| 缩略语表 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 文献回顾 | 第12-24页 |
| 实验一 小鼠 MMP9 SIRNA 重组慢病毒包装,筛选及干扰效果检测 | 第24-36页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| 1.1 慢病毒载体 | 第24-25页 |
| 1.2 菌株 | 第25页 |
| 1.3 细胞株 | 第25页 |
| 1.4 试剂 | 第25-26页 |
| 1.5 仪器 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-31页 |
| 2.1 shRNA 的设计 | 第26页 |
| 2.2 小鼠 MMP9 shRNA 重组慢病毒载体制备 | 第26-27页 |
| 2.3 PCR 鉴定及 DNA 测序 | 第27-28页 |
| 2.4 高效 MMP9-shRNA 慢病毒质粒的筛选 | 第28-29页 |
| 2.5 慢病毒包装 | 第29-30页 |
| 2.6 慢病毒生物学滴度测定 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-34页 |
| 3.1 MMP9 基因 shRNAs 序列 | 第31-32页 |
| 3.2 连接转化产物阳性克隆的 PCR 鉴定 | 第32页 |
| 3.3 DNA 测序鉴定 | 第32-33页 |
| 3.4 RT-PCR 和 Western-blot 筛选、验证最佳干扰质粒 | 第33-34页 |
| 3.5 慢病毒载体的包装和滴度测定 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 实验二 抑制小鼠骨髓中 MMP9 的表达对血管瘤生成的影响 | 第36-45页 |
| 1 材料 | 第36-37页 |
| 1.1 试剂 | 第36页 |
| 1.2 仪器 | 第36-37页 |
| 2 方法 | 第37-40页 |
| 2.1 MMP9 siRNA 慢病毒抑制小鼠股骨骨髓中 MMP9 的表达 | 第37-38页 |
| 2.2 表达人 VEGF165 的 NIH/3T3 细胞株的培养 | 第38-39页 |
| 2.3 基因移植人 VEGF165 制备小鼠血管瘤模型 | 第39页 |
| 2.4 免疫组化检测小鼠腓肠肌中 CD31 的表达 | 第39-40页 |
| 2.5 统计方法 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-43页 |
| 3.1 Western-Blot 检测股骨骨髓中 MMP9 的表达 | 第40-41页 |
| 3.3 RT-PCR 检测人 VEGF165 mRNA 水平的表达 | 第41页 |
| 3.4 Western Blot 检测 VEGF165 蛋白水平的表达 | 第41-42页 |
| 3.5 新生血管检测 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 小结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
