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补体调节蛋白CD59在螺旋藻藻蓝蛋白抗动脉粥样硬化中的调控作用研究

摘要第2-3页
Abstract第3页
引言第6-8页
第一章 材料和方法第8-21页
    1.1 材料第9-11页
        1.1.1 主要仪器设备第9页
        1.1.2 质粒、菌株第9页
        1.1.3 主要实验试剂第9-11页
    1.2 方法第11-21页
        1.2.1 CD5-9-pIRES质粒的扩增与提取第11-13页
            1.2.1.1 细菌的扩增培养第11-12页
            1.2.1.2 质粒的提取第12-13页
        1.2.2 钝顶螺旋藻藻蓝蛋白提取第13页
        1.2.3 造模与给药方法第13-14页
            1.2.3.1 造模方法与给药剂量第14页
            1.2.3.2 分组方法第14页
        1.2.4 RT-PCR对体内CD59表达水平的鉴定第14-16页
            1.2.4.1 引物的设计与合成第14-15页
            1.2.4.2 Total RNA的提取第15页
            1.2.4.3 Total RNA的逆转录反应第15-16页
            1.2.4.4 PCR反应第16页
        1.2.5 Western blot对体内CD59表达水平的鉴定第16-18页
            1.2.5.1 蛋白质提取操作过程第16-17页
            1.2.5.2 Western blot检测CD59蛋白表达量第17-18页
        1.2.6 TUNEL法检测细胞凋亡第18页
        1.2.7 原位杂交法检测CDK4基因第18-19页
        1.2.8 免疫荧光法检测细胞周期蛋白Cyclin D_1第19页
        1.2.9 免疫组化方法检测Fas、Bcl-2、MMP-2基因第19-20页
        1.2.10 统计学分析第20-21页
第二章 实验结果第21-38页
    2.1 CD59-pIRES质粒的鉴定第21页
    2.2 钝顶螺旋藻藻蓝蛋白的鉴定第21-22页
    2.3 各组ApoE(-/-)小鼠CD59mRNA表达水平第22-24页
        2.3.1 各组小鼠total RNA含量及纯度分析第22-23页
        2.3.2 各组小鼠CD59 mRNA表达水平分析第23-24页
    2.4 各组ApoE(-/-)小鼠CD59蛋白的表达量第24-25页
    2.5 各组ApoE(-/-)小鼠血清血脂生化水平的变化第25-26页
    2.6 各组ApoE(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的观察第26-28页
    2.7 细胞凋亡的检测结果第28-29页
    2.8 CDK4 mRNA水平的检测结果第29-31页
    2.9 细胞周期蛋白CyclinD_1的荧光免疫检测结果第31-32页
    2.10 Fas、Bcl-2、MMP-2基因的免疫组化结果第32-38页
        2.10.1 促凋亡基因Fas的蛋白表达量第32-34页
        2.10.2 抗凋亡基因Bcl-2的蛋白表达量第34-36页
        2.10.3 各组小鼠MMP-2基因的免疫组化结果第36-38页
第三章 讨论第38-43页
结论第43-44页
参考文献第44-47页
综述第47-57页
    综述参考文献第54-57页
攻读学位期间的研究成果第57-58页
附录第58-60页
致谢第60-61页

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