6 利用P4164系统检测不同时期内FY251的生理状态 | 第43-44页 |
| 3.2.7 完善替换染色体上RPL36A不同部分的构建 | 第44-47页 |
| 3.2.8 分析RPL36A基因在染色体上的各个改变对细胞的影响 | 第47页 |
| 3.2.9 利用2种不同的构建去破坏完整的RPL36B基因 | 第47-51页 |
| 3.2.10 利用spotting assay去检测RPL36A基因各个部位做改变后与内源RPL36B 2种不同破坏的差异性 | 第51-52页 |
| 3.2.11 利用生长曲线检测菌种对Paromomycin敏感行为 | 第52-57页 |
| 第4章 讨论与展望 | 第57-59页 |
| 4.1 讨论 | 第57-58页 |
| 4.2 展望 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献(References) | 第60-63页 |
